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Alle Verfahren, die Tiere betreffen, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
1.18F-FDG PET- und CT-Bildgebung bei Mäusen
VORSICHT: Verwenden Sie Schutzausrüstung, wenn Sie mit Radioaktivität umgehen. Befolgen Sie alle geltenden behördlichen Verfahren beim Umgang mit Radioaktivität.
- Den Käfig mit den abzubildenden Mäusen 1 h vor der 18F-FDG-Injektion bei 37 °C auf ein warmes Bett legen, um den Verbrauch von 18F-FDG zu reduzieren
Anmerkung: Das Fasten der Mäuse für 4 - 16 h kann helfen, den Myokardverbrauch von 18F-FDG zu reduzieren.
- Wiegen Sie die Maus und notieren Sie ihr Gewicht.
- Betäuben Sie die Maus mit 2 - 3% Isofluran in Sauerstoff bei 0,5 - 2 l/min für 2 - 3 min in einer Anästhesiekammer, die bei 37 °C gehalten wird. Stellen Sie sicher, dass die Maus betäubt wurde, indem Sie den Zeh einklemmen; wenn die Maus anästhesiert wurde, wird keine Reaktion beobachtet. Tragen Sie eine Augensalbe auf die Augen auf, um Trockenheit während der Narkose zu vermeiden.
- Verdünnen Sie 18F-FDG (109 min radioaktive Halbwertszeit) in steriler Kochsalzlösung bei einer angepassten zerfallskorrigierten Injektionskonzentration von 70 - 75 μCi/100 μL.
Anmerkung: Befolgen Sie die vom Hersteller des PET-Scanners empfohlene Dosis von 18F für eine optimale Scanner-Bildgebung.
- Mit einer Insulinspritze mit einer 28-G-Nadel 70 - 75 μCi ziehen, die Radioaktivitätsdosis mit einem Dosiskalibrator messen und die Messung und den Zeitpunkt aufzeichnen. Legen Sie die Spritze in einen Bleispritzenhalter.
Anmerkung: Die Menge von 18F-FDG Radioaktivität in jeder Dosis wird mit einem Dosiskalibrator gemessen, der gemäß den Protokollen des Herstellers gegen ein Standardreferenzmaterial wie Cäsium-137 kalibriert ist. Der Zeitpunkt der Ablesung wird ebenfalls aufgezeichnet, um die Abklingkorrektur zu bestimmen.
- Stechen Sie in das distale Ende des Mausschwanzes und messen Sie den Blutzucker der Maus mit einem Blutzuckermessgerät.
- Erwärmen Sie den Schwanz für 1 - 2 min mit einer in warmem Wasser getränkten Gaze. Wischen Sie den Schwanz kurz vor der Injektion mit 70% Isopropanol ab, um die Schwanzvene zu erweitern. Verabreichen Sie 100 μl 18F-FDG (das gesamte Volumen in der Spritze) mit einer Bolusinjektion über die laterale Schwanzvene und notieren Sie den Zeitpunkt der Injektion. Messen Sie die verbleibende Dosis in der Spritze mit dem Dosiskalibrator und notieren Sie die Messung und den Zeitpunkt.
Anmerkung: Es wird noch eine gewisse Menge Sonde in der Spritze verbleiben. Die Verwendung von Insulinspritzen wird Spritzen vorgezogen, die über Luer-Locks-Nadeln mit Nadeln verbunden sind, da die Menge der Dosis, die nach der Verabreichung der Injektion in der Spritze/Nadel eingeschlossen ist, abnimmt.
- Legen Sie die injizierte Maus in die Anästhesiekammer, die bei 37 °C unter 1,5 - 2 % Isofluran gehalten wird, damit die Sonde 1 h vor dem PET-Scan über den systemischen Kreislauf der Maus verteilt werden kann.
Anmerkung: Es kann von Vorteil sein, die Blase vor dem Scannen zu entleeren, um eine einfachere 18F-FDG PET-Visualisierung der Tumore zu ermöglichen, die in den unteren Flanken der Maus implantiert sind.
- Nach 1 h legen Sie die Maus in eine Bildgebungskammer unter Nasenkonus-Isofluran-Anästhesie und bei 37 °C und befestigen Sie ihre Gliedmaßen mit medizinischem Klebeband in Rückenlage.
- Setzen Sie die Bildgebungskammer in den PET/CT-Scanner ein.
- Erfassen Sie die PET- und CT-Scans wie im Handbuch des PET/CT-Scanners beschrieben.
Anmerkung: Die PET-Bilder wurden für 600 s mit einem Energiefenster von 150 - 650 keV aufgenommen und unter Verwendung der Maximum-Likelihood-Erwartungsmaximierung mit Korrekturen für Photonendämpfung, Detektornormalisierung und Radioisotopenzerfall rekonstruiert (eine Streukorrektur wurde nicht angewendet). Die CT-Bilder werden mit einer 50 kVp, 200 μA Röntgenquelle und einem Flachdetektor in einem kontinuierlichen Modus für 50 s aufgenommen und mit dem Feldkamp-Algorithmus rekonstruiert.
- Nachdem die PET/CT abgeschlossen ist, nehmen Sie die Maus aus der Bildgebungskammer und lassen Sie sie sich in ihrem Käfig erholen.