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1. Injektionen
Vor intravenöse Schwanzvene der Injektion sollte die Rute Haut mit Isopropylalkohol Peelings für Sterilisation gereinigt werden. Über den distalen Schwanzvene mit geringer Totraum ½ CC U; Mäuse sollten dann mit 0,2 ml/20 g einer 20-mg Iod / ml jodhaltigen Kontrastmittels bloodpool (Binito Biomedical, Inc. in Ottawa, ON, Canada Exia 160XL) injiziert werden -100 28G ½ Insulinspritzen (Product # 329461, Becton Dickinson and Company, NJ, USA).
2. Tierische Vorbereitung
Nach 10 Minuten nach der Injektion sollten die Tiere für MicroCT Bildgebung vorbereitet werden. Erstens sollte das Tier in einer Box mit 2% Isofluran in 100% Sauerstoff bei einer Rate von 2,5 Liter pro Minute betäubt. Ein Auge Schmier-Salbe angewendet, um ein Austrocknen der Hornhaut während der Narkose zu verhindern. Die Körpertemperatur sollte bei 37 ° C durch ein Heizkissen aufrechterhalten werden.
3. MicroCT Imaging
Mäuse dann sollte auf einer MicroCT Einheit in der Lage, lebende Tiere Scans durchführen gescannt werden. Zur Minimierung der Bewegungsartefakte und Stabilität, können Mäuse in einem kommerziell erhältlichen Multi-Modalität Kammer (Numira Biosciences, Salt Lake City, UT) mit Bestimmung für Luft-und Abgas-gelegt werden. Zur Vermeidung einer Hypothermie Folge auf das Tier während MicroCT Scans, Gel Pads (Hot Kältetherapie Brace, CVS Pharmacy Woonsocket, RI), Warmer Toe (Heat Factory, Vista, CA) oder Thermipaq Ton Pads (Thermik, Springfield, IL) können verwendet werden. Legen Sie diese Heizkissen unter dem Schaum Bett, um die Maus bei 37 ° C zu halten, während die Vermeidung von direktem Kontakt mit dem Tier. Vitalfunktionen des Tieres wie Körpertemperatur, Atmung und Herzfrequenz sollte durch Anwendung der Small Animal Monitoring und Gating-Systeme wie z. B. SA Instruments (Stony Brook, NY) werden.
Die folgende Abbildung Protokoll kann als Richtschnur, um festzustellen, das entsprechende Scan-Parameter für jede MicroCT Einheiten verwendet werden. Die Tiere in diesem Experiment verwendet wurden bei 93 mm Auflösung auf einem volumetrischen CT-Scanner von GE eXplore Locus (GE Healthcare, London, Ontario) gescannt. Diese volumetrische Scanner verwendet eine 3500 x 1750 CCD-Detektor für Feldkamp Cone-Beam-Rekonstruktion. Die Plattform unabhängige Parameter von Strom, Spannung und Belichtungszeit konstant gehalten wurden, bei 450 uA, 80 kVp und 100 ms jeweils. Die Standard-Parameter der Belichtungszeit können Frames-per-View und die Anzahl der Ansichten verändert werden und könnte 100 ms, 5-8 und 360-720, jeweils mit insgesamt Scan-Zeit von etwa 20 Minuten. Die Bilder wurden mit dem Hersteller-eigenen EVSBeam Software rekonstruiert.
4. Image Rendering
Das rekonstruierte MicroCT Daten können für fortgeschrittene Isofläche, eindimensionalen oder zweidimensionalen Transferfunktion Rendering Bilder mit Seg3D Bildverarbeitungssoftware (Seg3D, verwendet werden http://www.sci.utah.edu/cibc/software ).
5. Repräsentative Ergebnisse
Bitte beachten Sie die beigefügte Abbildung eines Wildtyp-Maus mit eXIA160XL mit den Einstellungen in Methoden Abschnitt erwähnt gescannt.

Abbildung 1. Zweidimensionale Transfer Function (2DTF) Rendering Bild eines Wildtyp-Maus erstellt mit Seg3D Bildverarbeitungssoftware (Seg3D, http://www.sci.utah.edu/cibc/software ). Das Tier wurde mit eXIA160XL injiziert und 10 Minuten später bei 93 um isometrische Auflösung mit den Einstellungen in Methoden Abschnitt erwähnt gescannt MicroCT.
Video 1. Zweidimensionale Transfer Function (2DTF) Rendering Basis 360 °-Drehung Film eines Wildtyp-Maus erstellt mit Imagevis3D Bildverarbeitungssoftware (Imagevis3D, http://www.sci.utah.edu/cibc/software). Das Tier wurde mit eXIA160XL injiziert und 10 Minuten später bei 93 um isometrische Auflösung mit den Einstellungen in Methoden Abschnitt erwähnt gescannt MicroCT.
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