- Cut Schwanz Stück (3mm) und markieren den Ohren.
- Add 720 m l STE und 30 m l Proteinase K (10 mg / ml Stammlösung).
- Inkubation bei 55 ° C auf Heizblock und Wirbel jede Stunde für 3 Stunden bei Höchstgeschwindigkeit für 10 Sekunden.
- Inactivate Proteinase K bei 70 ° C für 5 Minuten.
- Quench auf Eis für 5 Minuten.
- Centrifuge tail DNA für 10 Minuten bei voller Geschwindigkeit.
- Dekantieren in neue Röhrchen mit 720 m l Isopropanol.
- Niederschlag DNA durch Invertieren des Röhrchens oder Vortexen.
- Spin down DNA für 5 Minuten bei voller Geschwindigkeit. Überstand entfernen.
- Wash-Pellet mit 70% Ethanol.
- Spin down genomische DNA 5 Minuten bei voller Geschwindigkeit. Überstand entfernen.
- Lassen DNA für 1-2 Minuten trocknen lassen.
- Resuspendieren DNA in 100-200 m l je nach Größe der Pellets.
- Das Röhrchen bei 55 ° C für 1 Stunde zu erleichtern Auflösung der DNA.
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In diesem Artikel
Protokoll
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare | |
|---|---|---|---|---|
| STE | Puffer | 100 mm Tris; pH 8,5 /5 mM EDTA /0,2 % SDS /200 mM NaCl / in H2O | ||
| TE | Puffer | 100 mM Tris; pH 5,0 /1 mM EDTA /10 mM NaCl |
Nachdrucke und Genehmigungen
