Method Article

Maus Blasenwand Injection

DOI:

10.3791/2523

July 12th, 2011

In This Article

Summary

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Maus Blasenwand Injektion ist ein nützlicher Ansatz zur orthotop Studie Blase Stammzell-und Tumorbiologie. Dieses zarte mikrochirurgische Methode kann bei sorgfältiger Technik und Praxis gemeistert werden.

Abstract

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Maus Blasenwand Injektion ist eine nützliche Technik, um orthotop Studie Blase Phänomene, einschließlich Stammzellen, glatte Muskelzellen und Tumorbiologie. Vor Beginn der Injektionen, muss der OP-Bereich mit Wasser und Seife und Desinfektionsmittel gereinigt werden. Chirurgische Geräte müssen vor dem Gebrauch und zwischen jedem Tier sterilisiert werden. Jede Maus ist unter inhalativen Isofluran-Narkose gelegt (2-5% für die Induktion, 1-3% für die Wartung) und seine Blase, indem Sie eine Mittellinie Bauchschnitt mit einer Schere ausgesetzt. Wenn die Blase voll ist, ist es teilweise dekomprimiert durch sanftes Pressen zwischen zwei Fingern. Die Zellsuspension von Interesse ist intramural in die Wand der Blase Kuppel mit einem 29 oder 30 Gauge-Nadel und 1 cc oder kleineren Spritze injiziert. Die Wunde wird dann geschlossen mit Wundklammern und die Maus darf auf eine wärmende Unterlage zu erholen. Blasenwand Injektion ist eine heikle mikrochirurgische Technik, die mit der Praxis gemeistert werden können.

Protocol

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1. Maus Blasenwand Injection

Wahl der Maus-Stamm, Alter und Geschlecht wird durch experimentelle Bedürfnisse diktiert. Wir verwenden Mäusen zwischen 8 und 12 Wochen alt, da es sich um ein Fenster von immunologischen Reife vor Seneszenz. Als allgemeine Richtlinie sollten Mäuse kommen mindestens eine Woche vor der experimentellen Manipulation, um Stress-induzierten Störfaktoren zu vermeiden.

  1. Reinigen Sie den OP-Tisch Oberfläche mit Wasser und Seife.
  2. Wischen Sie die OP-Tisch Oberfläche mit Cide Swipes oder antiseptischen Tüchern.
  3. Autoclave saubere chirurgische Instrumente vor in der Chirurgie verwendet werden. ....

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Discussion

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Maus Blasenwand Injektion ermöglicht die Implantation von speziellen Zellen in definierten Bereichen der Blasenwand. Diese Technik hat große Anwendungen für Mausmodelle von Blasenkrebs, glatte Muskelzellen und Stammzellbiologie. Per Definition erleichtert Maus Blasenwand Injektion Einführung von Blasenkrebs oder Stammzellen in einem orthotopen Lage, so dass deren Wachstum und Differenzierung in einem physiologisch relevanten anatomischen Kontext untersucht werden können. In der Tat, Dinney et al. zum ersten Mal beschrie.......

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Disclosures

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Keine Interessenskonflikte erklärt.

Acknowledgements

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Wir danken für die Unterstützung eines Pilot Zuschuss von der Stanford Pediatric Research Fund und K08DK087895-01 aus dem NIDDK.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Name des Reagenzes Firma Katalog-Nummer
Isofluran (Aerrane) Baxter NDC 10019-773-60
29 oder 30 Gauge-Nadeln Hamilton 7803-06 oder 7803-07
100 Mikroliter Spritze Hamilton 7656-01

References

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  1. Dinney, C. P., Fishbeck, R., Singh, R. K., Eve, B., Pathak, S., Brown, N., Xie, B., Fan, D., Bucana, C., Fidler, I. J., Killion, J. J. Isolation and Characterization of Metastatic Variants from Human Transitional Cell Carcinoma Passaged by Orthotopic Implantation in Athymic Nude Mice. The Journal of Urology. 154, 1532-1538 (1995).
  2. Singh, A. V., Franke, A. A., Blackburn, G. ....

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Mouse Bladder InjectionBladder Wall InjectionAbdominal IncisionCell Suspension InjectionWound Clip ClosureIsoflurane AnesthesiaSurgical Site SterilizationHistological AnalysisBladder Dome ExposureHamilton Syringe Use

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