Blasentumoren sind bei weiblichen Mäusen in eine minimal-invasive Weise durch Katheterisierung, lokale Verätzungen und späteren Haftung von Karzinomzellen, um den Brennvorgang Standorten etabliert.
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Methodenartikel
Einem orthotopen Modell des Murine Blasenkrebs
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
In diesem einfachen Verfahren werden Blasentumoren bei weiblichen Mäusen C57 durch den Einsatz von Katheterisierung, lokale Verätzungen und späteren Zelladhäsion gegründet. Nach ihrer Blasen transurethral sind katheterisiert und entleert werden die Tiere wieder katheterisiert, um das Einführen eines Platindrahtes in Blasen ohne Beschädigung der Harnröhre oder Blase zu ermöglichen. Die Katheter sind aus Teflon als Isolator für die Draht-, die elektrischen Strom in die Blase dirigiert eine Brandverletzung erstellen dienen. Ein Elektrokauter Einheit wird verwendet, um zu liefern 2,5 W bis das freie Ende des Drahtes, Abbrennen extrazellulären Schichten und bieten Anknüpfungspunkte für Karzinom-Zellen in Suspension in die Blase durch eine spätere Katheterisierung geliefert. Die Zellen bleiben in der Blase für 90 Minuten, nach denen der Katheter entfernt werden und die Blasen darf natürlich abtropfen lassen. Die Entwicklung des Tumors mittels Ultraschall überwacht. Besondere Aufmerksamkeit ist auf die Katheterisierung Technik im zugehörigen Video zu zahlen.
Protokoll
1. Animals
- Weibliche C57BL/6J-Mäuse (Mus musculus) verifiziert werden frei von ansteckenden Ektoparasiten Endoparasiten Helminthen und Antikörper zu 17 murine Viren durch den Verkäufer vor dem Versand. Mäuse sind in der AAALAC-akkreditierten Tierhaltung der Tulane University in Übereinstimmung mit Anleitung für die Pflege und Verwendung von Labortieren untergebracht. 1
- Genauer gesagt, werden die Mäuse in Gruppen gehalten (4-5 Mäuse / Käfig) in individuell belüfteten Polycarbonat cageswith microisolation Filterhauben auf Hartholz Betten. Sie sind ad libitum pelletiert Nagerfutter und Leitungswasser zur Verfügung gestel....
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Diskussion
Diese minimal-invasive Methode zur Ermittlung orthotopen Blasentumoren bei weiblichen Mäusen kann auch für andere Zelltypen als MB49 angewendet werden, obwohl unterschiedliche Ergebnisse zu rechnen. Wenn weniger aggressive Tumorzellen verwendet werden, wird die Erhöhung der Leistung leicht (unter Verwendung von 0,5 W-Schritten auf die neue optimale etablieren) ergeben eine Fläche von mehr zugänglich Tumorzellen Anhang und mehr Blase Inkubationszeiten für die eingeflößt Zellen wird eine größere Menge an Ertrag Zelladhäsi.......
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Offenlegungen
Tierversuche wurden in Übereinstimmung mit den Richtlinien und Vorschriften her durch die Institutional Pflege und Nutzung des Ausschusses Tulane University gesetzt durchgeführt.
Danksagungen
Diese Arbeit wurde von der National Science Foundation CAREER-Award (CBET-0846395) und der Abteilung für Vergleichende Medizin, Tulane University gefördert.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| C57Bl/6J-Mäuse | Jackson Laboratory | 000664 | 3–5 Wochen alt |
| Polycarbonat-Käfige und belüftetes Gestell | Laborprodukte | Super Mouse 750 | 327 mm x 190 mm x 143 mm |
| Hartholz-Einstreu | Harlan Laboratories | Laboratorium –Grad SaniChips | |
| Nagetierdiät | Harlan Laboratories | Nagetierdiät 2019 | |
| IV-Katheter | MWI Veterinary Supply | 009231 | 24 G x ¾ in. |
| Elektrokautergerät | Bovie Medical Corporation | Aaron 900 | |
| Ultraschallgerät | Sonosite | 180 Plus (Vet) | |
| MB49-Zelllinie | Wake Forest University Baptist Medical Center | N.A. | |
| DMEM | Invitrogen | 21063-029 | |
| Fötales Kälberserum | Gemini Bio Products | 100106 500A57B | |
| Penicillin-Streptomycin | Invitrogen | 15140-163 |
Referenzen
- Institute of Laboratory Animal Resources. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , National Academies Press. Washington, DC. (1996).
- Gunther, J. H., Jurczok, A., Wulf, T., Brandau, S., Deinert, I., Jocham, D. Optimizing syngeneic orthotopic murine bladder cancer (MB49). Cancer Res. 59, 2834-2837 (1999).
- Zha....
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Nachdrucke und Genehmigungen
