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Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
>1. Fußabdruck-Analyse
- Einrichten der Start- und Landebahn (Abbildung 1A)
- Schneide ein Stück weißes Papier (29,7 cm x 42 cm x 0,09 mm) in Längsrichtung in drei gleich breite Bahnen aus. Lege ein Blatt weißes Papier (9,9 cm x 42 cm) auf den Tisch.
- Setzen Sie das dunkle Zielfeld an das distale Ende des Papiers. Platzieren Sie andere Schachteln (ungefähr in der gleichen Länge wie das Papier) mit den Wänden auf beiden Seiten des Laufstegs, um das Entweichen von Mäusen zu verhindern.
- Geben Sie schwarze und rote Tinte in separate Petrischalen (35 mm Durchmesser).
>2. Trainingseinheit
HINWEIS: Führen Sie die Trainingseinheit erst im Alter von 4 Wochen durch.
- Lege eine Maus auf das proximale Ende des Papiers (mit dem Kopf in Richtung des Torfelds). Lassen Sie die Maus vom proximalen Ende bis zum Torraum laufen. Entfernen Sie die Maus aus dem Zielfeld. Wenn die Maus auf dem Papier stehen bleibt, schieben Sie die Maus vorsichtig mit dem Finger zum Zielfeld.
- Halten Sie die Maus fest, indem Sie das Genick zwischen Daumen und Zeigefinger greifen, um die Bewegung der Vordergliedmaßen zu begrenzen. Fassen Sie dann den Rücken und den Schwanz zwischen dem Handballen und den anderen Fingern, um die Bewegung der Hintergliedmaßen zu begrenzen.
Anmerkung: Unzureichendes Halten der Maus führt zu Tintenklecksen auf der Kleidung.
- Tauchen Sie die Unterseite der Vordergliedmaßen in rote Tinte und die Unterseite der Hintergliedmaßen in schwarze Tinte. Platzieren Sie die Maus sofort auf dem proximalen Ende des Papiers (richten Sie den Kopf in Richtung Zielfeld). Lassen Sie die Maus vom proximalen Ende bis zum Torraum laufen. Wenn die Maus auf dem Papier stehen bleibt, schieben Sie die Maus vorsichtig mit dem Finger zum Zielfeld.
- Entfernen Sie die Maus aus dem Zielfeld. Gehen Sie zur Testsitzung.
>3. Testsitzung
- Richten Sie nach der Schulung die Start- und Landebahn mit einem neuen, zugeschnittenen Blatt weißem Papier für Fußabdrücke ein.
- Halten Sie die Maus fest, indem Sie das Genick zwischen Daumen und Zeigefinger greifen, um die Bewegung der Vordergliedmaßen zu begrenzen. Fassen Sie dann den Rücken und den Schwanz zwischen dem Daumenballen und den anderen Fingern, um die Bewegung der Hintergliedmaßen zu begrenzen.
- Tauchen Sie die Unterseite der Vordergliedmaßen in rote Tinte und die Unterseite der Hintergliedmaßen in schwarze Tinte. Setzen Sie die Maus sofort auf das proximale Ende des Papiers. Lassen Sie die Maus vom proximalen Ende bis zum Torfeld wandern.
HINWEIS: Da Mäuse die Dunkelheit bevorzugen, wird der Gang ruhiger, wenn sich die Maus dem dunklen Zielfeld nähert. Wenn die Maus auf dem Papier stehen bleibt, schieben Sie die Maus vorsichtig mit dem Finger zum Zielfeld. Wenn dann keine zuverlässigen Footprints für die Analyse abgerufen werden, weil die Maus gestoppt wurde, wiederholen Sie die Testsitzung.
- Bringen Sie die Maus aus dem Torfeld in den Heimatkäfig zurück. Reinigen Sie die Torbox nach jeder Testsitzung mit 70% Ethanol. Trocknen Sie das mit den Füßen bedruckte Papier an der Luft.
>4. Analyse von Fußabdrücken
- Erhalten Sie drei Messungen jedes Parameters (Schrittlängen der Vorder- und Hintergliedmaßen, Breite der Vorder- und Hintergliedmaßen, Überlappung zwischen Vorder- und Hintergliedmaße, Abbildung 1B) mit einem Lineal aus bedrucktem Papier.
Anmerkung: Da die Fußabdrücke der proximalen und distalen Enden häufig große Schwankungen aufweisen, weil sie anhalten oder laufen, wählen Sie den Teil mit einem gleichmäßigen Gangmuster der Fußabdrücke. Der mittlere Teil des bedruckten Papiers eignet sich in der Regel für die Analyse.
- Für die Schrittlänge misst du die Abstände zwischen den gleichen Teilen der Pfote (z. B. Pfotenballen oder Zehen).
- Ziehen Sie für die Breite der vorderen Basis eine Linie zwischen aufeinanderfolgenden rechten (oder linken) vorderen Fußabdrücken. Messen Sie dann die Länge der vertikalen Linie vom Pad des linken (oder rechten) vorderen Fußabdrucks bis zu der Linie, die zwischen den rechten (oder linken) Fußabdrücken gezogen wird.
- Ziehen Sie für die Breite der hinteren Basis eine Linie zwischen aufeinanderfolgenden rechten (oder linken) hinteren Fußabdrücken. Messen Sie dann die Länge der vertikalen Linie vom Ballen des linken (oder rechten) hinteren Fußabdrucks bis zu der Linie, die zwischen den rechten (oder linken) Fußabdrücken gezogen wird.
- Messen Sie für die Überlappung den Abstand zwischen den Ballen des linken (oder rechten) vorderen und hinteren Fußabdrucks.
- Mitteln Sie die drei Messungen für jede Person. Verwenden Sie den individuellen Durchschnitt jedes Parameters für die statistische Analyse.
- Verwenden Sie für die Schrittlänge den Durchschnitt der einzelnen Durchschnittswerte der linken und rechten Schritte.
- Für eine Asymmetrie der Schrittlänge verwenden Sie den absoluten Wert der Differenz zwischen den einzelnen Durchschnittswerten der Schrittlänge der linken und rechten Gliedmaße.
- Für die statistische Analyse der anderen Parameter (Breite der vorderen Basis, Breite der hinteren Basis und Überlappung) verwenden Sie direkt den individuellen Durchschnitt.
