Alle Eingriffe mit menschlichen Teilnehmern wurden in Übereinstimmung mit den institutionellen, nationalen und internationalen Richtlinien für das Wohlergehen des Menschen durchgeführt und vom lokalen institutionellen Prüfungsausschuss überprüft.
>1. Prostata-Schneidegerät
- Kaufen Sie das Prostata-Schneidegerät (Materialtabelle). Alternativ kannst du einen Klingengriff mit einem 3D-Drucker drucken.
>2. Tumor-Targeting
- Überprüfen Sie die klinischen Notizen, um die Indexläsion zu identifizieren, wie sie durch eine diagnostische Biopsie angezeigt wurde, z. B. linker hinterer Teil.
- Überprüfen Sie MRT-Bilder, um die Position des oben genannten Tumors zu messen.
- Finden Sie die Sequenz, in der der Tumor in der Axialebene am sichtbarsten ist, z. B. T2-gewichtet.
- Scrollen Sie durch axiale Bilder, um das Bild zu finden, bei dem der Tumor am größten ist, und drucken Sie das Bild als Referenz aus.
- Messen Sie im entsprechenden koronalen Bild den Abstand von der Basis der Prostata zur gewählten axialen Position und die gesamte Länge der Prostata von der Spitze bis zur Basis (mm) und drucken Sie es als Referenz aus.
>3. Sammlung von Prostata
- Überprüfen Sie die Patientennotizen, um sicherzustellen, dass für dieses Verfahren und alle nachgelagerten Forschungsanträge eine angemessene Einwilligungserklärung eingeholt wurde.
- Nach einer radikalen Prostatektomie wird die Prostata in einem trockenen Topf gesammelt. Stellen Sie sicher, dass der Prostata kein Formalin oder ein anderes Fixiermittel zugesetzt wurde.
- Transfer an einen geeigneten sterilen Ort für die Probenahme, z. B. eine Laminar-Flow-Haube in einem Pathologielabor.
- Fahren Sie so schnell wie möglich mit der Probenahme fort, wenn frisches Gewebe benötigt wird.
HINWEIS: Für bestimmte Anwendungen (z. B. die Beurteilung von DNA, die nicht so schnell abgebaut werden sollte wie RNA) kann es angebracht sein, die Probe zu kühlen und am nächsten Tag Proben zu entnehmen.
>4. Probenvorbereitung
Bereiten Sie die - Laminar-Flow-Haube und das Prostata-Schneidegerät gemäß den lokalen Dekontaminationsverfahren unter Verwendung steriler Techniken vor. Sprühen Sie hier 70% Ethanol und wischen Sie über alle Oberflächen. Verwenden Sie sterile Einwegnadeln und Skalpelle. Verwenden Sie die Schneideklingen bis zu dreimal; Nach jedem Gebrauch in heißem Seifenwasser waschen, dann mit 70% Ethanol besprühen und abwischen.
- Wiegen Sie die Prostata (g) mit einer Standardwaage.
- Tusche die Prostata. Malen Sie die linke Seite mit blauer Tinte und die rechte Seite mit schwarzer Tinte. Die gesamte Kapsel und die Samenbläschen mit Tinte bedecken, um später die Operationsränder zu kennzeichnen.
HINWEIS: Die Freihandverfahren können lokal variieren und entsprechend geändert werden.
>5. Prostata-Slicing
- Montieren Sie die Schneidevorrichtung, indem Sie die Wände senkrecht in die Basis des Ständers einsetzen (Abbildung 1A).
- Platzieren Sie die Prostata so, dass die Basis und die Spitze zu gegenüberliegenden Wänden zeigen, mit der hinteren Seite nach unten und der vorderen nach oben. Platzieren Sie goldene Stecknadeln um die Prostata. Schieben Sie die Prostata bei Bedarf leicht nach innen, um einen festen Sitz zu erhalten, der die Prostata beim Schneiden stützt.
- Messen Sie die Prostatalänge von der Basis bis zur Spitze mit einem Lineal und vergleichen Sie sie mit der im MRT gemessenen Prostatalänge. Wenn die Prostata geschrumpft ist, nehmen Sie eine Ad-hoc-Korrektur des erwarteten Abstands von der Basis zum Zielquerschnitt vor. Wenn die volle Länge der Prostata im MRT-Bild beispielsweise 50 mm beträgt, aber bei der Messung mit einem Lineal an dieser Stelle angezeigt wird, dass sie auf 45 mm geschrumpft ist, dann reduzieren Sie die erwartete Schnittposition um 10 %.
- Messen Sie von der Basis bis zur gewünschten Querscheibe. Wählen Sie den Pin aus, der sich am nächsten an dieser Messung befindet, um ihn zu schneiden.
- Tragen Sie Kettenhemdhandschuhe, um Verletzungen zu vermeiden, halten Sie die Schneidevorrichtung fest (Abbildung 1B), platzieren Sie die Klingen auf beiden Seiten des identifizierten Stifts und verwenden Sie den Abstandshalter, um die Klingen in einem Abstand von 5 mm zu halten. Nehmen Sie eine Schnitte, indem Sie die Klingen langsam und fest mit langen Strichen nach unten, vorwärts und rückwärts bewegen (Abbildung 1C). Stellen Sie sicher, dass eine vollständige Scheibe abgetrennt wurde, bevor Sie das Gerät zerlegen.
- Entfernen Sie Wände und Stifte und nehmen Sie die Scheibe vorsichtig mit Handschuhen auf eine sterile Korkplatte.
>6. Gewebe-Probenahme
- Untersuchen Sie die Querscheibe visuell und vergleichen Sie sie mit dem axialen MRT-Bild. In einigen Fällen kann der Tumorbereich blasser erscheinen als das umgebende Gewebe.
- Tapfen Sie die Querscheibe vorsichtig ab. In einigen Fällen kann sich der Tumor fester anfühlen als das umgebende Gewebe.
- Wählen Sie anhand des axialen MRT-Bildes einen oder mehrere Bereiche für die Probenahme aus.
- Nehmen Sie Biopsiestempel des gewünschten Gewebebereichs.
- Drücken Sie mit einem 6-mm-Stempel auf die gewünschte Stelle des Gewebes.
- Drehen Sie die Gewebestanze an der Stelle und nach unten gegen den Korken, um eine vollständige Trennung zu gewährleisten, und verwenden Sie bei Bedarf ein scharfes Skalpell, um zu trennen.
- Entfernen Sie den Stempel und setzen Sie ihn bei Bedarf durch Auswerfen mit dem Kolben in Rohre/Formen ein.
- Wiederholen Sie dies bei Bedarf für weitere Tumor- und gutartige Proben mit separaten sterilen Biopsiestempeln. Tusche die Löcher, an denen die Stempel genommen wurden, rot ein.
- Notieren Sie sich die Position jedes Schlages zusammen mit dem Gewicht der Prostata und allen Beobachtungen zur Gewebefarbe/-festigkeit.