Dissektion von Gaumengewebe aus einem adulten Mausmodell: Ein chirurgischer Eingriff zur Entnahme von hartem Gaumen und weichem Gaumen aus der Mundhöhle einer erwachsenen Maus

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Quelle: Xuan Ngo, Y. et al. Isolierung und Kultur primärer oraler Keratinozyten aus dem Gaumen adulter Mäuse. J. Vis.(2021)

Dieses Video zeigt ein chirurgisches Verfahren zur Präparierung des Gaumengewebes aus einem Mausmodell.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

>1. Dissektion von Gaumengewebe von erwachsenen Mäusen

Opfern Sie eine erwachsene C57BL/6J-Maus (entweder männlich oder weiblich) durch Gebärmutterhalsluxation in Übereinstimmung mit den Tierschutzvorschriften der Einrichtung.
1. Entfernen Sie die Haare um den Mund mit einem Rasierer. Mit einer Schere von der Wange zum Kiefer hin beidseitig abschneiden.
  Anmerkung: Die Maus muss vor dem Töten betäubt werden. Es wird eine anästhetische Mischung aus Medetomidin, Midazolam und Butorphanol verwendet (siehe Materialtabelle).
Öffne den Mund mit einer Pinzette weit und sauge das Blut mit einem Wattestäbchen auf. Um den Gaumen zu desinfizieren, wischen Sie die Innenseite des Mundes mit einem Wattestäbchen ab, das 10% Povidon-Jod enthält.
Um den Gaumen der Maus zu entnehmen, verwenden Sie zunächst eine chirurgische Skalpellklinge, um einen marginalen Schnitt in voller Dicke entlang der Gaumenseite der Oberkieferzähne vorzunehmen. Zerlege dann vorsichtig den gesamten Gaumen mit einem Raspatorium.
Anmerkung: Ein Raspatorium ist ein Werkzeug, das verwendet wird, um einen mukoperiostalen Lappen anzuheben (siehe Materialtabelle) (Abbildung 1B).
Übertragen Sie das Gaumengewebe schnell in ein 15-ml-Röhrchen mit 4 ml Komplettmedium + antibiotisch-antimykotischer Lösung. Bewahren Sie die Taschentücher bis zur Inkubation auf Eis auf.
Anmerkung: Für die Entnahme von mehreren Mäusen kann das Gaumengewebe bis zu 4 Stunden auf Eis gehalten werden.

Zugriff eingeschränkt. Bitte melden Sie sich an oder starten Sie eine Testversion, um diesen Inhalt anzuzeigen.

Ergebnisse

figure-results-1
Abbildung 1: Überblick über das Dissektionsverfahren und die Isolierung von oralen Keratinozyten der Maus. (A) Schematische Darstellung der Mundhöhle der Maus. (B) Instrumente zur Präparierung des Gaumens und zur Isolierung oraler Keratinozyten von Mäusen. (C) Hellfeldbild des Gaumens der Maus. Maßstabsbalken: 100 μm. (D