Isolierung von zirkumvallaten Papillen (CVP) Epithel aus Mausmodell: Ein enzymatisches Verfahren zur Trennung von CVP-Epithel aus der Mauszunge

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Quelle: Shechtman, L. A. et al. Erzeugung und Kultur von lingualen Organoiden, die aus adulten Stammzellen des Mausgeschmacks gewonnen wurden. J. Vis. Exp. (2021)

In diesem Video beschreiben wir die Isolierung von zirkumvallaten Papillen (CVP) Epithel aus einer Mauszunge.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

>1. Isolierung des CVP-Epithels

Euthanasieren Sie die Mäuse mit CO₂ -Erstickung gemäß den IACUC-Vorschriften, gefolgt von einer zugelassenen sekundären Methode wie bilateraler Thorakotomie, Gebärmutterhalsluxation, Enthauptung oder Exsanguination.
Verwenden Sie eine große, sterile Präparierschere, um die Wangen zu schneiden und den Kiefer zu brechen. Heben Sie die Zunge an und schneiden Sie das Zungenbändchen, um die Zunge vom Boden der....

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Ergebnisse

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Abbildung 1: Präparierte Zunge und geschältes ZVP-Epithel. (A) Die Zunge wird präpariert und die vordere Zunge wird entfernt, indem knapp vor der intermolaren Eminenz (gestrichelte Linie) geschnitten wird, wobei die hintere Zunge, die den ZVP enthält, übrig bleibt (Black Box) (B) Eine Nadel wird knapp vor der intermolaren Eminenz (schwarzer Pfeil) .......