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Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
>1. Bildgebung der schwangeren Maus
- Legen Sie die Maus in Rückenlage auf die Überwachungsplattform. Die Maus erhält kontinuierlich ein Isofluran-Anästhetikum (zwischen 1,5 und 2,5 %) und Sauerstoff (1 l/min) über den Nasenkonus. Kleben Sie alle Pfoten vorsichtig an die Herzfrequenzüberwachungspads auf der Plattform.
- Tragen Sie 1–2 ml Ultraschall-Transmissionsgel auf den Bauch auf.
- Positionieren Sie die Ultraschallsonde mit dem manuellen Motortisch auf dem Unterbauch.
- Lokalisiere die Blase, die als mit Flüssigkeit gefüllter dunkler Kreis direkt neben der Vaginalöffnung erscheinen sollte.
- Sobald sich die Blase lokalisiert hat, bewegen Sie die Sonde sehr langsam nach oben, um die schwangere Gebärmutter sichtbar zu machen, die als zylindrische Form mit runden Bereichen an den Schwangerschaftsstellen erscheinen sollte. Dies kann so beschrieben werden, dass es aussieht wie Perlen an einer Kette.
- Sobald die schwangere Gebärmutter identifiziert wurde, beginnen Sie mit der 2D-Bildgebung.
>2. Die 2D-Ultraschallbildgebung (Abbildung 1)
- Sobald die schwangere Gebärmutter identifiziert wurde, beginnen Sie an der Schwangerschaftsstelle, die der Blase am nächsten liegt, und bewegen Sie sich langsam und nacheinander nach Cephalad, um die Anzahl und Lage der Schwangerschaftsstellen zu bestimmen.
- Wenn die Niere, Milz oder Leber sichtbar sind, positionieren Sie die Sonde näher kaudal (näher an der Blase), da der Benutzer zu weit gegangen ist.
- Stellen Sie sich das kontralaterale Uterushorn auf die gleiche Weise vor.
- Frieren Sie das Bild ein, wenn sich der Ultraschallrahmen in der Mitte der Implantations-/Schwangerschaftsstelle befindet, um es für spätere Analysen und Messungen zu speichern.
HINWEIS: Es dauert weniger als eine Sekunde, bis das Bild eingefroren und für die spätere Analyse gespeichert ist.
- Messen Sie den Implantationsabstand mit der echoarmen Dezidualisierungsreaktion als Marker, indem Sie zuerst manuell auf das Werkzeug "Messen" und dann auf die Position einer Implantationsstelle klicken. Ziehen Sie anschließend den Cursor auf die nächste Implantationsstelle und klicken Sie, um eine Linie zu zeichnen, deren Entfernung der Computer automatisch meldet. Die Software meldet dann, um welche manuelle Messung es sich handelt. Dieser Schritt ist nicht computergestützt, sondern beruht darauf, dass der Benutzer den Abstand zwischen den dezidualisierten Stellen markiert, indem er eine Linie zwischen den dezidualisierten Stellen zieht, für die das Programm eine Messung bereitstellt.
- Messen Sie die Größe der Implantation, die Größe des Schwangerschaftssacks und die Größe des fötalen Pols.