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Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
>1. Vorbereitung vor der Operation
- Instrumentensterilisation: Chirurgische Instrumente vor der Operation in einem Autoklaven (121 °C für 15 min) dampfsterilisieren. Verpacken Sie die Instrumente in einen Metallbehälter und bewahren Sie sie auf, bis sie in der Operation verwendet werden.
- Einrichtung der OP-Plattform: Weisen Sie für die Operation eine Bankfläche von mindestens 60 cm x 60 cm zu. Reinigen Sie die Oberfläche der Fläche mit 75% Alkohol und bedecken Sie sie mit einem medizinischen Einweghandtuch. Legen Sie eine sterile Packung mit chirurgischen Instrumenten, Reagenzien und chirurgischen Gegenständen auf ein medizinisches Einweghandtuch im oberen 1/3 des Bereichs. Lassen Sie die restlichen 2/3 der Fläche für den chirurgischen Eingriff sauber. Fügen Sie ein Hotpad unter dem chirurgischen Pad hinzu, um die Wärme zu unterstützen.
- Zubereitung von Tieren
- Setzen Sie das Tier (C57BL/6J-Mäuse, männlich, 8 Wochen alt) in die Induktionskammer. Schalten Sie den Verdampfer bei einem Induktionspegel von 4 % für Isofluran und 4 l/min für Sauerstoff ein. Nachdem das Tier vollständig betäubt wurde, halten Sie das Anästhetikum mit dem Nasenkonus und die Anästhesieabgabe während der Operation auf einem Niveau von 1,5 % für Isofluran und 0,4 l/min für Sauerstoff. Überwachen Sie das Tier auf Atmung.
- Tragen Sie Chlortetracyclinhydrochlorid-Augensalbe auf, um Hornhauttrockenheit während der Operation zu verhindern.
- Rasieren Sie den Operationsbereich auf der dorsalen Fläche von der unteren Brustregion bis zum oberen Rand des Sakralbereichs mit einem Kleintiertrimmer. Entfernen Sie das rasierte Fell mit Taschentüchern.
- Tragen Sie die Enthaarungscreme auf die rasierte Stelle auf und lassen Sie sie dort nicht länger als 3 Minuten. Entfernen Sie die Creme mit Gaze und spülen Sie sie mit 2 ml 0,9% steriler Kochsalzlösung ab.
- Platzieren Sie ein maßgefertigtes chirurgisches zylindrisches Pad (Abbildung 1A) unter dem Bauch der Maus, um die Lendenwirbelsäule anzuheben und den chirurgischen Eingriff zu erleichtern.
>2. Exposition des lumbalen Drittels gegenüber dem lumbalen Quintel (L3–L5) Dornfortsätze
- Berühren Sie mit dem Zeigefinger die subkutanen Dornfortsätze der Lendenwirbel, die weiter nach außen gerichtet sind, und vergleichen Sie sie mit Brustwirbeln und Sakralwirbeln, um die Lendenwirbel zu identifizieren.
- Spülen Sie die Haut mit 75% Alkohol ab. Führen Sie mit einer Skalpellklinge einen 3–4 cm langen Hautschnitt über die Lendenwirbelsäule vom mittleren Brustbereich bis zur Hüfte durch, um die Faszie freizulegen.
- Identifizieren Sie die Lendenwirbelsäule anhand der Morphologie der hinteren Faszie, die an den Spitzen der Dornfortsätze eingesetzt wird. Im Detail unterscheiden sich die Faszien der dritten Lendenwirbelsäule (L3) bis zur ersten Sakralfaszie (S1) von den anderen Faszien durch ihre "V"-Formen. Die letzte "V"-Spitze verbindet sich mit der ersten Sakralfaszie (S1) und die erste "V"-Spitze entspricht dem Dornfortsatz L3 (Abbildung 1B).
- Die hinteren paraspinösen Muskelschnitte entlang der Dornfortsätze von L3 bis L5 werden beidseits seitlich mit einer Skalpellklinge vorgenommen (Abbildung 1C). Kontrollieren Sie die Schnitttiefe in Richtung der Facetten, um Blutungen zu reduzieren.
- Trennen Sie die Muskelschichten mit zwei Augenzangen, um die Dornfortsätze L3 bisL 5 und die supraspinösen Bänder freizulegen.
>3. Resektion der Dornfortsätze L 3–L 5 zusammen mit den Bändern
- Trennen Sie einzelne Dornfortsätze, indem Sie die interspinösen Bänder mit einer Venusschere abschneiden (Abbildung 1D).
- Die Dornfortsätze L3–L5 zusammen mit den interspinösen Bändern mit einer Venusschere resezieren (Abbildung 1E).
- Vernähen Sie den Hautschnitt mit sterilem Seidengeflecht (Nahtgröße 5,0) ohne erneute Befestigung der paravertebralen Muskeln.
- Tragen Sie Chlortetracyclinhydrochlorid-Augensalbe auf die Operationsstelle auf.
