Modellierung des transuterinen fetalen Trachealverschlusses im Mausmodell: Ein chirurgisches Verfahren zur Ligatur der fetalen Luftröhre bei einer trächtigen Maus

Zusammenfassung

Quelle: Aydın, E. et al. Transuterines fetales Trachealverschlussmodell bei Mäusen. J. Vis. Exp. (2021)

Dieses Video zeigt die transuterine tracheale Okklusion eines Mausfötus bei einer trächtigen Maus. Dieses Modell kann verwendet werden, um den Einfluss einer verschlossenen Luftröhre auf die Lungenentwicklung zu untersuchen.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

>1. Laparotomie

1. Reinigen Sie die Bauchoberfläche mit Alkohol und Povidon-Jod. Halten Sie während der gesamten Operation sterile Bedingungen aufrecht.
2. Führen Sie einen vertikalen Schnitt für die Laparotomie von trächtigen Muttertieren durch. Schneiden Sie alle Schichten separat ab.
3. Identifiziere die Gebärmutterhörner auf jeder Seite.
4. Bestimmen Sie die für die Operation in Frage kommenden Föten.
   Anmerkung: Operieren Sie nicht an den Föten, die der Vagina am nächsten sind.
5. Operieren Sie zwei Föten in jedem Gebärmutterhorn, wenn es eine gerade Anzahl von Föten auf jeder Seite gibt (4 meistens), und 1 Fötus in jedem Gebärmutterhorn, wenn es eine ungerade Anzahl von Gebärmutter gibt (3 meistens).

2. Trachealverschluss (TO)

1. Verwenden Sie zur Visualisierung eine Brille mit 2,5-facher Vergrößerung.
2. Positionieren Sie das Gebärmutterhorn quer.
3. Nehmen Sie die Welpen mit dem Gesicht nach oben zwischen zwei Finger, wobei Sie die Augen der Welpen und den Schwanz als Leitfaden verwenden, um den Fötus zu positionieren.
4. Üben Sie sanften Druck auf den Kopf des Welpen aus, um die Streckung des Kopfes und damit die Visualisierung des Halses zu ermöglichen.
5. Verwenden Sie eine Naht aus Polypropylen 6,0 mit einer atraumatischen Nadel, um die TO durchzuführen (Abbildung 1). Halten Sie die Plazenta seitlich und weit von den Ein- und Austrittspunkten der Nadel entfernt.
6. Führen Sie die Nadel quer durch die Seite der Gebärmutter weg von der Plazenta durch den 1/3 vorderen Teil des Halses ein.
7. Bewegen Sie die Nadel vorsichtig bis zur Mittellinie des Halses und richten Sie sie auf den vorderen Teil, dann verlassen Sie den Hals zwischen der Luftröhre und gegenüber der Halsschlagader und der Gebärmutter
.
8. Verknoten Sie die Naht und achten Sie darauf, die Unversehrtheit der Membranen und der Gebärmutterwand zu erhalten und die Nabelschnur während des Verknotens sicher zu halten.

>3. Verschluss der Bauchdecke

1. Setze das Gebärmutterhorn im Bauch wieder ein.
2. Injizieren Sie vor dem Verschluss 2 ml warme sterile Kochsalzlösung in die Bauchhöhle.
3. Legen Sie eine laufende 5/0-Polyglactin-Naht an, um die Bauchdecke zu schließen, und schließen Sie die Haut mit einer nicht verlaufenden Seidennaht.
4. 0,1 mg/kg Buprenorphin intraperitoneal zur Analgesie auftragen und die Genesung des Muttertiers in einem warmen Inkubator ermöglichen.

Ergebnisse

Abbildung 1. Trachealer Verschluss. (A) Die transuterine Naht, die durch den Hals verläuft. (B) Schematische Darstellung der Strukturen nach dem Durchgang der Naht und vor dem Knoten. Abkürzungen: C = Halsschlagader; J = Halsvene; T = Luftröhre; E = Speiseröhre; V = Wirbel.

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Buprenorphin	von Pharmaceutical	NDC 42023-179-05	Für die Regionalanästhesie
Lupe	USA Medizinisch-chirurgisch	SLR-250LBLK	Mindestens 2,5x
Naht aus Seide	Ethikon	VCP682G	4-0, 24 mm, schneidend
Isofluran	Halogenkohlenstoff Biowissenschaften NDC	Artikel-Nr.: 66794-017-25	Für die Regionalanästhesie
Naht aus Polypropylen	Ethikon	Y432H	6-0, 13 mm 1/2c Kegelspitze