Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
1. Chirurgische Extraktion des Herz-Lungen-Blocks.
- Anästhesie:
- Verwenden Sie eine Kombination aus einem Beruhigungsmittel (Xylazin) und einem Barbiturat (Pentobarbital).
Anmerkung: Es können verschiedene Anästhesiecocktails verwendet werden, ohne dass sich dies auf die Versuchsergebnisse auswirkt.
- Zuerst sedieren Sie die gesunden neuseeländischen Kaninchen mit einer einzigen intramuskulären Injektion von Xylazinhydrochlorid (3-5 mg/kg). Stellen Sie sicher, dass die Kaninchen ruhig und entspannt bleiben, um nach einigen Minuten nach der Injektion weitere Manipulationen zu ermöglichen.
- Nach der Sedierung verwenden Sie die marginalen (lateralen) Ohrvenen als Zugang, um die Kaninchen mit einer intravenösen Injektion von Pentobarbital-Natrium (28 mg/kg) zu betäuben.
- Überwachung:
- Um eine unzureichende Anästhesie oder eine übermäßige Depression der Herz- und Atemfunktionen zu vermeiden, überwachen Sie die folgenden Parameter. Um die Tiefe der Anästhesie zu beurteilen, führen Sie einen Zehenkneiftest durch.
- Achten Sie darauf, dass die Schleimhaut rosa ist. Blaue oder graue Farbtöne deuten auf Hypoxie hin.
- Stellen Sie sicher, dass die Herzfrequenz zwischen 120-135 Schlägen/min liegt und die Körpertemperatur nicht unter 36,5 °C fällt.
- Platzierung der Tiere:
- Rasieren Sie den Oberkörper des Kaninchens und legen Sie das Tier in Rückenlage auf den Operationstisch. Platzieren Sie das Belüftungssystem in der Nähe des Tisches, hinter dem Kopf des Kaninchens, um ein schnelles Anschließen der Kanüle nach der Tracheotomie zu ermöglichen und Schäden am Darm zu vermeiden.
- Inzision und Tracheotomie:
- Präparieren Sie die Haut mit einem ventralen Schnitt von 3-5 cm vom Zwerchfell bis zum Hals.
- Schneiden Sie mit der Operationsschere die vorderen 2/3 der Luftröhre zwischen zwei Knorpelringen durch, um die Trachealkanüle durch die Trachealfasermembran einzuführen.
- Setzen Sie ein 5 mm (Außendurchmesser; OD) die Trachealkanüle durch die Trachealfasermembran und verwenden Sie eine 4-0 Seidennaht, um sie vorsichtig zu fixieren.
- Legen Sie entweder eine Pinzette oder eine Pinzette unter die Luftröhre, um sicherzustellen, dass sich die Kanüle nicht gegen die Luftröhre biegt.
