Erzeugung ventrikulärer Schweineschnitte: Eine Vibratom-basierte Technik zur Herstellung ultradünner Scheiben von Schweineherzgewebe

Zusammenfassung

Quelle: Ou, Q. et. al., Schneiden und Kultivieren von Schweineherzen unter physiologischen Bedingungen. J. Vis. Exp. (2020)

Dieses Video demonstriert ein auf Vibratomen basierendes Verfahren zur Erzeugung lebensfähiger, ultradünner Schnitte von Schweineherzen. Die präparierten Gewebeschnitte können kultiviert und als Modellsysteme für pharmakologische Tests verwendet werden.

Protokoll

Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.

1. Schneiden von Schweineherzgewebe

1. Richten Sie das Gewebebad auf dem Vibratom ein, fügen Sie Eis zum Kühlmantel des Gewebebades hinzu und geben Sie dann die Lösung von Tyrode in das Gewebebad. Stellen Sie ein 1-Liter-Plastikglas auf, um die Entsorgung von geschmolzenem Eis aus dem Kühlmantel des Gewebebads aufzufangen. Mischen Sie für 1 l der Tyrode-Lösung in Scheiben 3 g/l 2,3-Butandion-Monoxim (BDM), 140 mM NaCl (8,18 g), 6 mM KCl (0,447 g), 10 mM D-Glucose (1,86 g), 10....

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Agarose	Bioline USA	BIO-41025
2,3-Butandion-Monoxim (BDM)	Fischer	AC150375000
Calciumchlorid (CaCl2)	Fischer	Nr. C79-500
Keramische Klingen für vibrierende Mikrotome	Campden Instrumente	7550-1-C
D-Glukose	Fischer	Nr. D16-1
Einweg-Skalpell #20	Biologyproducts.com	DS20X
Falcon Cell Siebe, steril, Corning	VWR	Tel.: 21008-952
Heparin-Natriumsalz	Sigma-Aldrich	H3149-50KU
HEPES	Fischer	Nr. BP310-1
Histoacryl BLUE Gewebekleber	Amazonas		https://www.amazon.com/HISTOACRYL-FLEXIBLE-1051260P-Aesculap-Adhesive/dp/B074WB5185/
Iris Federschere	Fischer	NC9019530
Iris Gerade Schere	Fischer	Artikel-Nr.: 731210
Magnesiumchlorid (MgCl2)	Fischer	M33-500
Sauerstoff-Regler	Praxair
Sauerstoff-Tanks	Praxair
Pasteur-Pipetten aus Kunststoff	Fischer	Tel.: 13-711-48
Kaliumchlorid (KCl)	Fischer	AC193780010
Rasiermesser rechteckige Klingen	Fischer	Tel.: 12-640
Einziehbare Skalpelle	Fischer	Tel.: 22-079-716
Natriumbicarbonat (NaHCO3)	Fischer	AC217125000
Natriumchlorid (NaCl)	Fischer	AC327300010
Vibrierendes Mikrotom	Campden Instrumente	7000 SMZ-2