Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
Die Studie wurde an sechs drei Monate alten männlichen und weiblichen Schweinen (Deutsche Landrasse) mit einem Gewicht von ca. 40 kg durchgeführt. Die Tiere wurden mindestens 7 Tage vor den Versuchen in die Tierpflegeeinrichtungen gebracht und gemäß den Tierschutzempfehlungen untergebracht. Die Tiere erhielten Futter und Wasser ad libitum, und ihr Gesundheitszustand wurde regelmäßig vom zuständigen Tierarzt beurteilt. Vor den Experimenten wurde eine Fastenzeit von 12 h eingehalten. Der gesamte Versuchsablauf und Umgang mit den Tieren wurde vom verantwortlichen Tierarzt überwacht.
1. Anästhesieeinleitung und Aufrechterhaltung der Anästhesie
- Für die Anästhesieeinleitung und Aufrechterhaltung der Anästhesie ist die Prämedikation der Tiere zu verabreichen und sie mit einer intramuskulären Injektion tief zu sedieren, gefolgt von intravenösen Injektionen, falls erforderlich, um eine endotracheale Intubation durchzuführen. Danach wird die Anästhesie eingeleitet und aufrechterhalten, indem eine Kombination aus einem flüchtigen Anästhesiemittel mit einer kontinuierlichen Opioidapplikation verwendet wird, die durch eine zusätzliche Opioidbolusinjektion ergänzt wird.
- Führen Sie intramuskuläre Injektionen von Ketamin 20 mg-kg-1, Azaperon 4 mg-kg-1 und Midazolam 0,1 mg-kg-1 zur Prämedikation und Sedierung durch.
2. Platzierung der Sonde
- Bringen Sie das Tier in die richtige Seitenlage und beugen Sie den Rücken des Tieres, um den Raum zwischen den Wirbeln zu erweitern.
- Für die perkutane Platzierung der Liquordrainage zur Messung und Kontrolle des Liquordrucks ist das Niveau von L 4/5 oder L 5/6 zu bestimmen, die Haut und den subkutanen Raum mit der Einführnadel zu punktieren und die Inlaynadel zu entfernen.
- Legen Sie eine mit Kochsalzlösung gefüllte Spritze auf die Nadel und führen Sie die Nadel vorsichtig mit konstantem Druck auf die flüssigkeitsgefüllte Spritze ein.
- Sobald ein Widerstandsverlust als Beweis für die epidurale Position empfunden wird, führen Sie die Inlay-Nadel wieder ein und führen Sie die Nadel 2-3 mm weiter ein, um die Dura mater zu punktieren und die Inlay-Nadel zu entfernen.
- Überprüfen Sie die intrathekale Position durch schnelles Abtropfen von klarer Flüssigkeit. Führen Sie die Drainage bis zu einer Tiefe von 20 cm ein, bringen Sie den Luer-Lock-Adapter an und überprüfen Sie die Position durch vorsichtiges Ansaugen der Flüssigkeit.
- Fixieren Sie die Drainage vorsichtig mit Nähten und verbinden Sie sie mit dem Liquordrainagesystem.
