Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
1. Entfernung der Nickhaut
HINWEIS: Der Einfachheit halber wird die Technik für das rechte Auge unten beschrieben. Führen Sie diesen Vorgang auf dem linken Auge auf die gleiche Weise durch. Entfernen Sie die Nickhaut beidseitig während der Eingewöhnungsphase (in der Regel in der ersten Woche).
- Legen Sie das Kaninchen in einen Rückhaltebeutel in geeigneter Größe.
- Verabreichen Sie eine subkutane Injektion von Acepromazin (1 mg/kg) über die Schultern mit einer 1-cm³-Spritze und einer 26-g-Nadel, um das Kaninchen zu sedieren. Der Endpunkt für diese milde Sedierung ist, wenn das Tier eine entspannte Kopfhaltung ohne normale Scanbewegungen einnimmt und seine Ohren nicht mehr vollständig aufrecht stehen.
- Tragen Sie mit einer Mikropipette 25 μl konservierungsmittelfreies Lidocain (1%) auf das Auge auf. Führen Sie ein Drahtlidspekulum zwischen die Augenlider ein.
- Fassen Sie die Nickhaut an ihrer Spitze mit einer 0,3-Pinzette (oder einer gleichwertigen Zange) und ziehen Sie sie über die Hornhautoberfläche. Injizieren Sie 1% Lidocain mit 1:100.000 Adrenalin mit einer 26-G-Nadel in den subkonjunktivalen Raum der Nickhaut. Injizieren Sie etwa 0,3 ml, um eine bescheidene Blase über der Nickhaut zu bilden. Injektionsvolumina über 1 ml liegen für Kaninchen (2-4 mg/kg) gut in einem sicheren Dosisbereich.
- Entferne das Drahtspekulum. Warten Sie ca. 5 Minuten, bis Lidocain und Adrenalin wirken. Führen Sie während dieser Zeit die gleiche Prozedur am anderen Auge durch.
- Setze das Spekulum des Drahtdeckels wieder auf. Fassen und verlängern Sie die Nickhaut mit einer Pinzette von 0,3 über die Hornhautoberfläche. Schneiden Sie die Membran an der Basis mit einer Tenotomieschere oder einem gleichwertigen Gerät ab.
Anmerkung: Die Blutung ist in der Regel minimal, aber halten Sie eine Hochtemperatur-Batterie-Kautereinheit in der Nähe und verwenden Sie sie nach Bedarf, um Blutungen zu minimieren. Direkter Druck auf die Schnittbasis der Nickhaut kann auch verwendet werden, um kleine Blutungen zu stoppen, wenn sie auftreten.
- Entferne das Spekulum des Drahtdeckels. Tragen Sie eine topische antibiotische Salbe (Neomycin, Polymyxin, Bacitracin und Hydrocortison) auf die Hornhautoberfläche auf.
- Führen Sie ein identisches Verfahren für das andere Auge durch, wie im Protokoll angegeben.
- Die Tiere werden wieder in Einzelkäfige gesetzt und mindestens eine Woche lang abheilen gelassen oder bis die Bindehautoberfläche aus klinischer Sicht vollständig verheilt ist, bevor weitere Untersuchungen oder Eingriffe durchgeführt werden.
Anmerkung: Eine vollständige klinische Heilung wird durch das Fehlen von Schwellungen, Injektionen oder Ausfluss aus den Bindehautoberflächen angezeigt. Die Tiere sollten die Augen normal offen halten, ohne dass eine schützende Ptosis vorhanden ist.