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Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
1. Ankunft und Eingewöhnung der Tiere
- 1-2 Tage alte Ferkel nach der Ankunft mindestens 24 h unter Quarantäne stellen.
- Halten Sie Ferkel in sauberen und desinfizierten Edelstahlkäfigen (36 Zoll x 48 Zoll x 36 Zoll) auf Espenspäne-Einstreu und füttern Sie sie ad libitum mit Schweinemilchaustauscher.
- Halten Sie die Raumtemperatur bei 85 °F, um eine thermoneutrale Umgebung zu gewährleisten.
2. Tag des Experiments
- Entfernen Sie das Futter 2 h vor dem Versuch.
- Injizieren Sie Ferkeln eine intramuskuläre Injektion von Ketamin (10–40 mg/kg)/Xylazin (1,5–3,0 mg/kg IM) und transportieren Sie sie über einen Transportkäfig in den Operationssaal.
3. Einleitung und Aufrechterhaltung der Anästhesie
- Verabreichen Sie ein 4%iges Isofluran-Inhalationsanästhetikum, das mit Sauerstoff über den Nasenkonus vermischt ist, und bestätigen Sie, dass das Tier tief anästhesiert ist, indem Sie das Fehlen von Lid- und Entzugsreflexen beurteilen.
- Intubieren Sie das Tier, indem Sie es in Rückenlage bringen und verwenden Sie ein Laryngoskop (gerade Klinge), um den Intubationsschlauch (Durchmesser 2,5-2 mm) in die Luftröhre zu führen.
- Legen Sie das Tier an das Beatmungsgerät, sobald der Intubationsschlauch gesichert ist.
- Stellen Sie sicher, dass die Ferkel eine Mischung aus Isofluran (0,25 % bis 3 % Erhaltung), Sauerstoff und Distickstoffmonoxid erhalten.
- Geben Sie eine Dosis Fentanyl (10 μg/kg) und verabreichen Sie weiterhin alle 1–2 Stunden eine Dosis, um eine weiterhin angemessene Tiefe der Analgesie und Sedierung zu gewährleisten und Bewegungsartefakte zu vermeiden, die eine Verschiebung des Endotrachealtubus riskieren könnten.
- Stellen Sie einen intravenösen (IV) Zugang in der subkutanen Bauchvene oder einer anderen peripheren Vene her.
- Stellen Sie die arterielle Linie durch die Oberschenkelarterie her. Dies kann nicht-invasiv oder durch einen Cut-Down erfolgen.
4. Chirurgie des Plexus brachialis
- Legen Sie das Tier nach ordnungsgemäßer Anästhesie, wie in Abschnitt 3 beschrieben, in Rückenlage auf den Operationstisch, wobei die obere Extremität abduziert wird, wobei die Achselregion freigelegt wird.
- Verwenden Sie ein chirurgisches Tuch, um das Tier abzudecken. Verwenden Sie saubere, aber nicht sterile Techniken.
- Legen Sie den Plexus-Komplex brachialis auf beiden Seiten der Wirbelsäule frei, indem Sie einen Mittellinienschnitt (mit einer #10-Klinge) über die Haut und die Faszie über der Luftröhre bis zum oberen Drittel des Brustbeins vornehmen, was der Höhe der Wirbelsäule zwischen C3 und T3 entspricht.
- Extrapolieren Sie den Schnitt mit der Pinzette und dem Hämostat horizontal auf jeder Seite von der suprasternalen Kerbe entlang des Schlüsselbeinrandes bis zum Oberarm, wobei die Kopf- und Basilikaven geschont werden.
- Lösen Sie die oberen und unteren Lappen durch stumpfe Dissektion mit Schere und Pinzette, um den Zugang zum zervikalen bzw. thorakalen Bereich des Plexus brachialis zu ermöglichen.
- Identifizieren Sie die Achse (C2) und die erste Rippe an T1. Anhand dieser Orientierungspunkte identifizieren Sie die unteren drei Halswirbel (C6–C8) und das erste thorakale (T1) Foramen der Spinalwirbelsäule und untersuchen Sie dann den Plexus sorgfältig, um Bifurkationen der Teilungen (M-Form) zu lokalisieren, um eine Freilegung zu erreichen.
- Bezeichnen Sie (unter Verwendung von Nervenschleifen) die Bereiche des Plexus brachialis oberhalb dieser Bifurkationen näher an der Wirbelsäule als Wurzel/Stamm und bezeichnen Sie die Regionen unterhalb dieser Bifurkationen als Sehnen, gefolgt vom Nerv, die näher am Arm liegen.