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Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
1. Tracheale Intubation (Abbildung 1B)
- Bereiten Sie die für die Intubation des Elektromyographie-Schlauchs (EMG) erforderlichen Geräte und Materialien vor: einen EMG-Endotrachealtubus der Größe #6, eine Gesichtsmaske für die assistierte Beatmung, zwei Schlingen, um den Mund offen zu halten, einen Mullstreifen zum Ziehen an der Zunge, einen Saugkatheter mit stumpfer Spitze, ein veterinärmedizinisches Laryngoskop mit 20 cm geraden Klingen, eine elastische Bougie, eine 20-ml-Spritze, ein Stethoskop und Klebeband.
- Positionieren Sie das anästhesierte Ferkel in Bauchlage auf dem Operationstisch. Richten Sie Kopf und Körper aus, um eine klare Visualisierung der oberen Atemwege zu gewährleisten.
- Weisen Sie den Assistenten an, die Traktion des Ober- und Unterkiefers auszuüben, um eine ausreichende Mundöffnung zu erhalten und eine Drehung oder Überstreckung des Kopfes zu vermeiden. Bedecken Sie die Zunge mit Gaze und ziehen Sie die Zunge heraus, um das Gesichtsfeld zu optimieren.
- Halten Sie das Laryngoskop fest und platzieren Sie es direkt in der Mundhöhle, um die Zunge zu drücken.
- Visualisieren Sie die Epiglottis direkt und drücken Sie die Epiglottis mit dem Laryngoskop nach unten in Richtung Zungenansatz.
- Wenn die Stimmbänder eindeutig identifiziert sind, schieben Sie die elastische Bougie sanft in die Luftröhre vor. Eine leichte Drehung der elastischen Bougie kann erforderlich sein, um den Widerstand zu überwinden. Als nächstes schieben Sie den EMG-Schlauch im Mundwinkel bis zu einer Tiefe von 24 cm vor.
- Pumpen Sie die EMG-Schlauchmanschette auf ein Volumen von nicht mehr als 3 ml auf. Wenn die Belüftung durch manuelles Absacken keine offensichtliche Luftleckage ergibt, ist eine In-situ-Entleerung des EMG-Schlauchs möglich.
- Wenn der EMG-Schlauch in der richtigen Tiefe platziert ist, bestätigen Sie den freien Durchgang des Frischgases durch manuelles Absacken. Bestätigen Sie ferner die korrekte tracheale Intubation durch endtidale Kohlendioxid (etCO2)-Überwachung (Kapnographie) und Thoraxauskultation zur frühzeitigen Identifizierung einer versehentlichen Intubation der Speiseröhre oder endobronchialen Intubation.
Anmerkung: Die Kapnographie zeigte sowohl die etCO2-Wellenform als auch den digitalen Wert in mmHg. Bei einer Intubation der Speiseröhre fehlte etCO2 oder lag nach 6 Atemzügen nahe Null. Wenn sich die EMG-Röhre an der richtigen Stelle befand, wurde die typische etCO2-Wellenform und der adäquate Wert (normalerweise >30 mmHg) notiert. Darüber hinaus ist das Atemgeräusch einer beidseitig gefüllten Lunge klar und symmetrisch, wie es durch die Auskultation des Brustkorbs bestimmt wird.
- Verwenden Sie medizinisches Klebeband, um den EMG-Schlauch am Mundwinkel zu fixieren. Da der Schlauch in der Regel bei intraoperativen neuronalen Überwachungsexperimenten (IONM) angepasst werden muss, befestigen Sie den Schlauch nicht an der Schnauze.
- Schließen Sie den EMG-Schlauch an das Beatmungsgerät an. Eine kontinuierliche Kapnographie ist obligatorisch, um den etCO2 -Wert und die Kurve während des gesamten Experiments zu überwachen.
2. Aufrechterhaltung der Anästhesie (Abbildung 1C)
- Nachdem der EMG-Schlauch fixiert ist, positionieren Sie das Ferkel mit ausgestrecktem Hals auf dem Rücken (Abbildung 1C). Halten Sie die Vollnarkose mit 1-3% Sevofluran in Sauerstoff bei 2 l/min aufrecht.
- Beatmen Sie die Lunge im Volumenregelungsmodus bei einem Atemzugvolumen von 8-12 ml/kg und stellen Sie die Atemfrequenz auf 12-14 Atemzüge/min ein.
- Beginnen Sie mit der physiologischen Überwachung, einschließlich Kapnographie, Elektrokardiographie (EKG) und Überwachung der Oxygenierung (SaO2).