Nilrot-Färbung: Eine Technik zum Nachweis und zur Quantifizierung intrazellulärer neutraler Lipide in Algen

Zusammenfassung

Quelle: Storms, Z. J. et al. Ein einfaches und schnelles Protokoll zur Messung neutraler Lipide in Algenzellen mittels Fluoreszenz. J. Vis. Exp. (2014)

Dieses Video zeigt ein Protokoll zum Nachweis und zur Quantifizierung neutraler Lipide in Algenzellen durch Färben mit Nilrot-Farbstoff.

Protokoll

>1. Fluorometrische Quantifizierung von neutralen Lipiden mit Nilrot

HINWEIS: Für die Fluoreszenzmessung werden nur 10 μl einer Algensuspension bei 5 g/l benötigt. Im Allgemeinen ist die Isolierung von Trockenalgenbiomasse aus 1,5 ml Kulturbrühe mehr als ausreichend. Außerdem kann sich die Lichtintensität der Lampe im Spektralphotometer mit der Zeit verschlechtern. Es wird empfohlen, in jedes Experiment Standards aufzunehmen, um sicherzustellen, dass Variationen im Gerät keine unnötigen Fehler bei den Messungen verursachen.

1. Bereiten Sie eine Nilrotlösung in einer Konzentration von 10 μg/ml vor, ....

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
25 ml Einwegpipetten	Fischer	13-676-10K
Pipetten-Glühbirne	Fischer	Tel.: 13-681-51
1,5 ml Mikrozentrifugenröhrchen	Fischer	Tel.: 05-408-129
40 ml Zentrifugationsröhrchen (FEP)	Fischer	Tel.: 05-562-16A	Kann auch Glasröhren verwenden
Pasteur-Glaspipetten	Fischer	13-678-20C
Nilrot	Sigma	Nr. N3013-100MG
Ethanol (Alkoholreagenzqualität)	Fischer	AC65109-0020
Leica DMRXA2 (oder gleichwertig) Mikroskop	Leica	DMRXA2
Fluoreszenz-Multiwell-Platten-Reader	Thermo Lab Systeme	Fluoroskan Ascen
Software für Fluoreszenz-Reader	Thermo Lab Systeme	Ascent Software 2.6
COSTAR 96 Well-Platte mit rundem Boden	Fischer	Tel.: 06-443-2