H&E-Färbung von paraffineingebetteten Gewebeschnitten: Eine differentielle Färbetechnik zur Visualisierung von Lebergewebeschnitten unter Verwendung einer Kombination von Hämatoxylin- und Eosin-Farbstoffen

Zusammenfassung

Quelle: Ellis, J. L et al., Histologische Analysen der akuten alkoholischen Leberschädigung beim Zebrafisch. J. Vis. Exp. (2017).

In diesem Video beschreiben wir eine Technik zur Hämatoxylin- und Eosin-Färbung von Paraffin-eingebetteten Gewebeschnitten, um deren Histologie zu untersuchen. Das Verfahren umfasst die Entparaffinisierung des Gewebes, gefolgt von der Färbung der Zellen im Gewebe. Bei der Färbung erscheint der Zellkern deutlich blau, und die Proteine im Zytoplasma zeigen eine rosa Färbung.

Protokoll

>1. Herstellung von Färbelösungen

1. Harris Hämatoxylin-Stammlösung filtrieren, um alle festgefallenen Feststoffe zu entfernen.
2. Falten Sie einen Kaffeefilter in der Mitte, so dass der Filter einen Kegel bildet. Öffnen Sie die Seitenwand, so dass die Flüssigkeit durch den Filter läuft und Schmutz aufgefangen werden kann.
3. Setzen Sie den Filter in einen Trichter und den Trichter in eine Glasmedienflasche ein. Gießen Sie nach und nach das vorrätige Hämatoxylin durch den Filter.
   Vorsicht: Hämatoxylin ist gefährlich bei Augenkontakt, Verschlucken und Einatmen. Tragen Sie immer einen Laborkittel und Handsch....

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
95% Ethanol (EtOH)	Decon Labs, Inc.	Nr. 2801	brennbar
Aufgeladene Folien	Fisher Scientific	Artikel-Nr.: 12-550-16
Präpariermikroskop	Leica Biosystems	Leica Mz 95
Eosin-Phloxin-Färbe-Set	Angebot für Neueinsteiger	1082A
Äthylalkohol	Sigma-Aldrich	Nr. E7023	brennbar
Harris Hämatoxylin	Poly Scientific R&D Corp.	Nr. S212	aufreizend
Salzsäure (HCl)	Fisher Scientific	Nr. A144	aufreizend
Isopropanol	Angebot für Neueinsteiger	12094E	brennbar
Xylole	Fisher Scientific	X3S-4	aufreizend