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Alle Verfahren, an denen Tiermodelle beteiligt sind, wurden vom lokalen institutionellen Tierpflegeausschuss und dem Tierprüfungsausschuss von JoVE überprüft.
>1. Färbung von Toluidinblau
- Bereiten Sie eine 1%ige Lösung von Toluidinblau vor, indem Sie 2 g Natriumborat in 100 ml entionisiertem Wasser auflösen, dann 1 g Toluidinblau hinzufügen und rühren, bis es sich aufgelöst hat. Die Lösung mit Filterpapier (Porengröße: 11 μm) filtrieren und in einer undurchsichtigen Flasche bis zu zwei Wochen bei Raumtemperatur aufbewahren.
- Mit einer Plastikpipette oder Mikropipette einen Tropfen Toluidinblau-Lösung auf die Nervenabschnitte geben und 20-30 s einwirken lassen.
- Spülen Sie alle überschüssigen Toluidinblau-Lösungen ab, indem Sie die Objektträger vorsichtig in ein deionisiertes Wassergefäß tauchen und 3-4 Mal wiederholen, bis die Abschnitte klar sind. Trocknen Sie die Objektträger mindestens 15 min bei 60 °C oder über Nacht bei Raumtemperatur und decken Sie die Abschnitte anschließend mit einem Deckglas mit handelsüblichem Eindeckmedium ab. Untersuchen Sie die gerahmten Objektträger sofort oder lagern Sie sie bei Raumtemperatur.
- Unter einem Lichtmikroskop untersuchen. Für detaillierte Bilder, die zur Berechnung der g-Verhältnisse verwendet werden, wird eine 100-fache Ölimmersionslinse empfohlen.