Dermatitis herpetiformis (DH) ist eine chronische entzündliche Erkrankung durch eine Autoimmunreaktion zwischen IgA und epidermalen Transglutaminase (ETG) gekennzeichnet. DH entwickelt sich in einem sehr kleinen Teil der gluten-sensitive und / oder Zöliakie-Patienten. Die Ergebnisse dieser Studie zeigen, dass DH kann auch in einem Rhesusaffen-Host mit Symptomen der idiopatic Dermatitis zu entwickeln.
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Methodenartikel
Die Anerkennung der Epidermal Transglutaminase von IgA und Tissue Transglutaminase 2 Antikörper in einem seltenen Fall von Rhesus Dermatitis
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Tissue Transglutaminase 2 (tTG2) ist ein Verdauungsenzym im Darm, die bereits teilweise verdaute Nahrung Gluten zB Gliadinpeptide deamidates. In genetisch vorbelasteten Personen, löst tTG2 autoimmune Reaktionen, die durch die Produktion von tTG2 Antikörpern und deren direkte Ablagerung in kleine Darmwand 1,2 gekennzeichnet sind. Das Vorhandensein solcher Antikörper ist eine der wichtigsten Kennzeichen der Zöliakie (CD). Epidermal Transglutaminase (ETG) ist ein weiteres Mitglied der Transglutaminase-Familie, die auch als Autoantigen in einer kleinen Minderheit von Patienten CD funktionieren kann. In dieser relativ seltenen Fällen löst ETG eine Autoimmunreaktion (Hautausschlag) klinisch als Dermatitis herpetiformis (DH) bekannt. Obwohl der genaue Mechanismus der CD und DH Pathogenese ist nicht gut verstanden, es ist bekannt, dass tTG2 und ETG Aktien antigene Epitope, die durch Serum-Antikörper von CD-und DH-Patienten 3,4 erkannt werden können.
(Macaca mulatta) mit Dermatitis (Tabelle 1, Abb.. 1 und 2) wurde verwendet, um die betroffenen Gewebe zu studieren. In einem Tier (EM96) eine spektrale Überlappung von IgA und tTG2 Antikörper (Abb. 3) wurde demonstriert. Die Anwesenheit von Doppel-positive tTG2 + IgA + Zellen wurde in den tiefen Epidermis, um die dermalen Papillen konzentriert. Dies steht im Einklang mit Läsionen in DH-Patienten 3 beschrieben. Wenn EM96 auf eine glutenfreie Diät, die Dermatitis, sowie gelegt wurde tTG2 + IgA + Ablagerungen verschwunden und wurden nicht mehr nachweisbar (Abb. 1-3). Dermatitis jedoch auf Wiedereinführung der Nahrung Gluten in EM96 (nicht dargestellt) wieder auf. In anderen Makaken einschließlich Tier mit nicht verwandten Dermatitis wurden die tTG2 + IgA + Ablagerungen nicht erkannt. Gluten-freie Diät-abhängige Vergebung der Dermatitis in EM96 zusammen mit Anwesenheit von tTG2 + IgA + Zellen in der Haut deuten auf eine Autoimmunerkrankung, DH-likeMechanismus für die Entwicklung dieses Zustandes. Dies ist der erste Bericht von DH-ähnliche Dermatitis in jeder nicht-menschlichen Primaten.
Protokoll
1. Hautbiopsie Probenentnahme
- Vor Hautbiopsie Verfahren, betäuben Tieren intramuskulär mit 2,5 mg / kg Tiletamin angewendet Hydrochlorid und Zolazepam Hydrochlorid telazol Mischung (Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, IA). Überwachen Sie die Tiere aus der Anästhesie bis zum Liegen und entfernen Sie dann aus ihrem Gehege.
- Entfernen Sie die Haare aus der Haut Gebiet von Interesse unter Verwendung eines Oster Golden A5 Single Speed Veterinary Clipper mit einer Größe 40 Klinge (Oster Professional Products, McMinnville, TN) und aseptisch mit wechselnden betadine Peeling und Alkohol vorzubereiten. Sichern Sie sich eine sterile gefenstert Tuch über ....
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Diskussion
Unsere neu gegründete nicht-menschlichen Primaten Modell der Glutenunverträglichkeit eingesetzt wurde, um die intestinale Permeabilität Veränderungen durch diätetische glutenfreie 5,6 ausgelöst zu studieren. Plasma tTG2 Antikörper sowie Darm tTG2 + IgA + Einlagen wurden in einigen gluten-sensitive Makaken entdeckt. Da wir selten Fälle von idiopathischer Dermatitis vor kurzem in Kolonie identifiziert Rhesusaffen, bei denen keine übliche (infektiöse / Stoffwechsel) Ätiologie festgestellt werden konnte, war Ziel.......
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Offenlegungen
Keine Interessenskonflikte erklärt.
Danksagungen
Die Autoren bedanken sich bei Amanda Tardo, Dr. Mostafa Bouljihad, Stephanie Feely, Carol Coyne, Dr. Erin Ribka, Dr. Pete Didier und Dorothy Kuebler für ihre technische Unterstützung bedanken. Diese Arbeit wurde vom NIH gewährt R01-DK076653 und 3R01-DK076653-02S1 zu KS und die Basis Betriebskostenzuschuss der TNPRC RR000164 unterstützt.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Name des Reagenzes oder Ausrüstung | Firma | Katalog-Nummer / Product Code | Note |
| Anti-Human IgA-FITC * | Sigma, St. Louis, MO | F-5259 | 1:100 Gebrauchsverdünnung |
| Anti-Human tTG2 | Thermo Scientific, Kalamazoo, MI | MS-300-P1ABX | 1:100 Gebrauchsverdünnung |
| Anti-Mouse IgG1 ** | Invitrogen, Carlsbad, CA | A-21124 | 1:1000 Gebrauchsverdünnung |
| TOPRO-3-DNA-Sonde *** | Invitrogen, Carlsbad, CA | T-3605 | 1:1000 Gebrauchsverdünnung |
| Zink Formalin (Z-fix) | Anatech Ltd, Battle Creek, MI | 171 | |
| Oktober Freezing Medium | Sakura Finetek, Torrence, CA | 4583 | |
| Cytoseal Montage Medium | Richard-Allan Scientific, Kalamazoo, MI | 8312-4 | |
| Anti-Quenching Lösung | Sigma, St. Louis, MO | P 3130 | |
| Ethilon (Nylonfaden) | Ethicon, Johnson & Johnson, Berkshire, UK | 663G | |
| Miltex Punsch Dermal Biopsieinstruments | Miltex, York, PA | NA | |
| Oster Golden A5 Single Speed Vet Clipper mit einer Größe 40 Blatt | Oster Produkte, McMinnville, TN | 78005-050 | |
| Leica Tissue Processor | Leica Microsystems Inc., Buffalo Grove, KS | ASP300 | |
| Rotationsmikrotom | Microm International, Waldorf, Deutschland | HM325 | |
| Kryostat | Thermo Scientific, Kalamazoo, MI | HM560 | |
| Konfokalmikroskop | Leica, Wetzlar, Deutschland | TCS SP2 |
* Fluoresceinisothiocyanat
** Secondary (Alexa Fluor 568-konjugiert) Antikörper nach tTG2 Primärantikörper verwendet
** Dye
Referenzen
- Diosdado, B., Wijmenga, C. Molecular mechanisms of the adaptive, innate and regulatory immune responses in the intestinal mucosa of celiac disease patients. Expert. Rev. Mol. Diagn. 5 (5), 681-700 (2005).
- Schuppan, D., Dennis, M. D., Kelly, C. P.
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Nachdrucke und Genehmigungen
