Methodenartikel

Intraoperative Detektion von Subtle Endometriosis: A Novel Paradigm for Detection und Behandlung von Pelvic Pain mit dem Loss of Peritoneal Integrity-Zustellbare

DOI:

10.3791/4313

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21. Dezember 2012

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1Department of Obstetrics and Gynecology, Division of Reproductive Endocrinology and Infertility, Greenville Hospital System, 2Department of Pathology, Duke University Health System, 3Department of Obstetrics and Gynecology, Division of Reproductive Endocrinology and Infertility, Duke University

In diesem Artikel

Zusammenfassung

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Verlust von peritonealen Integrität bietet ein neues Paradigma zu verstehen und zu behandeln chronischen Beckenschmerzen bei Frauen mit leichten Formen von Endometriose und kann leicht nachgewiesen werden unter Verwendung intraoperative Instillation von Farbstoff zum Zeitpunkt der Laparoskopie.

Zusammenfassung

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Die Endometriose ist eine häufige Erkrankung, die 40 bis 70% des reproduktiven Alters Frauen mit chronischen Schmerzen im Beckenbereich (CPP) und / oder Unfruchtbarkeit. Der Zweck dieser Studie war es, die Verwendung eines blauen Farbstoff (Methylenblau), um peritonealen Oberflächen während Laparoskopie (L / S) färben, um den Verlust von Peritoneal Integrität bei Patienten mit Schmerzen im Beckenbereich und vermutete Endometriose erkennen demonstrieren. Vierzig Frauen mit CPP und 5 Frauen ohne Schmerzen wurden in dieser Pilotstudie evaluiert. Während L / S wurde konzentrierte Farbstoff auf peritonealen Oberflächen aufgesprüht, dann abgesaugt und spült mit Ringer-Laktat-Lösung. Bereiche von lokalisierten Farbstoffaufnahme wurden auf das Vorhandensein des sichtbaren endometriotischen Läsionen untersucht. Bereiche intensiver peritonealen Färbung wurden reseziert und einige in 2,5% gepuffertem Glutaraldehyd und mittels Abtastung (SEM) Elektronenmikroskopie. Blau Farbstoffaufnahme war häufiger bei Frauen mit Endometriose und chronische Schmerzen im Beckenbereich als die Kontrollen (85% vs 40%). Resektion des blauen stained Bereichen offenbart Endometriose durch SEM und Verlust von peritonealen Zell-Zell-Kontakt im Vergleich zu normalen, nicht-färbende Peritoneum. Betroffene Peritoneum wurde mit sichtbaren Endometrioseherde in den meisten, aber nicht alle Patienten assoziiert. Subjektive Schmerzlinderung wurde in 80% der Probanden berichtet. Basierend auf Rasterelektronenmikroskopie, folgern wir, dass Endometriumzellen sehr weit über sichtbare Implantate von Endometriose und scheinen die zugrundeliegenden mesothelium stören. Subtile Veränderungen der Endometriose könnte daher dazu führen, Schmerzen im Beckenbereich durch die Störung der peritonealen Integrität, so dass Menstruations-oder ovulatory Blut und damit verbundenen Schmerzen Faktoren Zugriff auf zugrunde liegende sensorischen Nerven. Eine komplette Resektion der betroffenen Bauchfell kann eine bessere Langzeit-Behandlung der Endometriose und CPP. Diese einfache Technik scheint Erkennung von subtilen oder nahezu unsichtbare Endometriose bei Frauen mit CPP und minimale visuelle Erkenntnisse bei L / S zu verbessern und dazu dienen kann, die diagnostische Genauigkeit der Endometriose erhöhenbei der Laparoskopie.

Protokoll

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Ein. Patient Selection

  1. Women mit chronischen Schmerzen im Beckenbereich zu unterziehen eine Geschichte und körperliche Untersuchung.
  2. Localization von Schmerzen,-Timing mit Bezug auf die Menstruationszyklus, assoziiert Symptome einschließlich irritable bowel Beschwerden oder Blase Beschwerden werden zur Kenntnis genommen und aufgezeichnet.
  3. Women unterziehen die Laparoskopie sind für mögliche Resektion von endometriosis und die Verwendung von ihren Geweben für die Forschung eingewilligt haben.

2. Laparoscopic Techniques

  1. Laparoskopie wird durchgeführt unter Verwendung von Standardtechniken durch einen 5 mm umbilical-Port und zusätzlichem 5 mm-Ports in der unteren Abdomen.
  2. Sorgfältige Inspektion des Beckenabschnitts durchgeführt wird, um alle Beanstandungen aufzeigen von Endometriose mit dem vorausgewählten-operative localisation von Schmerz korrelieren, wie angedeutet durch den Patienten.
  3. Methylene blue Farbstoff wird 1:200 mit steriler Kochsalzlösung gemischt und injiziert auf Beckenbereich Oberflächen unter Verwendung von eine Aspirationsgefahr Nadel.
  4. Saug Bewässerungs wird durchgeführt, um den Überschuß zu entfernenfärben und spülen Sie die peritonealen Oberflächen.
  5. Das Becken wird inspiziert und die Bereiche der blauen Farbstoffaufnahme werden aufgezeichnet.
  6. Wenn möglich, wird Resektion der betroffenen Gebiete des Bauchfells durchgeführt.

3. Scanning Electron Microscopy

  1. Peritoneal Abschnitte werden in ein steriles TELFA Bord vernäht, um die Probe zu glätten und zu halten Orientierung (intraperitonealen Seite nach oben) und in Glutaraldehyd Fixierungsmittel (Sigma, St. Louis, MO) für REM.
  2. Die Proben wurden orientiert und post-feste in 1% gepuffertem Osmiumtetroxid für 1 Stunde und entwässert mit sequentieller Ethanolkonzentrationen.
  3. Proben wurden getrocknet unter Verwendung von flüssigem Kohlendioxid und montiert auf Aluminium Rasterelektronenmikroskop Blindleitungen mit kolloidalem Silberpaste und Sputtern mit Gold beschichtet: Platinlegierung mit einer Dicke von 20 nM.
  4. Rasterelektronenmikroskopie wurde unter Verwendung eines JEOL Modell JSM-6400 Scanning-Mikroskopie und-Mikrophotographien von 12 zufällige Bereiche erhalten.

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Ergebnisse

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Ein Beispiel für subtile Endometriose nahezu unsichtbar war ist in 1A gezeigt. Vor dem Aufbringen der blaue Farbstoff ein unregelmäßiger Bereich punziert Peritoneum geschätzt wurde unterstützt durch Reflexion der laparoskopischen Licht. In 1B zeigt das Erscheinungsbild dieses gleiche Fläche nach dem Färben die gleiche unregelmäßige Muster über der Blase (1B). Sobald dieser Teil des Peritoneums reseziert wurde (1C) wurde nach SEM die darüberliegenden end...

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Diskussion

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Chronische Schmerzen im Beckenbereich bei Frauen ist eine teure und schlecht verstanden Problem 1. Dysmenorrhoe ist die häufigste Form von Schmerzen im Beckenbereich beeinflussen 60% der Frauen 2 und 72% der Jugendlichen 3. Die Endometriose ist eine entzündliche Erkrankung, die 5% der normalen Frauen betrifft, ist aber in bis zu 70% der Frauen mit Schmerzen im Beckenbereich. Während Endometriose trägt zu chronischen Schmerzen im Beckenbereich (CPP), ein Mechanismus, durch den Läsionen ve...

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Offenlegungen

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Keine Interessenskonflikte erklärt.

Danksagungen

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Wir würden gerne die hervorragende technische Hilfe Angela Houwing erkennen und helfen bei der Datenerfassung von Greta Bushnell.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Name des Reagenzes Firma Katalog-Nummer Kommentare (optional)
Methylenblau Amerikanischen Reagent NDC0517-0310-110 Gemischt 1:200 in Kochsalzlösung

Referenzen

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