Orthotopen Aortic Transplantation in Mäuse für das Studium der Vascular Disease

Zusammenfassung

Wir beschreiben ein Verfahren, bei dem ein Abschnitt der Bauchaorta von einer Maus transplantiert orthotopisch wird knapp unterhalb der Nierenarterien in einer allogenen oder syngenen Empfänger. Diese Technik kann in Untersuchungen, bei denen die Transplantation von grossen Arterien von einheitlicher Größe als vorteilhaft erachtet wird nützlich.

Zusammenfassung

Vaskulären Verfahren, die in der Maus Anastomosen gelten im Allgemeinen als schwierig und hängt stark von der Geschicklichkeit des einzelnen Chirurgen. Dies ist weitgehend richtig, aber es gibt eine Reihe von wichtigen Prinzipien, die die Schwierigkeit dieser Verfahren reduzieren und erhöhen Reproduzierbarkeit. Orthotopen aortischen Transplantation ist ein ausgezeichnetes Verfahren, in dem diese Prinzipien lernen, weil es nur zwei End-zu-End-Anastomosen beinhaltet, erfordert jedoch eine gute Nahttechnik und Handhabung der Gefäße für konsistente Erfolg. Dieses Verfahren beginnt mit der Beschaffung einer Länge von Bauchaorta von einem Spender Tier, durch Teilung des nativen Aorta in den Empfänger verfolgt. Die Aorta beschafft wird dann zwischen den geteilten Enden des Empfängers Aorta platziert und vernäht einrastet mit Ende-zu-Ende-Anastomosen. Um dies zu erreichen dieses Ziel erfolgreich erfordert ein hohes Maß an Konzentration, gute Werkzeuge, eine ruhige Hand und eine Aufwertung, wie leicht dieGefäßsystem eines Maus können beschädigt werden, was zu Thrombose. Das Erlernen dieser wichtigen Grundsätze ist es, was nimmt den größten Teil der Anfänger an der Zeit, wenn das Lernen Mikrochirurgie in kleine Nagetiere. In diesem Protokoll, verweisen wir auf diesen wichtigen Punkten. Dieses Modell kann verwendet werden, um vaskuläre Krankheit in einer Vielzahl von verschiedenen experimentellen Systemen ^1-8 untersuchen. Im Rahmen abgebildet, wird es häufig für die Untersuchung von post-Transplantat Gefäßerkrankung, einer langfristigen gemeinsamen Komplikation der Organtransplantation, bei dem Intimahyperplasie erfolgt im Allotransplantat verwendet. Der primäre Vorteil des Modells ist, dass es quantitative morphometrischen Analysen erleichtert und das transplantierte Gefäßes liegt angrenzend an die endogenes Gefäß, welches als zusätzliche Kontrolle ⁹ dienen kann. Die Technik hier gezeigt wird häufig für Mäuse mit einem Gewicht 18-25 Gramm verwendet. Wir haben die meisten unserer Erfahrung gesammelt mit dem C57BL/6J, BALB / cJ und C3H/HeJ Stämme.

Protokoll

Ein. Präoperative Vorbereitung

1. Chirurgische Verfahren, egal wie sorgfältig durchgeführt, führen zu erheblichen Belastungen. Um die Auswirkungen von solchen Stress zu minimieren und die Reserven zu maximieren, sollten die Tiere im Vivarium für mindestens 72 Stunden vor Gebrauch ^10,11 aufrechterhalten werden.
2. Chirurgische Instrumente, Gaze, und Tupfer müssen steril sein. Es ist nicht notwendig, sterile Handschuhe, die lediglich die Spitzen der Instrumente Touch Naht oder operativen Bereich zu verwenden.
3. Für die Blutstillung, ist es zwingend notwendig, dass Spannkräfte der minimale notwendig sind. Schäden am Schiff durch übermäß....

Ergebnisse

Abbildung 1 zeigt ein Aortentransplantat. Die weißen Pfeile bezeichnen die Nahtlinien. Ein Patent Transplantat zeigt eine sichtbare Puls. Abbildung 2 zeigt einen typischen Experiment, in dem Empfänger Überlebens für einen Zeitraum von 56 Tagen verfolgt wurde. Eine Gruppe bestand aus Wildtyp (C57BL / 6 x FVB) Empfängermäuse mit BALB / c Aorta transplantiert. Die andere Gruppe mit der Bezeichnung "ko" besteht aus Empfänger (C57BL / 6 x FVB) defizient in der Expression von Hämoxy.......

Diskussion

Mausmodellen aortischen Transplantation bieten eine Reihe von Vorteilen, da Mäuse sehr gut immunogenetically ^9,12,13 definiert, und sie können leicht manipuliert werden, um ihre Expression spezifischer Gene zu verändern, falls gewünscht. Wie in der Einleitung erwähnt, ist der Gefäßchirurgie in der Maus schwieriger als die meisten Modelle aufgrund der Größe der Gefäße. Selbst die großen Arterien, wie der Aorta sind in der Regel nicht mehr als 100-200 um Innendurchmesser, so Manipulation dieser Schiffe erforder.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Artikel	Firma	Katalog-Nr
Gefäßklemmen	Fine Science Tools	00.396-01 (Größe B-1)
Dumont Pinzetten	Fine Science Tools	11293-00
10-0 Needled microsuture	AROSurgical	TK-107.038
Gerade Schere	Roboz Surgical Instrument Co.	RS-5620
Niedrige Temperatur cauterizer	Beaver-Visitec Internationale	8441000
Selbst Beibehaltung Retraktor	World Precision Instruments	14240