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यकृत धमनी पुनर्निर्माण के साथ आंशिक orthotopic लीवर ट्रांसप्लांटेशन के एक चूहे मॉडल के लिए शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं

Published: March 7, 2013 doi: 10.3791/4376
Automatic Translation
1,2, 2, 2, 1
1Institute for Laboratory Animal Science and Experimental Surgery, RWTH-Aachen University, 2Department of Hepato-Biliary-Pancreatic Surgery and Transplantation, Graduate School of Medicine, Kyoto University

Summary

चूहों में orthotopic जिगर प्रत्यारोपण जैव चिकित्सा अनुसंधान के लिए एक अनिवार्य प्रयोगात्मक मॉडल है. यहाँ हम यकृत धमनी पुनर्निर्माण का उपयोग कर एक 50% आंशिक अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना के साथ orthotopic चूहा यकृत प्रत्यारोपण के लिए हमारे शल्यचिकित्सा की प्रक्रियाओं को प्रस्तुत करते हैं.

Abstract

एक पूरी या आंशिक रूप से अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना का उपयोग चूहों में orthotopic यकृत प्रत्यारोपण (Olt) प्रत्यारोपण के अनुसंधान के लिए एक अनिवार्य प्रयोगात्मक भ्रष्टाचार संरक्षण और ischemia-reperfusion चोट 1,2, प्रतिरक्षाविज्ञानी प्रतिक्रियाओं 3,4, 5,6 hemodynamics पर अध्ययन के रूप में, मॉडल है, और छोटे के लिए आकार 7 सिंड्रोम. चूहे OLT सबसे मुश्किल प्रयोगात्मक सर्जरी में पशु मॉडल के बीच है और उन्नत microsurgical कौशल है कि एक लंबे समय के लिए सीख लेने के की मांग. नतीजतन, इस मॉडल का उपयोग सीमित किया गया है. चूंकि और परिणामों की विश्वसनीयता reproducibility प्रयोगों में जो ऐसी जटिल पशु मॉडल का उपयोग किया जाता है के प्रमुख घटक हैं, यह सर्जन जो चूहे OLT में शामिल कर रहे हैं इस मॉडल के लिए अच्छी तरह से मानकीकृत और परिष्कृत प्रक्रियाओं में प्रशिक्षित किया जा के लिए आवश्यक है.

जबकि विभिन्न तकनीकों और चूहों में OLT की संशोधन 8 सूचित किया गया है के बाद से पहली मॉडल describ थाली एट अल द्वारा एड 1973 में 9, यकृत धमनी 10 पुनर्निर्माण और Kamada एट अल द्वारा कफ सम्मिलन तकनीक की शुरूआत के उन्मूलन 11 इस मॉडल में एक बड़ी प्रगति थे, क्योंकि वे एक महान डिग्री के पुनर्निर्माण प्रक्रियाओं सरलीकृत . Kamada एट अल. द्वारा मॉडल में, यकृत rearterialization भी समाप्त कर दिया गया था. चूंकि चूहों जिगर प्रत्यारोपण के बाद यकृत धमनी प्रवाह के बिना जीवित रह सकता है, वहाँ यकृत धमनीचक्र संयोजन की मूल्य पर काफी विवाद था. हालांकि, मॉडल की शारीरिक श्रेष्ठता की arterialized तेजी से किया गया है पित्त नली 8,12 प्रणाली और जिगर 8,13,14 अखंडता के संरक्षण के मामले में विशेष रूप से स्वीकार किया है.

इस अनुच्छेद में, हम वर्तमान OLT यकृत धमनी पुनर्निर्माण के साथ चूहे मॉडल के लिए विस्तृत शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं पूर्व vivo जिगर resec के बाद एक 50% आंशिक अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना का उपयोगtion. निम्न विधियों में से प्रत्येक पोत और पित्त नली के लिए पुनर्निर्माण की प्रक्रिया का प्रदर्शन कर रहे हैं, पोर्टल शिरा के लिए एक कफ तकनीक, सुप्रा और infrahepatic वेना कावा के लिए एक 7-0 polypropylene सतत सिवनी और यकृत धमनी के लिए एक स्टेंट तकनीक और पित्त नली.

Protocol

1. बुनियादी तकनीकों और सामान्य प्रक्रियाओं

  1. सभी प्रक्रियाओं स्वच्छ लेकिन nonsterile शर्तों के तहत किया जाता है.
  2. एक बार जब चूहे के पेट खोला है, सभी प्रक्रियाओं 16x के एक बढ़ाई में एक शल्य चिकित्सा खुर्दबीन के नीचे किया जाता है. पित्त नली और यकृत धमनी में एक स्टेंट की प्रविष्टि और यकृत धमनी के पुनर्निर्माण,: infrahepatic वेना कावा अपवाद पूर्व vivo जिगर लकीर, जो 10x में किया जाता है और निम्नलिखित प्रक्रियाओं, जो 25x पर प्रदर्शन कर रहे हैं (IHVC), और पित्त नली.
  3. कपास swabs अंगों के कोमल ऊतकों के हेरफेर, कुंद विच्छेदन, और संपीड़न hemostasis के लिए किया जाता है. धुंध (5 एक्स 5 सेमी) swabs lactated घंटी समाधान के साथ भिगो जिगर या आंतों वापस लेना है, और अंगों को नम रखने के लिए किया जाता है. निरस्त करने के लिए छोड़ दिया है या करने के लिए IHVC आसपास शल्य चिकित्सा क्षेत्र को चौड़ा करने के लिए चूहे की पूंछ की ओर धुंध से ढके आंतों की Satinsky क्लैंप इस्तेमाल किया जा सकता है.
  4. सभी ligations पूर्व vivo जिगर लकीर के दौरान, जहां 4-0 रेशम के धागे का इस्तेमाल कर रहे हैं जिगर lobes के pedicles के लिए एक 6-0 को छोड़कर रेशम के धागे के साथ प्रदर्शन कर रहे हैं. संयुक्ताक्षर एक DeBakey बुलडॉग क्लंप या अन्य उपकरणों से खींचा जा सकता है पर्याप्त तनाव प्रदान ligated बात करने के लिए इतना है कि 2 संयुक्ताक्षर पहले एक के लिए एक दूरी पर बनाया जा सकता है, और दो ligated अंक के बीच विभाजन को ठीक किया जा सकता है.
  5. सभी नसों में इंजेक्शन penile नस के माध्यम से प्रदर्शन कर रहे हैं.
  6. Suprahepatic रग कावा (SHVC), पोर्टल शिरा, यकृत धमनी, और पित्त नली, तेल आधारित मिट्टी की एक छोटी सी गांठ के लिए पुनर्निर्माण की प्रक्रिया के दौरान एक परिधीय क्लैंप या एक मच्छर संदंश की एक उंगली की अंगूठी रखने के लिए प्रयोग किया जाता है स्थिति में रखने के लिए उन्हें तय.

2. Presurgical तैयारी

  1. पुरुष लुईस 230 और 250 ग्राम के बीच वजन चूहों यकृत प्रत्यारोपण के लिए दाता और प्राप्तकर्ता के रूप में उपयोग किया जाता है. चूहों सभी कर रहे हैंसंज्ञाहरण के शामिल होने तक पानी और भोजन के लिए स्वतंत्र पहुँच बकाया.
  2. पोर्टल नस (1 चित्रा) के लिए गिरफ्तार: पोर्टल शिरा के लिए एक नंबर 11 खुर्दबीन के नीचे स्केलपेल ब्लेड के साथ एक 14-गेज कैथेटर काटने से कफ तैयार. कफ एक शरीर और एक एक्सटेंशन, 2 मिमी की लंबाई के साथ प्रत्येक के होते हैं. कदम द्वारा कफ कदम की दीवार एक मच्छर संदंश इतना है कि एक धागा कफ पर कस कर सकते हैं दूर होता जा रहा बिना fastened साथ circumferentially clamping द्वारा कफ पर घैरा grooves बनाओ.
  3. पित्त नली और यकृत धमनी (1 चित्रा) के लिए stents: कट खुर्दबीन के नीचे एक स्केलपेल कैथेटर के दोनों सिरों पर यकृत धमनी के लिए 4 मिमी की लंबाई और पित्त नली के लिए 5 मिमी के साथ bevels उत्पादन के साथ 24 गेज कैथेटर .

3. दाता ऑपरेशन

दाता चूहे से जिगर की हटाने की स्कीमा चित्रा 2 में दिखाया गया है. इस प्रक्रिया में लगभग की आवश्यकता हैimately 30-35 मिनट.

  1. 4 वॉल संज्ञाहरण के शामिल होने के लिए 4 एल / मिनट की एक प्रवाह दर पर 100% ऑक्सीजन, और रखरखाव के लिए 1.5 वॉल% 2 एल / मिनट में isoflurane% की साँस लेना के साथ चूहे anesthetize. एक एनाल्जेसिक के रूप में (0.1 मिलीग्राम / किग्रा) subcutaneously buprenorphine सुई. एक हीटिंग पैड पर चूहे प्लेस, और ऊपरी चुंबकीय Fixator त्याग प्रणाली (चित्रा 3a) का उपयोग करते हुए हथियारों को ठीक. चूहे के पूरे पेट क्षेत्र से फर दाढ़ी, और povidone आयोडीन समाधान इसी के साथ त्वचा बाँझ बनाना.
  2. द्विपक्षीय एक्सटेंशन के साथ एक midline चीरा पेट खोलें. चूहे के पीछे इतना है कि SHVC औदरीयता बुलंद है के तहत 5-मिलीलीटर सिरिंज रखें. एक मच्छर संदंश क्लैंप, और सिर की ओर जिफाएडा प्रक्रिया खींच, और subcostal retractors को लागू करने के लिए शल्य चिकित्सा के क्षेत्र (चित्रा 3a) खोलने.
  3. दात्राकार बंधन और छोड़ दिया त्रिकोणीय बंधन काटना. अगले कटी घमनी को बांधना, और बाईं मध्यच्छद नस विभाजित.
  4. RETRमंझला और बाएं पार्श्व lobes के ऊपर एक गीला धुंध झाड़ू के साथ कार्य. द्विध्रुवी संदंश का प्रयोग, जमना, और छोड़ दिया पार्श्व और पूर्वकाल पूंछवाला लोब के बीच पैरा esophageal वाहिकाओं विभाजित.
  5. चूहे के बाईं ओर पर पेट के बाहर आंतों ले जाएँ, और उन्हें एक गीला धुंध झाड़ू के साथ कवर. एक गीला धुंध झाड़ू के साथ सही पार्श्व पालि ऊपर वापस लेना. Retroperitoneal ऊतक से IHVC अलग, और सही अधिवृक्क नस कटी घमनी को बांधना, जो भ्रष्टाचार हटाने से पहले बाद में विभाजित होगा.
  6. पित्त नली (3b चित्रा) में एक स्टेंट डालने:
    1. पित्त नली कटी घमनी को बांधना gastroduodenal धमनी की शाखाओं में बंटी के स्तर पर. नरम पित्त नली आसपास के ऊतकों को जितना संभव के रूप में संरक्षित किया जाना चाहिए, और यकृत धमनी से वाहिनी पित्त की जुदाई पर्याप्त धमनियों से रक्त पित्त नली को आपूर्ति सुरक्षित करने से बचा जाना चाहिए.
    2. सीधे माइक्रो कैंची के साथ, anteri में एक छोटा सा चीराया पित्त ligated बात करने के लिए समीपस्थ वाहिनी की दीवार. जबकि बाएं हाथ में एक सीधे माइक्रो संदंश के साथ चीरा के पूर्वकाल दीवार पकड़, दाहिने हाथ में एक घुमावदार सूक्ष्म संदंश का उपयोग वाहिनी में एक स्टेंट डालने, और यह एक 6-0 रेशम के धागे के साथ सुरक्षित है. कटौती की पित्त नली पर धागे के अंत में 4 मिमी की लंबाई पर रखा जाता है कि तो धागा बाद सम्मिलन के दौरान आयोजित किया जा सकता है.
  7. जठरनिर्गम और प्लीहा नसों से ligating और उन्हें विभाजित पोर्टल शिरा लिबरेट.
  8. कटी घमनी को बांधना और gastroduodenal धमनी विभाजित है, तो अग्नाशय के सिर से इसकी जड़ आम यकृत धमनी) और चा (अलग. सही करने के लिए कपास swabs के साथ जिगर, घुमाएँ और जिगर और घुटकी के पीछे के आसपास बंधन टुकड़े करना.
  9. जिगर छांटना के लिए तैयारी के पूरा होने पर, retractors, जिफाएडा प्रक्रिया के लिए मच्छर संदंश, और चूहे की पीठ के तहत 5-मिलीलीटर सिरिंज हटा दें. Abdomina आंतों लौटेंएल गुहा.
  10. सामान्य नमक समाधान के 2 मिलीलीटर में penile नस के माध्यम से हेपरिन नाट्रियम के 500 आइयू सुई. के बारे में 3 मिनट के बाद, सिरिंज 5 मिलीग्राम, मच्छर संदंश, retractors और रीसेट. इसकी जड़ समीपस्थ चा कटी घमनी को बांधना. रखें कटौती की एक चा के लिए लंबे समय से ligated धागे के समाप्त होता है.
  11. सही गुर्दे की नस एक मच्छर संदंश साथ IHVC करीब clamping के बाद, प्लीहा नस के स्टंप के नीचे एक डिस्पोजेबल माइक्रो पोत क्लैंप के साथ पोर्टल शिरा क्लैंप. पोर्टल शिरा के पूर्वकाल दीवार काटकर अलग कर देना, और पोर्टल शिरा में एक 18 गेज कैथेटर डालने.
  12. 20 सेमी एच 2 ओ की एक हीड्रास्टाटिक दबाव में ठंड हिस्टडीन tryptophan-ketoglutarate समाधान (HTK) के 60 मिलीग्राम के साथ में सीटू जिगर छिड़कना तुरंत बाद, डायाफ्राम में कटौती और intrathoracic वेना कावा आड़ा काट, और खुले IHVC के पूर्वकाल दीवार में कटौती करने के लिए छिड़काव समाधान जिगर (चित्रा 3c) के बाहर rinsed की अनुमति.
  13. क्लैंप करें एक di साथ IHVCsposable सूक्ष्म पोत जिगर नीचे दबाना. जिगर और सही गुर्दे नस के बीच मध्य बिंदु से थोड़ा नीचे IHVC विदारक आबकारी यकृत, प्लीहा नस के स्टंप के नीचे पोर्टल शिरा, डायाफ्राम, जिगर की पीठ पर शेष स्नायुबंधन, सही अधिवृक्क नस, और इसकी जड़ में चा. कुचल बर्फ से भरा एक प्लास्टिक बॉक्स में रखा एक धातु कप में ठंड HTK समाधान में excised जिगर रखें.

4. पूर्व vivo भ्रष्टाचार तैयारी

जिगर अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना के लिए सभी प्रक्रियाओं धातु बर्फ ठंड HTK समाधान के साथ भरी कप में प्रदर्शन कर रहे हैं. पूर्व vivo भ्रष्टाचार तैयारी लगभग 30 मिनट की आवश्यकता है.

  1. पोर्टल शिरा (4 चित्रा) के लिए एक कफ की कुर्की के लिए:
    एक DeBakey बुलडॉग क्लैंप के साथ पोर्टल शिरापरक ट्रंक क्लैंप करें. कप (चित्रा 4a, ख) पर एक ब्रिजिंग स्थिति में क्लैंप प्लेस. कफ के माध्यम से पोर्टल शिरा रखो, और घोड़े का अंसबंधफिर स्थिति बजे 12 (चित्रा 4C) के कफ के विस्तार के साथ साथ पोर्टल शिरा. कफ पर पोर्टल शिरा की दीवार Evert 7 बजे की स्थिति पर कफ (चित्रा 4d) के प्लीहा नस के स्टंप के बाहर की स्थिति, और एक 6-0 रेशम धागा (चित्रा 4e) के साथ पोर्टल शिरा सुरक्षित .
  2. यकृत धमनी (5 चित्रा) में एक स्टेंट डालने:
    संदंश द्वारा डायाफ्राम के दोनों किनारों clamping जिगर फिक्स, और DeBakey बुलडॉग क्लैंप (चित्रा 5a) के साथ ligated धागा धारण करके सीधे चा खींच. सीधे माइक्रो कैंची के साथ, चा के पूर्वकाल दीवार में एक छोटा सा चीरा बनाने. बाएं हाथ के साथ, एक सीधे माइक्रो संदंश के साथ चीरा के पूर्वकाल दीवार पकड़ है, और दाहिने हाथ के साथ, एक घुमावदार सूक्ष्म संदंश का उपयोग चा में एक स्टेंट डालने. स्टेंट पहले हेपरिन नाट्रियम समाधान (100 IU / मिलीलीटर) (चित्रा 5 ब - घ) से धोया जाता है. एसecure एक 6-0 रेशम के धागे के साथ स्टेंट और कटौती की एक रखने के धागे के 4 मिमी की लंबाई पर समाप्त होता है. ठंड HTK समाधान के 5 मिलीलीटर साथ धमनी कैथेटर के माध्यम से जिगर फ्लश.
  3. 50% जिगर लकीर (6 चित्रा) के लिए:
    1. एक मच्छर संदंश के साथ यह जगह में ठीक पीछे पूंछवाला लोब क्लैंप करें. बांटना पालि अपने एक 4-0 रेशम धागा (चित्रा 7a) के साथ डंडी के ligation के बाद. इसी तरह, पूर्वकाल पूंछवाला पालि हटा दें.
    2. प्लास्टिक बॉक्स 90 डिग्री घुमाएँ. डायाफ्राम और मंझला पालि के बाएं हिस्से के ठीक किनारे क्लैंप करें. मंझला पालि के द्विपक्षीय भाग की सीमा के ऊपरी छोर पर एक छोटा सा चीरा करें, और तब ligation (चित्रा 7b) के बाद बाएं हिस्से को हटाने. एक 4-0 रेशम के धागे के साथ डंडी के ligation के बाद छोड़ दिया पार्श्व पालि निकालें. Resected जिगर सतह ध्यान दाग़ना द्विध्रुवी संदंश के साथ. नतीजतन, जिगर की बड़े पैमाने पर एक से कम है50 pproximately 15% (7c चित्रा, घ).
  4. के plasty SHVC (8 चित्रा) के लिए:
    मच्छर संदंश (चित्रा 8a) के साथ डायाफ्राम के दोनों किनारों clamping द्वारा जिगर की स्थिति ठीक है. इसी डायाफ्राम को हटाने के द्वारा SHVC के पूर्वकाल दीवार छाँटो. दोनों कोनों पर बाहर से अंदर दो 7-0 polypropylene sutures के रूप में बाद में सम्मिलन (चित्रा 8b) के लिए sutures रहने देते. फिर SHVC के पीछे दीवार ट्रिम.
  5. 4 में जिगर अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना स्टोर ° ठंडे पानी में स्नान HTK समाधान में सी.

5. प्राप्तकर्ता ऑपरेशन

प्राप्तकर्ता चूहे में भ्रष्टाचार के आरोपण का स्कीमा 9 चित्र में दिखाया गया है. प्राप्तकर्ता आपरेशन 60-70 मिनट, जो anhepatic समय के 10-11 मिनट और IHVC clamping समय के लगभग 23-24 मिनट की आवश्यकता है.

  1. Do में के रूप में एक ही प्रक्रियाओं का प्रदर्शनएक midline चीरा द्वारा पेट के द्विपक्षीय एक्सटेंशन (10a चित्रा) के बिना खोलने के लिए छोड़कर आपरेशन और न ही (3.1 से 3.4).
  2. ग्रहणी और पूरे आंतों के सही पक्ष पर एक गीला धुंध झाड़ू प्लेस IHVC चारों ओर एक शल्य चिकित्सा क्षेत्र प्राप्त. बाईं बाएं subphrenic गुहा में पार्श्व और मंझला lobes रखो, और सही पार्श्व पालि एक गीला धुंध झाड़ू के साथ ऊपर की ओर वापस लेना. Retroperitoneal ऊतकों से IHVC अलग. कटी घमनी को बांधना और सही अधिवृक्क नस (10b चित्रा) विभाजित. एक गीला धुंध और कपास swabs, बाईं करने के लिए जिगर घुमाने के लिए, और जिगर के पीछे के आसपास बंधन टुकड़े करना.
  3. संरचनात्मक स्थिति के लिए सही पार्श्व पालि लौटें. एक गीला धुंध झाड़ू जगह को कवर करने के लिए और मंझला और बाएं पार्श्व lobes उर्ध्व वापस लेना. पूंछवाला लोब से शाखा के नीचे आड़ा काट पित्त नली. नरम पित्त नली आसपास के ऊतकों को जितना संभव के रूप में संरक्षित किया जाना चाहिए. रखें कटौती की एक वें के समाप्त होता हैपित्त नली के लिए लंबे समय के 4 मिमी ligated पढ़ें.
  4. कटी घमनी को बांधना और और चा से शाखाओं में बंटी के लिए एक 3 मिमी दूरी पर gastroduodenal उचित यकृत धमनी धमनी विभाजित. फिर, चा के अंत में एक धमनी के y संरचना बनाते हैं. रखें कटौती की एक उचित यकृत धमनी के लिए लंबे समय के 4 मिमी ligated धागे के समाप्त होता है. सही करने के लिए कपास swabs के साथ जिगर, घुमाएँ और बाईं ओर से जिगर के पीछे के चारों ओर बंधन टुकड़े करना.
  5. Lactated घंटी समाधान के 2 मिलीग्राम की नसों में इंजेक्शन के बाद, सही गुर्दे की नस के ऊपर सिर्फ एक धातु सूक्ष्म पोत दबाना साथ IHVC दबाना. चूहे के बाईं ओर से एक मच्छर संदंश द्वारा जिगर नाभिका में अपनी द्विभाजन के स्तर पर पोर्टल शिरा क्लैंप करें. SHVC साथ एक परिधीय संवहनी क्लैंप से दाईं ओर से डायाफ्राम के साथ, दबाना और तेल आधारित मिट्टी की एक गांठ में क्लैंप के उंगली की अंगूठी को ठीक.
  6. Anhepatic समय के दौरान 0.4% वॉल isoflurane के साथ संज्ञाहरण कमी (अवधिपोर्टल शिरा के पार clamping). आबकारी द्वारा SHVC, पोर्टल शिरा, और निम्न स्तर पर IHVC विदारक प्राप्तकर्ता देशी जिगर और जिगर SHVC के बीच सीमा पर SHVC, और पोर्टल शिरा, मच्छर संदंश के जबड़े बस के ऊपर, और जिगर और सही गुर्दे की नस (10c चित्रा) के बीच मध्य बिंदु से थोड़ा नीचे IHVC. जिगर अनुचित लाभ कमाने की चेष्टा करना orthotopically रखें.
  7. एक निरंतर सीवन (11 चित्रा) द्वारा SHVC के सम्मिलन के लिए:
    1. पोत दीवार लोभी या suturing सुई पकड़ लिए suturing प्रक्रिया के दौरान बाएं हाथ में एक घुमावदार सूक्ष्म संदंश का प्रयोग करें. सबसे पहले, प्राप्तकर्ता SHVC पर एक गाँठ (या आप इसे टाई के बाद सभी suturing प्रक्रियाओं को पूरा कर सकते हैं) बांधने बाद भ्रष्टाचार के सही कोने में संलग्न 7-0 polypropylene का उपयोग करके रहने सीवन अंदर से बाहर करने के लिए जगह है. अगले, एक ही रास्ते में छोड़ दिया मक्का में 2 रहने सीवन जगहएर, है है जो एक चल सीवन के शुरू सिलाई होगा. सम्मिलन को चौड़ा करने और बनाए रखने के DeBakey कोमल superiolaterally कर्षण (11a चित्रा, ख) के साथ दोनों कोनों पर एक प्रकार का कुत्त clamps का उपयोग sutures समझ.
    2. पियर्स निकट गाँठ बाहर अंदर करने के लिए बाहर से भ्रष्टाचार तरफ की दीवार के माध्यम से बाएँ कोने में सीवन, और SHVC के पीछे की पंक्ति 7 से 8 सही कोने (चित्रा 11c) टांके के साथ intraluminally सिवनी. पहले कुछ टांके ध्यान से तो लगता है कि अंदर lumens दूसरे का सामना कर रहे हैं. सही कोने में, बेध बाहर करने के लिए भ्रष्टाचार के पक्ष पर जहाज के माध्यम से 7-0 polypropylene.
    3. अगला, बाहर से पूर्वकाल पंक्ति सिवनी, लगभग 10 टांके (11d चित्रा) के साथ ठीक से छोड़ दिया. पूर्वकाल पंक्ति के पूरा होने से पहले, lactated घंटी समाधान के साथ अंदर फ्लश हवाई बुलबुले को दूर. पूर्वकाल पंक्ति में पिछले सिलाई के रूप में करीबबाएँ कोने में रहने, सीवन, और फिर उन्हें एक साथ टाई करने के लिए संभव है.
  8. एक कफ तकनीक (12 चित्रा) पोर्टल शिरा के पुनर्निर्माण के लिए:
    1. मंझला और बाएं पार्श्व lobes ऊपर वापस लेना एक गीला धुंध झाड़ू के साथ. जठरनिर्गम नस के साथ संगम में सही से एक डिस्पोजेबल सूक्ष्म पोत क्लैंप का उपयोग करके प्राप्तकर्ता पोर्टल शिरा क्लैंप करें. मच्छर है कि मिट्टी में पोर्टल शिरा clamps संदंश फिक्स और जिगर नाभिका (12a चित्रा, ख) की ओर संदंश की नोक खींच.
    2. मच्छर संदंश के जबड़े के नीचे बस पोर्टल शिरा के पूर्वकाल दीवार काटकर अलग कर देना. धोने के प्राप्तकर्ता पोर्टल शिरा और lactated घंटी समाधान के साथ कफ के अंदर. बाएं हाथ में एक सीधे माइक्रो संदंश और दाहिने हाथ में एक घुमावदार माइक्रो संदंश के साथ कफ की एक विस्तार के साथ चीरा के पूर्वकाल दीवार पकड़ो. प्राप्तकर्ता पोर्टल शिरा में कफ गहरा डालें, और यह एक के साथ सुरक्षितघैरा 6-0 रेशम धागा (चित्रा 12c च).
    3. रिलीज पोर्टल शिरा और SHVC के clamps, और फिर जिगर reperfuse. चूहे के पीछे से 5-मिलीलीटर सिरिंज निकालें, और 0.8 वॉल% isoflurane के एकाग्रता में वृद्धि.
  9. एक स्टेंट 16 तकनीक (13 चित्रा) से यकृत धमनी के पुनर्निर्माण के लिए:
    1. सबसे पहले, बाईं ओर से एक मच्छर संदंश द्वारा प्राप्तकर्ता उचित यकृत धमनी के धागे पकड़, और यह जिगर वृक्कनाभि की ओर खींच, और फिर दाईं ओर अग्न्याशय के करीब (13a चित्रा) से प्राप्तकर्ता चा दबाना.
    2. एक सीधे माइक्रो संदंश के साथ, Y-संरचना के विभाजन में प्राप्तकर्ता चा के अंत में एक छोटा सा चीरा एक कीप के आकार खोलने बनाने के. एक घुमावदार सूक्ष्म संदंश के साथ भ्रष्टाचार के चा में रखा स्टेंट पकड़ो. हेपरिन नाट्रियम समाधान (100 IU / मिलीलीटर) के साथ प्रत्येक लुमेन धोने के बाद, फिर में स्टेंट स्लाइडcipient चा और यह एक 6-0 रेशम के धागे के साथ सुरक्षित है. प्राप्तकर्ता चा पर इस धागे के एक छोर और भ्रष्टाचार चा पर 4 मिमी धागे एक साथ इतनी है कि दोनों Chas एक दूसरे के करीब शाखामिलन संबंधी साइट (चित्रा 13b) के कम तनाव के साथ मिल बाँधो. उसके बाद, दबाना रिलीज.
  10. एक निरंतर सीवन (14 चित्रा) द्वारा IHVC के सम्मिलन के लिए:
    SHVC के लिए के रूप में एक ही फैशन में है, लेकिन दो भागों का आपस में मिलाना बेहतर काटने के साथ और अधिक टांके (चित्रा 14a घ) का उपयोग करें. पिछले सिलाई में sutures के बांधने, समाप्त किया जा सकता है या शाखामिलन संबंधी भी कसकर बांधने के कारण निंदा से बचने बांधने एक वृद्धि कारक के साथ पूरा किया जा सकता है. Declamping बाद, 1.0 वॉल% संज्ञाहरण की एकाग्रता में वृद्धि. यदि सम्मिलन stenotic लग रहा है, द्विपक्षीय प्रवास के sutures खींच या पूर्वकाल पंक्ति धीरे को चौड़ा करने के लिए सम्मिलन का विस्तार शाखामिलन संबंधी साइट चौड़ा करना.
  11. 8.4% सोडियम बाइकार्बोनेट solutio की 0.5 मिलीलीटर प्रशासनn lactated घंटी नसों के समाधान के 1.0 मिलीलीटर के साथ.
  12. Tachosil के छोटे टुकड़ों resected जिगर सतह को सील करने के लिए खून बह रहा है और पित्त रिसाव को रोकने के लागू.
  13. एक स्टेंट तकनीक द्वारा पित्त नली के पुनर्निर्माण के लिए:
    1. बाईं ओर से एक मच्छर संदंश द्वारा प्राप्तकर्ता पित्त नली के धागे पकड़ो. फिक्स मिट्टी में मच्छर संदंश, और जिगर नाभिका ओर संदंश की नोक खींच.
    2. पित्त नली में उचित स्तर पर एक छोटा सा चीरा इतना करना है कि खंगाला पित्त नली भी लंबा नहीं होगा. सावधान करने के लिए एक मोड़ से बचने के लिए ध्यान के साथ प्राप्तकर्ता वाहिनी में भ्रष्टाचार पित्त नली में रखा स्टेंट डालें, और यह एक 6-0 रेशम के धागे के साथ सुरक्षित है. प्राप्तकर्ता और भ्रष्टाचार वाहिनी पर 4 मिमी धागा वाहिनी पर इस धागे बाँध एक साथ इतनी है कि दोनों नलिकाओं शाखामिलन संबंधी साइट के कम तनाव के साथ एक दूसरे के करीब मिलता है.
  14. पुनर्निर्माण प्रक्रियाओं के पूरा होने पर, 1 मीटर इंजेक्षन5% ग्लूकोज समाधान के एल नसों के (15 चित्रा).
  15. पर्याप्त hemostasis पुष्टि करें, और फिर निरंतर 4-0 Vicryl sutures द्वारा दो परतों में पेट चीरा बंद.

6. पश्चात उपचार और अनुवर्ती

आपरेशन के तुरंत बाद, एक cefuroxime सोडियम की उपचर्म इंजेक्शन (16 मिग्रा / किग्रा) और सामान्य नमक समाधान के 1.5 मिलीलीटर की एक कुल में buprenorphine (0.1 मिलीग्राम / किग्रा) के साथ प्राप्तकर्ता चूहे का इलाज. चूहे एक विशेष गरम हवा (30-35 डिग्री सेल्सियस) और एक ऑक्सीजन की आपूर्ति के साथ गहन देखभाल इकाई पिंजरे में 60 मिनट के लिए ठीक करने के लिए अनुमति दें. 3 दिनों के लिए (0.1 मिलीग्राम / किग्रा) एक एनाल्जेसिक के रूप subcutaneously buprenorphine हर 12 घंटे सुई. उसके बाद एक सामान्य पिंजरे चूहे को स्थानांतरित करने के लिए, और यथेच्छ पानी और भोजन के लिए उपयोग प्रदान करते हैं.

Representative Results

सभी प्राप्तकर्ता चूहों (एन 20 =) स्पष्ट जटिलताओं के बिना रक्त नमूने के लिए योजना बनाई इच्छामृत्यु तक 1, 3, 24, और 168 घंटे में (7 दिन) बच पोर्टल reperfusion के बाद (n = प्रत्येक समय बिंदु पर 5). रक्त नमूने IHVC से एक 27 गेज सुई के साथ एक प्रत्यक्ष पंचर द्वारा एकत्र किए गए. 10 मिनट के लिए 5340 XG पर centrifugation के बाद, सीरम के नमूने प्राप्त किया गया और alanine aminotransferase (ALT) के स्तर, जो प्रत्यारोपण के बाद hepatocellular नुकसान की डिग्री को प्रतिबिंबित करने के लिए विश्लेषण किया. सीरम एएलटी स्तर में परिवर्तन के समय पाठ्यक्रम 16 चित्र में दिखाया गया है. ALT स्तर को 24 घंटे में एक चोटी पर पहुँच (± मानक विचलन: 212.6 ± 67.9 आइयू / एल) और फिर सामान्य सीमा के भीतर घंटा 168 (33.6 ± 6.8 / आइयू एल) में गिरावट आई है.

चित्रा 1
चित्रा 1 1 एक से पोर्टल शिरा (पीवी) के लिए एक कफ.4 गेज, कैथेटर, और यकृत (एचए) धमनी और 24 गेज कैथेटर से पित्त नली (बी) के लिए stents.

चित्रा 2
चित्रा 2. हा, यकृत धमनी, IHVC, infrahepatic वेना कावा, पी.वी., पोर्टल शिरा, SHVC, suprahepatic वेना कावा दाता चूहे से जिगर की हटाने की BD, पित्त नली स्कीमा.

चित्रा 3
चित्रा 3. दाता आपरेशन. एक चूहे एक हीटिंग पैड पर एक चुंबकीय Fixator त्याग प्रणाली के साथ रखा गया है. पेट द्विपक्षीय एक्सटेंशन के साथ एक midline चीरा द्वारा खोला है ख. स्टेंट की प्रविष्टि पित्त नली में ग पोर्टल नस के माध्यम से जिगर की परफ्यूज़न. लघुरूप हैं समझानेचित्रा 2 में एड.

चित्रा 4
चित्रा 4. पोर्टल शिरा के लिए एक कफ के अनुलग्नक. एक, ख DeBakey बुलडॉग क्लैंप है कि पोर्टल शिरापरक ट्रंक grasps धातु कप पर रखा गया है. कप प्लास्टिक कुचल बर्फ सी के साथ भरा बॉक्स में मुहिम शुरू की है पोर्टल शिरा कफ के माध्यम से डाल दिया है.. पोर्टल शिरा की दीवार कफ कफ बाहर प्लीहा नस के स्टंप के साथ 7 everted बजे की स्थिति और स्थिति बजे 12 कफ का एक विस्तार है. ई पोर्टल शिरा एक घैरा 6-0 कफ पर रेशम के धागे के साथ सुरक्षित है. काले तीर प्लीहा नस के स्टंप से संकेत मिलता है.

चित्रा 5
चित्रा 5 पूर्व vivo.यकृत धमनी में एक स्टेंट की प्रविष्टि. एक जिगर डायाफ्राम के दोनों किनारों clamping द्वारा तय हो गई है, और यकृत धमनी धमनी के लिए ligated धागा धारण करके सीधे खींच लिया है. यकृत धमनी पर छोटा सा चीरा के पूर्वकाल दीवार एक सीधे माइक्रो संदंश के साथ आयोजित किया जाता है. सी, डी. स्टेंट यकृत धमनी में डाला जाता है और एक 6-0 रेशम के धागे के साथ सुरक्षित है.

चित्रा 6
6 चित्रा. पूर्व vivo 50% जिगर लकीर के स्कीमा. ग्रे रंग में Lobes हटा रहे हैं. ACL, पूर्वकाल पालि पूंछवाला, PCL, पीछे पूंछवाला पालि, LLL, बाएँ पार्श्व पालि, एलएमएल, मंझला पालि के बाएं हिस्से, आरएमएल, मंझला पालि के सही भाग; SRL, बेहतर सही पार्श्व पालि, IRL, अवर सही पार्श्व पालि.


7 चित्रा पूर्व vivo 50% जिगर लकीर. मंझला पालि ग. के बाएं हिस्से की डंडी के पीछे पूंछवाला लोब की डंडी की Ligation. ख. Ligation 50% की लकीर से पहले जिगर. 50% लकीर के बाद जिगर.

चित्रा 8
8 चित्रा suprahepatic वेना कावा के पूर्व vivo plasty. एक जिगर मच्छर संदंश साथ डायाफ्राम के दोनों किनारों के clamping द्वारा तय हो गई है ख 7-0 polypropylene के साथ रहो. sutures दोनों कोनों में संलग्न हैं.

9 चित्रा 9 चित्रा. प्राप्तकर्ता चूहे में भ्रष्टाचार के आरोपण की स्कीमा पुनर्निर्माण प्रक्रियाओं. सुप्रा और infrahepatic वेना कावा (SHVC और IHVC) के लिए एक निरंतर 7-0 सीवन, एक कफ तकनीक द्वारा पोर्टल शिरा (पीवी), और यकृत के साथ प्रदर्शन कर रहे हैं (एचए) धमनी और एक स्टेंट तकनीक द्वारा पित्त नली (बी).

10 चित्रा
10 चित्रा. प्राप्तकर्ता देशी जिगर को हटाने तक आपरेशन. एक पेट एक midline चीरा द्वारा खोला ज. सही अधिवृक्क नस ligated है. ग देशी जिगर excised है. संकेताक्षर चित्रा 2 में समझाया जाता है.

11 चित्रा
11 चित्रा. Suprahe का सम्मिलनpatic वेना कावा. एक, ख के लिए परिधीय क्लैंप suprahepatic वेना कावा तेल आधारित मिट्टी की एक गांठ में तय हो गई है. दोनों कोनों में रहने sutures सौम्य कर्षण के साथ रखा जाता है superiolaterally सम्मिलन को चौड़ा करने के लिए ग. प्रगति में सतत पीछे पंक्ति के intraluminal सिवनी घ प्रगति में पूर्वकाल पंक्ति की सतत सिवनी.

12 चित्रा
12 चित्रा. पोर्टल शिरा के पुनर्निर्माण. एक, ख. मच्छर संदंश पोर्टल शिरा clamping तेल आधारित मिट्टी में तय हो गई है और जिगर वृक्कनाभि ओर खींचा cf. कफ के पोर्टल शिरा में निवेशन.

13 चित्रा
13 चित्रा. यकृत धमनी के पुनर्निर्माण. ए, बी. छ> उचित यकृत (पीएचए) धमनी और gastroduodenal धमनी (जीडीए) के बंटवारे पर प्राप्तकर्ता आम यकृत धमनी चा () में एक स्टेंट के निवेशन.

14 चित्रा
14 चित्रा. Infrahepatic वेना कावा का सम्मिलन. infrahepatic वेना कावा के दोनों कोनों में रहने sutures. ख पीछे पंक्ति की सतत सिवनी ग पूर्वकाल पंक्ति की सतत सिवनी. reperfusion. संकेताक्षर चित्रा 2 में समझाया जाता है.

15 चित्रा
15 चित्रा. पुनर्निर्माण की प्रक्रिया खत्म हो रहे हैं. संकेताक्षर चित्रा 2 में समझाया जाता है.

</ Html"" 16 चित्रा = "files/ftp_upload/4376/4376fig16.jpg /" />
16 चित्रा सीरम alanine aminotransferase (ALT) के स्तर में परिवर्तन के पश्चात समय पाठ्यक्रम (n = 20, n = प्रत्येक समय बिंदु पर 5). डेटा कि मानक विचलन का संकेत त्रुटि सलाखों के साथ साधन के रूप में व्यक्त कर रहे हैं. ALT स्तर 24 घंटे में एक चोटी (212.6 ± 67.9 एल / आइयू) पर पहुंच गया और फिर सामान्य सीमा के भीतर घंटा 168 (33.6 ± 6.8 / आइयू एल) में गिरावट आई है.

Discussion

चूहे OLT की पहली मॉडल ली एट अल द्वारा सूचित किया गया था, 1973 में 9, जिसमें यकृत धमनी सहित सभी जहाजों एक हाथ sewn विधि से खंगाला गया और extracorporeal portosystemic अलग धकेलना इस्तेमाल किया गया था. इस मॉडल को तकनीकी रूप से जटिल और प्रदर्शन करने के लिए मुश्किल था. अगले मॉडल यकृत धमनी पुनर्निर्माण और extracorporeal अलग धकेलना के बिना, एक ही 1975 में 10 लेखकों द्वारा विकसित किया गया था. इसके बाद 1979 में, Kamada एट अल. यकृत 11 rearterialization बिना मॉडल के लिए कफ सम्मिलन तकनीक शुरू की. इन संशोधनों के साथ चूहों में OLT प्राप्तकर्ता आपरेशनों में एक छोटा anhepatic समय के साथ सरलीकृत किया गया है और व्यापक रूप से स्वीकार किए जाते हैं एक प्रयोगात्मक मॉडल के रूप में इस्तेमाल किया गया है.

हालांकि, वहाँ काफी विवाद तब से किया गया है क्योंकि उपर्युक्त क्रिया चूहे में यकृत धमनीचक्र संयोजन OLT 8 के महत्व पर एक काम की मांग थी, लेकिन diप्रत्यारोपण के बाद अस्तित्व को प्रभावित नहीं हूं. यकृत धमनीचक्र संयोजन पर कई अध्ययनों से विभिन्न पुनर्निर्माण तकनीक का उपयोग एक महाधमनी खंड महाधमनी 3,9,17 सम्मिलन, एक कफ सम्मिलन 18,19,20 तकनीक, एक telescoping 5 तकनीक, एक स्टेंट 13 तकनीक के रूप में 8, सूचित किया गया है, 16, और एक आस्तीन सम्मिलन 12,21-23 तकनीक. जबकि चूहे OLT के लिए तकनीक आज भी है मानकीकृत नहीं, arterialized मॉडल तेजी से किया गया है और अपनी शारीरिक 8,12,13,14 श्रेष्ठता के मामले में इष्ट. उपर्युक्त तकनीक के अलावा, एक स्टेंट तकनीक है कि सरल और तेजी से करने के लिए प्रदर्शन था लेहमेन एट अल द्वारा सूचित किया गया था 2005 में 16. अध्ययन उत्कृष्ट परिणाम से पता चला: कोई रोड़ा दर खंगाला यकृत धमनी में reperfusion के बाद 8 घंटा, 24 घंटा, और 6 महीने में मनाया गया. इसलिए हम यकृत धमनीचक्र संयोजन के लिए इस तकनीक को अपनाया.

हम कामकाजमा SHVC और IHVC के पुनर्निर्माण के लिए हाथ sewn सम्मिलन. इस पद्धति का एक इष्टतम शारीरिक हालत है, जो 8 घनास्त्रता की घटनाओं में कमी करने के लिए सुराग के साथ शाखामिलन संबंधी साइट प्रदान करता है, और सबसे अच्छा microsurgery सिमुलेशन और सर्जनों के लिए प्रशिक्षण है. इसके अलावा, सम्मिलन कम पोत स्टंप साथ भी संभव हो सकता है. IHVC के सम्मिलन के संबंध में, इस विधि भ्रष्टाचार तरफ एक लंबे IHVC कफ सम्मिलन तकनीक के साथ तुलना की आवश्यकता नहीं है. इसलिए, जब दाता गुर्दे की नस भ्रष्टाचार IHVC लंबे समय dissected है, यह विधि एक छोटे भ्रष्टाचार के प्रत्यारोपण कि एक 30% भ्रष्टाचार कि एक छोटी intrahepatic के साथ सही पार्श्व और पूंछवाला lobes के होते हैं के रूप में एक लंबा IHVC आवश्यक लागू है वेना कावा SHVC बिना 2.

चूहों के लिए कई तरीकों की तारीख में जिगर लकीर की तकनीक के बारे में सूचित किया गया है, दो प्रमुख तकनीकों शास्त्रीय जन संयुक्ताक्षर तकनीकऔर पोत उन्मुख तकनीक 24. हम 50% जिगर लकीर 15 के लिए शास्त्रीय संयुक्ताक्षर तकनीक के प्रदर्शन, लेकिन एक शल्य खुर्दबीन के नीचे प्रक्रिया बेहतर बनाने के लिए, और शेष lobes और संरचनाओं के लिए क्षति से बचने के लिए.

हम हमारे मॉडल में प्राप्तकर्ता चूहों से प्रतिनिधि परिणाम का वर्णन, चूहों सात दिन स्पष्ट जटिलताओं के बिना प्रेक्षण अवधि के दौरान बच गया. मॉडल प्रयोगों के विभिन्न प्रयोजनों के लिए लंबे समय तक कोल्ड स्टोरेज, लंबे समय तक गर्म ischemia है कि हृदय की मौत के बाद दान भी शामिल है, और छोटे जिगर जिगर चोट या बीमारियों की प्रयोगात्मक मॉडल से या grafts grafts के उपयोग के रूप में विभिन्न सेटिंग्स, चुनने के द्वारा संशोधित किया जा सकता है.

आपरेशन समय ई खून की कमी की राशि: हमारे अनुभव में, वहाँ प्रक्रियाओं है कि प्रत्यारोपण, चूहा OLT के परिणामों के लिए सबसे विश्वसनीय पैरामीटर के बाद अस्तित्व को प्रभावित कर सकते हैं भर में तीन प्रमुख कारक हैंविशेष clamping पोर्टल शिरा और IHVC के समय, और प्रत्येक पोत के पुनर्निर्माण की पर्याप्तता, जो एक प्रकार का रोग, घनास्त्रता, में परिणाम सकता है, या खून बह रहा है. इस मॉडल का एक प्रशिक्षण अवधि में, विफलताओं की सबसे शायद उन कारकों को संबंधित किया जा सकता है. इस वीडियो लेख में, हम हमारे यकृत धमनी पुनर्निर्माण के साथ आंशिक OLT के चूहे मॉडल के लिए शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं के लिए कदम दर कदम निर्देश उपस्थित थे. जबकि OLT की एक चूहे मॉडल जटिल है और उन्नत microsurgical कौशल की आवश्यकता है, इस लेख व्यावहारिक जानकारी के बहुत प्रदान करता है, जो प्रशिक्षण और इस मॉडल की सीखने के लिए एक अच्छा गाइड के रूप में सेवा करनी चाहिए. इस मॉडल को कुशलतापूर्वक सीखना सीखने की अवधि को छोटा, जानवरों और अभ्यास के लिए आवश्यक लागत की संख्या को कम करने, और प्रयोगों बाद में reproducing विश्वसनीय परिणाम के लिए विशेष रूप से महत्वपूर्ण है. यह पशु प्रयोगों के 3Rs (प्रतिस्थापन, कमी, और शोधन) अवधारणा है, जो रसेल और Burch में माने था के साथ लाइन में है1959 25.

Disclosures

हम परस्पर विरोधी हितों का खुलासा करने के लिए नहीं है. चूहों विशिष्ट रोगज़नक़ मुक्त शर्तों के तहत प्रयोगशाला पशु विज्ञान एसोसिएशंस (FELASA) के लिए संघ के दिशा निर्देशों के अनुसार रखे जाते हैं. सभी प्रयोगों जर्मन संघीय पशुओं के संरक्षण और प्रयोगशाला पशु की देखभाल और उपयोग के लिए गाइड "(स्वास्थ्य प्रकाशन 86-23 नंबर के राष्ट्रीय संस्थानों, 1985 में संशोधित) के बारे में कानून के अनुसार में आयोजित की गई.

Acknowledgments

लेखकों पास्कल Paschenda और Mareike Schulz उनके तकनीकी सहायता के लिए धन्यवाद.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Surgical microscope Leica M651
Light source Schott KL1500LCD
Cotton swabs NOBA Verbandmittel 974202
Gauze swabs (5x5 cm) Fuhrmann 10002
povidone-iodine solution Mundipharma 6108022.00.01
Oil-based clay Debika corporation 090148
TachoSil Takeda Pharmaceuticals International GmbH EU/1/04/277/001-004 Applied to resected liver surface
Scalpel blade No. 11 Pfm medical 200130011 Preparation of cuff and stents
14-gauge catheter B. Braun 4268210S Cuff for PV
18-gauge catheter B. Braun 4268130S Perfusion via PV
24-gauge catheter B. Braun 4269071S Stent for BD and HA
4-0 silk suture Resorba H3F Liver resection
6-0 silk suture Resorba H1F
7-0 Prolene (polypropylene) suture Ethicon 8701H SHVC and IHVC
4-0 Vicryl suture Ethicon V304H Abdominal closure
5-ml syringe Terumo SS+T05ES1 Back pillow
Heating pad Thermo 190 x 260 mm
Magnetic fixator retraction system Fine Science Tools Inc. 18200-01
18200-02
18200-03
18200-12
Cold water bath Huber 740.000X Graft preservation
Bipolar forceps Söring MBC-200
Mosquito forceps BONIMED 451-476-03 Two pairs used
Adson micro forceps Dimeda 10.176.12
Curved micro forceps AESCULAP FD281R
Straight micro forceps Bonimed 451-476-03
Curved micro scissors Medicon 05.15.83
Straight micro scissors AESCULAP FD12 Fine incision
Scissors AESCULAP BC211W
Micro needle holder AESCULAP FD241R Reconstruction
Mayor-Hegar Needle holder Mizuho Ikakogyo 06-798-00 Abdominal closure
DeBakey Bulldog clamp (straight) ULRICH CV3054
DeBakey Bulldog clamp (curved) CODMAN 37-1062
Satinsky clamp Mizuhoika 09-230-24
Peripheral vascular clamp Teleflex Medical 353494 Recipient SHVC
Micro vessel clamp (disposable) AROSurgical Instruments Corporation TKM-1-60 g PV, graft IHVC, and recipient HA
Micro vessel clamp (metal) Fine Science Tools Inc. 18052-01 Recipient IHVC
Lactated Ringer solution Fresenius Kabi 6150917.00.00
Normal saline solution DeltaSelect 1299.99.99
HTK solution Dr. Franz Köhler Chemie GmbH 31268.00.00 Preservation solution
Heparin-Natrium Ratiopharm 5394.02.00 500 IU before graft perfusion
8.4% sodium bicarbonate Fresenius Kabi 4399.97.99 0.5 ml after reperfusion
5% Glucose solution B. Braun 6714567.06.00 1.0 ml after reperfusion
Cefuroxim sodium Fresenius Kabi 38985.01.00 Antibiotic, 16 mg/kg
Buprenorphine Essex Pharma 997.00.00 Painkiller, 0.1 mg/kg
Intensive Care Unit Cage Brinsea Products Ltd. Vetario S10 Postoperative care

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References

  1. Puhl, G., et al. Low viscosity histidine-tryptophan-ketoglutarate graft flush improves subsequent extended cold storage in University of Wisconsin solution in an extracorporeal rat liver perfusion and rat liver transplantation model. Liver Transpl. 12, 1841-1849 (2006).
  2. Yagi, S., et al. Improved Preservation and Microcirculation with POLYSOL After Partial Liver Transplantation in Rats. J Surg Res. 167, e375-e383 (2011).
  3. Engemann, R., Ulrichs, K., Thiede, A., Muller-Ruchholtz, W., Hamelmann, H. Value of a physiological liver transplant model in rats. Induction of specific graft tolerance in a fully allogeneic strain combination. Transplantation. 33, 566-568 (1982).
  4. Sumimoto, R., Shinomiya, T., Yamaguchi, A. Influence of hepatic arterial blood flow in rats with liver transplants. Examination of donor liver-derived serum class I MHC antigen in rats with liver transplants with or without hepatic arterial reconstruction. Transplantation. 51, 1138-1139 (1991).
  5. Chaland, P., et al. Orthotopic liver transplantation with hepatic artery anastomoses. Hemodynamics and response to hemorrhage in conscious rats. Transplantation. 49, 675-678 (1990).
  6. Imamura, H., Rocheleau, B., Cote, J., Huet, P. M. Long-term consequence of rat orthotopic liver transplantation with and without hepatic arterial reconstruction: a clinical, pathological, and hemodynamic study. Hepatology. 26, 198-205 (1997).
  7. Zhong, Z., Theruvath, T. P., Currin, R. T., Waldmeier, P. C., Lemasters, J. J. NIM811, a mitochondrial permeability transition inhibitor, prevents mitochondrial depolarization in small-for-size rat liver grafts. Am. J. Transplant. 7, 1103-1111 (2007).
  8. Spiegel, H. U., Palmes, D. Surgical techniques of orthotopic rat liver transplantation. J. Invest. Surg. 11, 83-96 (1998).
  9. Lee, S., Charters, A. C., Chandler, J. G., Orloff, M. J. A technique for orthotopic liver transplantation in the rat. Transplantation. 16, 664-669 (1973).
  10. Lee, S., Charters, A. C. 3rd, Orloff, M. J. Simplified technic for orthotopic liver transplantation in the rat. Am. J. Surg. 130, 38-40 (1975).
  11. Kamada, N., Calne, R. Y. Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage. Transplantation. 28, 47-50 (1979).
  12. Howden, B., Jablonski, P., Grossman, H., Marshall, V. C. The importance of the hepatic artery in rat liver transplantation. Transplantation. 47, 428-431 (1989).
  13. Gao, W., Lemasters, J. J., Thurman, R. G. Development of a new method for hepatic rearterialization in rat orthotopic liver transplantation. Reduction of liver injury and improvement of surgical outcome by arterialization. Transplantation. 56, 19-24 (1993).
  14. Zhao, D., Zimmermann, A., Wheatley, A. M. Morphometry of the liver after liver transplantation in the rat: significance of an intact arterial supply. Hepatology. 17, 310-317 (1993).
  15. Omura, T., Ascher, N. L., Emond, J. C. Fifty-percent partial liver transplantation in the rat. Transplantation. 62, 292-293 (1996).
  16. Lehmann, T. G., Bunzendahl, H., Langrehr, J. M., Neuhaus, P. Arterial reconstruction in rat liver transplantation--development of a new tubing technique of the common hepatic artery. Transpl. Int. 18, 56-64 (2005).
  17. Reck, T., et al. Impact of arterialization on hepatic oxygen supply, tissue energy phosphates, and outcome after liver transplantation in the rat. Transplantation. 62, 582-587 (1996).
  18. Hasuike, Y., et al. A simple method for orthotopic liver transplantation with arterial reconstruction in rats. Transplantation. 45, 830-832 (1988).
  19. Steffen, R., Ferguson, D. M., Krom, R. A. A new method for orthotopic rat liver transplantation with arterial cuff anastomosis to the recipient common hepatic artery. Transplantation. 48, 166-168 (1989).
  20. Knoop, M., Bachmann, S., Keck, H., Steffen, R., Neuhaus, P. Experience with cuff rearterialization in 600 orthotopic liver grafts in the rat. Am. J. Surg. 167, 360-363 (1994).
  21. Hickman, R., Engelbrecht, G. H., Duminy, F. J. A technique for liver transplantation in the rat. Transplantation. 48, 1080 (1989).
  22. Liu, T., Freise, C. E., Ferrell, L., Ascher, N. L., Roberts, J. P. A modified vascular "sleeve" anastomosis for rearterialization in orthotopic liver transplantation in rats. Transplantation. 54, 179-180 (1992).
  23. Li, J., et al. Modified sleeve anastomosis for reconstruction of the hepatic artery in rat liver transplantation. Microsurgery. 22, 62-68 (2002).
  24. Martins, P. N., Theruvath, T. P., Neuhaus, P. Rodent models of partial hepatectomies. Liver Int. 28, 3-11 (2008).
  25. Russell, W. M. S., Burch, R. L. The Principles of Humane Experimental Technique. , Methuen & Co. Ltd. London. reprinted by UFAW (1992).

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Nagai, K., Yagi, S., Uemoto, S., Tolba, R. H. Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction. J. Vis. Exp. (73), e4376, doi:10.3791/4376 (2013).

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