Erratum: Titration von humanen Coronaviren mittels eines Immunperoxidase-Assays

1. April 2012

In diesem Artikel

Zusammenfassung

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Eine Korrektur wurde vorgenommen für: Titration von humanen Coronaviren mithilfe eines Immunperoxidase-Assays. Aufgrund eines Verlegerfehlers wurde ein überarbeiteter Abstract erneut veröffentlicht.

Zusammenfassung

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Es wurde eine Korrektur an folgendem Artikel vorgenommen: Titration von humanen Coronaviren mithilfe eines Immunperoxidase-Assays. Aufgrund eines Verlagsfehlers wurde ein überarbeiteter Abstract erneut veröffentlicht.

Überarbeiteter Abstract:

Die Bestimmung infektiöser Virustiter ist eine grundlegende und essentielle experimentelle Methode für Virologen. Klassische Plaque-Assays können nicht für Viren verwendet werden, die keine signifikanten zytopathischen Effekte hervorrufen, wie dies bei den Stammtypen 229E und OC43 des humanen Coronavirus (HCoV) der Fall ist. Daher wurde ein alternativer indirekter Immunperoxidase-Assay (IPA) zur Detektion und Titrierung dieser Viren entwickelt und wird hier beschrieben. Empfängliche Zellen werden in einem 96-Loch-Plattenformat mit seriellen logarithmischen Verdünnungen virushaltiger Proben infiziert. Nach dem viralen Wachstum ergibt die Virusdetektion mittels IPA den infektiösen Virustiter, ausgedrückt als „Tissue Culture Infectious Dose 50 percent“ (TCID50). Dies repräsentiert die Verdünnung einer virushaltigen Probe, bei der die Hälfte einer Reihe von Laborwells infektiöses, replizierendes Virus enthält. Diese Technik stellt eine zuverlässige Methode zur Titrierung von HCoV-229E und HCoV-OC43 in biologischen Proben wie Zellen, Geweben und Flüssigkeiten dar. Dieser Artikel basiert auf einer Arbeit, die erstmals in Methods in Molecular Biology (2008), Band 454, Seiten 93–102, veröffentlicht wurde.

Ursprünglicher Abstract:

Die Bestimmung der infektiösen Virus-Titer stellt eine grundlegende und unverzichtbare experimentelle Methode für Virologen dar. Klassische Plaque-Assays können nicht für Viren verwendet werden, die keine signifikanten zytopathischen Effekte hervorrufen, wie dies bei den Stämmen 229E und OC43 des humanen Coronavirus (HCoV) der Fall ist. Ein alternativer indirekter Immunperoxidase-Assay (IPA) wird hier zur Detektion und Titrierung dieser Viren beschrieben. Empfängliche Zellen werden in einer 96-Loch-Platte mit seriellen logarithmischen Verdünnungen der Proben infiziert. Nach dem viralen Wachstum ermöglicht die Virusdetektion mittels IPA die Ermittlung des infektiösen Virustiters, angegeben als „infektiöse Gewebekultur-Dosis“ (TCID50). Dieser Wert entspricht der Verdünnung einer virushaltigen Probe, bei der die Hälfte einer Reihe von Laborwells replizierende Viren enthält. Diese Methode ist eine zuverlässige Technik zur Titrierung von HCoV in biologischen Proben (Zellen, Geweben oder Flüssigkeiten).

Protokoll

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Es wurde eine Korrektur an folgendem Artikel vorgenommen: Titration von humanen Coronaviren mithilfe eines Immunperoxidase-Assays. Aufgrund eines Verlegerfehlers wurde ein überarbeiteter Abstract erneut veröffentlicht.

Überarbeiteter Abstract:

Die Bestimmung infektiöser Virustiter ist eine grundlegende und essentielle experimentelle Methode für Virologen. Klassische Plaque-Assays können nicht für Viren verwendet werden, die keine signifikanten zytopathischen Effekte hervorrufen, wie dies bei den Stammtypen 229E und OC43 des humanen Coronavirus (HCoV) der Fall ist. Daher wurde ein alternativer indirekter Immunperoxidase-Assay (IPA) zur Detektion und Titrierung dieser Viren entwickelt und wird hier beschrieben. Empfängliche Zellen werden in einem 96-Loch-Plattenformat mit seriellen logarithmischen Verdünnungen virushaltiger Proben infiziert. Nach dem viralen Wachstum ergibt die Virusdetektion mittels IPA den infektiösen Virustiter, angegeben als „Tissue Culture Infectious Dose 50 percent“ (TCID50). Dieser Wert repräsentiert die Verdünnung einer virushaltigen Probe, bei der die Hälfte einer Reihe von Laborwells infektiöses, replizierendes Virus enthält. Diese Technik stellt eine zuverlässige Methode zur Titrierung von HCoV-229E und HCoV-OC43 in biologischen Proben wie Zellen, Geweben und Flüssigkeiten dar. Dieser Artikel basiert auf einer früheren Arbeit, die erstmals in Methods in Molecular Biology (2008), Band 454, Seiten 93–102, veröffentlicht wurde.

Ursprünglicher Abstract:

Die Berechnung infektiöser Virustiter stellt eine grundlegende und unverzichtbare experimentelle Methode für Virologen dar. Klassische Plaque-Assays können nicht für Viren verwendet werden, die keine signifikanten zytopathischen Effekte hervorrufen, wie dies bei den Stämmen 229E und OC43 des humanen Coronavirus (HCoV) der Fall ist. Ein alternativer, indirekter Immunperoxidase-Assay (IPA) wird hier zur Detektion und Titrierung dieser Viren beschrieben. Empfängliche Zellen werden in einer 96-Loch-Platte mit seriellen logarithmischen Verdünnungen der Proben infiziert. Nach dem viralen Wachstum ergibt die virale Detektion mittels IPA den infektiösen Virustiter, ausgedrückt als „Tissue Culture Infectious Dose“ (TCID50). Dieser Wert entspricht der Verdünnung einer virushaltigen Probe, bei der die Hälfte einer Reihe von Laborwells replizierendes Virus enthält. Diese Technik ist eine zuverlässige Methode zur Titrierung von HCoV in biologischen Proben (Zellen, Geweben oder Flüssigkeiten).

Offenlegungen

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Keine Interessenkonflikte erklärt.

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Schlagwörter

Human Coronavirus TitrationTCID50 BestimmungMessung des VirustitersSerielle Verd nnungsmethode96 Well PlattenformatVirusnachweistechnikGewebekultur infekti se DosisHCoV 229E HCoV OC43Plaque Assay Alternative