Methodenartikel
Die Milchgewinnung aus Tiermodellen erleichtert verschiedene Forschungswege: das Verständnis der passiven Immunität, die Identifizierung von Krankheitserregern, die für die vertikale Übertragung verantwortlich sind, und durch die Verwendung transgener Mäuse sogar die kommerzielle Produktion von Proteinen, die in menschlicher Muttermilch vorkommen. Hier veranschaulichen wir eine einfache Methode zur Milchgewinnung bei Mäusen und Reeves-Muntjakhirschen.
Tiermodelle werden häufig in Forschungslaboratorien verwendet, um das zu erreichen, was normalerweise im nativen Wirt eines Krankheitserregers als unpraktisch angesehen würde. Die Milchgewinnung von Tieren gibt Wissenschaftlern die Möglichkeit, viele Aspekte der Fortpflanzung zu untersuchen, einschließlich vertikaler Übertragung, passiver Immunität, Biologie der Brustdrüse und Laktation. Die Gewinnung ausreichender Milchmengen für diese Studien ist eine schwierige Aufgabe, insbesondere aus Kleintiermodellen. Hier veranschaulichen wir eine kostengünstige und einfache Methode zur Milchgewinnung bei Mäusen und Reeves-Muntjakhirschen, die keine spezielle Ausrüstung oder umfangreiche Schulung erfordert. Für diese spezielle Methode sind zwei Forscher erforderlich: einer, um die Milch abzupumpen und das Tier zu stabilisieren, und einer, der die Milch in einem geeigneten Behälter aus einem Muntjak- oder Mausmodell sammelt. Das Mausmodell erfordert außerdem die Verwendung eines P-200-Pipettierers und entsprechender Pipettenspitzen. Obwohl diese Methode kostengünstig und relativ einfach durchzuführen ist, sollten die Forscher darauf hingewiesen werden, dass eine Betäubung des Tieres für eine optimale Milchgewinnung erforderlich ist.
Tiermodelle geben Einblick in Krankheitspathologie, die nicht durch in vitro-Analyse gewonnen werden können. Um die wirksamsten Ergebnisse zu erzielen, ist es wichtig, ein Tiermodell, das eng mit der Krankheit und verwandte Spezies von Interesse verwendet wird. Zum Beispiel, die Reeves 'muntjac (Muntiacus reevesi), eine kleine asiatische Hirsche 1,2 und transgenen Mäusen, die Hirsch Prion-Protein (CerTgPrP) 3 exprimieren sind nützlich, Tiermodelle für Hirscharten. Beide Arten sind polyestrous, so dass das ganze Jahr über Zucht, und somit eine konsistente Quelle für schwangerschaftsbedingten Gewebe und Flüssigkeiten, um spez....
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1. Maus Melken Protokoll
Die in diesem Protokoll beschriebenen Verfahren wurden durch IACUC genehmigt.
1. Trennung des Dam von Offspring
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Maus
Aus unseren Experimenten haben wir festgestellt, dass es möglich ist, ungefähr 100-400 &mgr; l Milch einer Labormaus, hängt von mehreren Variablen zu sammeln. Diese Variablen umfassen 1) die Zeit für die Sammlung beiseite gesetzt, 2) die Dosis von Oxytocin verabreicht, 3), wie viele Jungtiere die Mutter ist derzeit Pflege und 4) die Menge der Zeit nach der Geburt. Unsere Studien haben gezeigt, dass die höchste Ausbeute erhalten wird, wenn die Dämme von ihren Nachkom.......
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Maus
Es gibt mehrere Faktoren zu berücksichtigen, wenn das Sammeln Milch von einer Maus zu machen, einschließlich 1) die Zeit, die für die Sammlung beiseite gesetzt, 2) die Dosis von Oxytocin verabreicht, 3), wie viele Jungtiere die Mutter ist derzeit Pflege und 4) die Menge der Zeit, die seit der Geburt zum Zeitpunkt der Sammlung durchlaufen hat. Mit früheren Studien als Richtlinien, machten wir uns um die Bedingungen für die Milchleistung zu optimieren.
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Die Autoren haben nichts offenzulegen.
Diese Experimente wurden durch den NIH-Zuschuss #RAI093634A finanziert. Wir danken Jenny Powers, DVM, PhD, für ihre Hilfe beim Melken von Muntjaks.
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| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Materialien— | |||
| Maus-Ketamin (KetaVed 100 mg/ml) (Dosis: 80-100 mg/kg) | MWI/Vedco | 011075 | |
| Xylazin (TranquiVed 100 mg/ml) (Dosis: 5-10 mg/kg) | MWI/Vedco | NADA 139236 | |
| Augengleitmittel | MWI/Apexa | 701013 | |
| Oxytocin (2 IE/kg) | Vet One | 501013 | |
| Materialien— Muntjac | |||
| Midazolam (1-2 mg/kg) | Amerisource Bergen Drug Corp | 924326 | Optional: Forscher können Midazolam entweder allein oder BAM-Kombination als Anästhetikum |
| verwenden Butorphanol-Tartrat (Torbugesic) (0,45 mg/kg) | Fort Dodge Animal Health | NADA 135-780 | |
| Azaperon-Tartrat (0,25 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Medetomadin HCl (0,07 mg/kg) | ZooPharm | ||
| Antipamezolhydrochlorid (Antisedan) (Dosis: 0,25 mg/kg) | Orion Corporation | NADA 141-033 | |
| Oxytocin (10 IE/kg) | Vet One | 501013 | |
| Ausrüstung— Maus | |||
| P-200 Pipetman | Gilson | F123601 | |
| 200 μ l Pipettenspitzen | Light Labs | B-2004-SH | |
| 1 ml Spritzen | MWI | 005427 | |
| 27 G Nadeln | MWI | 002031 | |
| Ausrüstung— Muntjac | |||
| 15 ml konische Röhrchen | VWR | 21008-918 | |
| 22 G Nadeln | MWI | 873 | |
| 3 ml Luer-Lock-Spritzen | MWI | 001377 |
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