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Methodenartikel

Diagnostische Ultraschall-Bildgebung der Maus Membranfunktion

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DOI:

10.3791/51290

21. April 2014

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Diagnostische Ultraschallbildgebungs hat sich als wirksam bei der Diagnose von verschiedenen Atemwegserkrankungen bei Menschen und Tieren sein. Wir zeigen eine von Dr. Zuo Labor genutzt werden, um Membran Kinetik speziell in Mausmodellen analysieren umfassende Ultraschall-Protokoll. Dies ist auch eine nicht-invasive Technik, die Forschung quantitative Informationen über Maus Atemmuskelfunktion bereitstellen kann.

Zusammenfassung

Funktionsanalyse von Nagetier Atemskelettmuskulatur, insbesondere die Membran, wird üblicherweise durch Isolierung Muskelstreifen mit invasiven chirurgischen Verfahren durchgeführt. Obwohl dies eine effektive Methode zur Beurteilung der in-vitro-Membranaktivität geht es nicht überleben Chirurgie. Die Anwendung von nicht-invasiven Ultraschallabbildung als ein in vivo-Verfahren ist vorteilhaft, da es reduziert nicht nur die Anzahl der Tiere getötet, sondern ist auch für die Überwachung der Progression der Erkrankung in lebenden Mäusen. So kann unsere Ultraschall-Bildgebungsverfahren wahrscheinlich helfen bei der Entwicklung von neuen Therapien, die Muskelverletzung von verschiedenen Erkrankungen der Atemwege hervorgerufen zu lindern. Insbesondere in der klinischen Diagnose von obstruktiver Lungenerkrankungen, hat Ultraschallbildgebungs das Potential, um in Verbindung mit anderen Standardtests, die das frühe Einsetzen der Membran Muskelermüdung zu detektieren. In dem aktuellen Protokoll beschreiben wir, wie genau zu bewerten Membran contractikeit in einem Mausmodell mit Hilfe eines diagnostischen Ultraschallbildgebungstechnik.

Einleitung

Vor kurzem haben die diagnostischen Ultraschallbildgebungstechniken, um Maus-Modellen der renovaskulärer Hypertonie und Bauchspeicheldrüsenkrebs 1,2 angewendet. Jedoch sind diese Techniken nicht in großem Umfang in Nagetier Atemmuskelfunktionstest verwendet. Deshalb haben wir einen diagnostischen Ultraschallbildgebungsverfahren ein wertvolles Werkzeug für In-vivo-Beurteilung der Längs Membran Mobilität in Mäusen entwickelt.

Es gibt mehrere Vorteile bei diagnostischen Ultraschallbildgebung. Zum Beispiel ist es nicht invasiv, sicher, tragbar und ermöglicht Echtzeitmessungen auf einen relativ niedrigen Kosten 3.

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Protokoll

Alle Verfahren, die Tierversuchspersonen wurden genehmigt und in Übereinstimmung und Einhaltung der Ohio State University Institutional Animal Care und Verwenden Committee (IACUC) Vorschriften und Richtlinien abgeschlossen.

1. Maus Anästhesie

  1. Richten Sie ein sauberes Verfahren Tisch mit einem beheizten isothermen Pad in einer chirurgischen Handtuch gewickelt. Das Heizkissen sollte zwischen 30 ° C und 34 ° C gehalten werden, um zu stabilisieren Kerntemperatur des Tieres, während die potenziellen Stress für das Tier.
  2. Platzieren Sie die Maus in einer Narkose Kammer mit den folgenden Parametern: Sauerstoffflussrate von 1,....

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Ergebnisse

Ein typisches Ultraschallbild einer Maus Membran ist in Fig. 1A gezeigt. Die Maus Membran maximale vertikale Verschiebung aufgezeichnet wurde. Dieser Abstand wurde durch genaues Messen der Tiefe der Membranbewegung von der Entspannung der Kontraktion mit der elektronischen Bremssättel, die Teil der Ultraschall-Software. Tabelle 1 zeigt diese Entfernungsmessungen von Zwerchfellkontraktionen von drei verschiedenen Mäusen berechnet. Nach der Umwandlung der Filmschleife Datei in eine MPEG-D.......

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Diskussion

Die aktuelle Versuchsprotokoll entwickelt diagnostische Ultraschallbildgebungsspezifische Membran Aktivität in einem Mausmodell-Techniken über eine nicht-invasive, In-vivo-Ansatz. Die Narkosegerät Einstellungen sind Näherungswerte, die etwas für jedes Tier eingestellt werden kann, da einzelne Mäuse können unterschiedlich auf die Anästhesie reagieren werden. Um eine unzureichende Betäubung Verwaltung zu vermeiden, ist es wichtig, der Maus die Vitalzeichen wie Herzfrequenz, Atemfrequenz und Körpertemperatur regel.......

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Offenlegungen

Die Autoren erklären, dass sie keine finanziellen Interessen konkurrieren.

Danksagungen

Diese Arbeit wird durch Zuschüsse von OU General Fund G110 und Research Excellence Fonds für Biomedizinische Forschung und OSU-Fonds HRS 013.000 unterstützt. Die Autoren möchten Lauren Chen für ihre Unterstützung bei der Erstellung dieses Manuskripts danken.

....

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Digitales Ultraschall-Bildgebungssystem für VeterinärmedizinEdanDUS 3 VETZu den Ultraschallparametern gehören: Frequenz von 6,5 MHz, Tiefe von 29 mm. Hinweis: Für dieses Protokoll kann ein gleichwertiges Ultraschallgerät verwendet werden
Mikrokonvexer Array-SchallkopfEdanC611Oder gleichwertiges
GE Logiq i Handgerät (HCU) GE HealthcareGE Logiq i Hand-Carried Unit (HCU)Oder gleichwertige
GE 12 MHz Linear-Array-SondeGE Healthcare12L-RSOder gleichwertige
Veterinär-Anästhesie-VerdampferWebster VeterinarySerial #: W422021Isofluran wurde ausschließlich mit diesem Verdampfer (oder einem gleichwertigen Gerät) verwendet. Für die Erstanästhesie wurde eine maßgeschneiderte Induktionskammer für die Anästhesie zusammengebaut. Die Erhaltungsanästhesie wurde unter Verwendung einer
Nasenkonus-Isothesie (Isofluran, USP)Butler Schein29405 250ML PVLoder einer gleichwertigen
Enviro-reinen Anästhesieabsorberdosedurchgeführt Surgivet Smiths Medical PM, Inc.Teil #: 32373B10oder gleichwertig
Ultraschall-ÜbertragungsgelHM SonicN/Aoder gleichwertig 
Puralube TierarztsalbePuralubeNDC 17033-211-38Oder gleichwertiges
isothermes Deltaphasen-PadBraintree Scientific Inc.39DPOder gleichwertig
HaarentfernerNairN/AOder gleichwertig
ElektrorasiererRemingtonHC-5015Oder gleichwertig
Chirurgisches Klebeband3M Micropore1530-1Oder gleichwertig
MullschwämmeDynarex3262Oder gleichwertig

Referenzen

  1. Snyder, C. S., et al. Complementarity of ultrasound and fluorescence imaging in an orthotopic mouse model of pancreatic cancer. BMC Cancer. 9, 106(2009).
  2. Franchi, F., et al.

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Nachdrucke und Genehmigungen

Tags

Zwerchfellkontraktilit tAtemfrequenzZwerchfellamplitudeAn sthesieverfahrenHaarentfernungUltraschallgelelektronischer MessschieberM Mode Bildgebung