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Methodenartikel

Die Analyse der Bewegung des Nauplios '

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DOI:

10.3791/51502

15. Juli 2014

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Wir verwenden optische Tracking plasmonischer Nanopartikel zu untersuchen und zu charakterisieren, die Frequenz Bewegungen von Wasserorganismen.

Zusammenfassung

Wir zeigen, wie eine optische Pinzette empfindliches Werkzeug, um die Fluid Vibrationen durch die Bewegung von kleinen Wasserorganismen erzeugt analysiert werden können. Ein einzelner Gold-Nanopartikel mit einem optischen Pinzette gehalten wird als Sensor, um die rhythmische Bewegung eines Nauplios Larve (Artemia salina) in einer Wasserprobe zu quantifizieren. Dies wird durch Überwachen der zeitabhängigen Verschiebung des eingeschlossenen Nanopartikel als Folge der Nauplios Aktivität erreicht. Eine Fourier-Analyse der Lage der die Nanopartikel ergibt dann ein Frequenzspektrum, das charakteristisch für die Bewegung der betrachteten Art ist. Dieses Experiment demonstriert die Fähigkeit dieses Verfahrens, ohne die Anforderung zu messen und zu charakterisieren, die die Aktivität von kleinen Wasser Larven, sie direkt zu beobachten und Informationen über die Position der Larven in Bezug auf die eingeschlossenen Partikel zu gewinnen. Insgesamt ist dieser Ansatz einen Einblick auf die Vitalität der bestimmte Arten in einem Wasser e gefunden geben könntecosystem und konnte den Bereich der herkömmlichen Methoden zur Analyse von Wasserproben zu erweitern.

Einleitung

Bewertung der Wasserqualität auf Basis der chemischen und biologischen Indikatoren ist von grundlegender Bedeutung, um einen Einblick auf den Zustand und Umgebungsbedingungen eines aquatischen Ökosystems 1-3 zu gewinnen. Klassische Methoden zur chemischen Wasseranalyse werden auf organoleptischen Eigenschaften oder die Bestimmung von physikalisch-chemischen Parametern. Biologische Indikatoren, auf der anderen Seite, sind Tierarten, deren Anwesenheit und Lebensfähigkeit bieten Einblick in die Umweltbedingungen und die Wirkung von Schadstoffen für ein Ökosystem, dass sie auftreten in. Typische Beispiele für Bioindikatoren sind Copepoden, eine Gruppe von klei....

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Protokoll

1. Versuchsaufbau

  1. Verwenden Sie einen aufrechten Mikroskop und eine Dunkelfeld-Ölkühler mit einer numerischen Apertur (NA) = 1.2 für Dunkelfeldbeleuchtung. Verwenden Sie ein Wasserimmersionsobjektiv mit 100-facher Vergrößerung und einem NA = 1.0 für Partikel Beobachtungen und Trapping. Verwenden Sie ein Luftziel mit 10-facher Vergrößerung und einem NA = 0,2, um die Bewegung des Nauplios folgen.
  2. Verwenden Sie eine optische Pinzette Setup mit einem 1064 nm Dauerstrich-Laser in den oben rechts Mikroskop gekoppelt. Stellen Sie die Laserleistung des optischen Falle auf 100 mW (mit einem Leistungsmesser nach dem Objektiv gemessen).
  3. Verwenden ....

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Ergebnisse

Eine schematische Darstellung des experimentellen Aufbaus ist in Fig. 1A gezeigt. Ein Dunkelfeldkonfiguration ist notwendig, um die Verschiebung eines 60 nm Goldpartikel in einer optischen Falle 15 optisch zu erfassen. Die Wellenlänge von 1064 nm für die Fanglaser wird so gewählt, um eine stabile Begrenzung der Detektor Goldteilchen 12,14 zu gewährleisten. Ein Strahlteiler, der in dem Mikroskop verwendet wird, um das Einfangen Strahl durch das Objektiv zu fokussieren und ein Kerbfi.......

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Diskussion

Dunkelfeldmikroskopie ist ein leistungsfähiges Werkzeug für die Visualisierung Gold-Nanopartikel mit Abmessungen unterhalb der optischen Beugungsgrenze, da der Streuquerschnitt der Metallnanopartikel ihrer geometrischen Querschnitt (vgl. Fig. 2A) 18 überschreitet. In einer Pinzette Setup, ermöglicht dieser Ansatz auch zu unterscheiden, ob nur einzelne oder mehrere Gold-Nanopartikel werden durch den Laserstrahl eingefangen, weil Plasmonenkopplung zwischen den Teilchen verursacht eine Rotversch.......

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Offenlegungen

Die Autoren erklären, dass sie keine finanziellen Interessen konkurrieren.

Danksagungen

Finanzielle Unterstützung durch den ERC durch die Erweiterte Investigator Grant HYMEM, von der DFG in der Nanosystems Initiative Munich (NIM) und durch den Sonderforschungsbereich (SFB1032) wird Projekt A8 dankbar anerkannt. Wir sind dankbar, dass Dr. Alexander Ohlinger, Dr. Sol Carretero-Palacios, Spa und Wellness Nedev für die Unterstützung und fruchtbare Diskussionen.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Mikroskop Zeiss Axio Scope.A1Carl Zeiss490035-0012-000Dunkelfeldbeleuchtung
Wasserobjektiv AchroplanCarl Zeiss440087100-fache Vergrößerung, NA = 1,0
Luftobjektiv EpiplanCarl Zeiss44293410-fache Vergrößerung, NA = 0,2
Dunkelfeld-ÖlkondensatorCarl Zeiss445323NA = 1,2
Cobolt Rumba CW 1.064 nm DPSSLCobolt1064-05-01-2000-5001.064 nm, CW, λ = 1.064 nm, 2 Watt, TEM00
StrahlaufweiterEdmund OpticsArt.-Nr. 1064 2-8X 64414
Hochgeschwindigkeitskamera Dimax HDPCO. Deutschland
Farbkamera Canon EOS 500 D CanonFAQ-ID: 8201395700
Kerbfilter StopLine 532/1064SemrockA11149-711265Art.-Nr. NF01-532U
Wasser 
Nauplius Artemia salina
GoldkolloidBBInternationaleCharge 13741 Durchmesser 60 nm
MQMie Version 3.2 Dr. Michael Quinten
Mathematica 8.0Wolfram
Comsol, Multiphysik 4.0 COMSOL, Inc.
, ,

Referenzen

  1. Hellawell, J. M. Biological indicators of freshwater pollution and environmental management. , Elsevier Applied Science Publishers. (1986).
  2. Diamond, J. M., Barbour, M. T., Stribling, J. B. Characterizing and comparing bioassessment approaches....

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Nachdrucke und Genehmigungen

Tags

Optische PinzettenGold Nanopartikelfluidische VibrationenFourier AnalyseParticle TrackingDunkelfeldmikroskopieWasser ImmersionsobjektivFrequenzspektrumBewegung aquatischer Organismen