Wir zeigen den Aufbau der Alkoholdampf Kammern mit leicht verfügbaren Materialien, die gleichzeitig beherbergen 6 Mäusekäfige. Wir beschreiben weiter ihre Verwendung in einem Mausmodell der fetalen Alkohol-Exposition entspricht allen 3 Trimester der Schwangerschaft beim Menschen. Dieses Paradigma macht Tieren während der Trächtigkeit und postnatalen Tag 1-12.
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Methodenartikel
Bau von Dampfkammern verwendet, um Mäuse zu Alkohol Expose Während der Equivalent aller drei Trimester der Human Development
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Alkoholexposition in der Entwicklung kann in einer Konstellation von morphologischen und Verhaltensauffälligkeiten, die kollektiv als Fetal Alcohol Spectrum Disorders (FASDs) bekannt sind, führen. Am schwersten Ende des Spektrums ist Fetale Alkoholsyndrom (FAS), gekennzeichnet durch Wachstumsverzögerung, kraniofaziale Dysmorphien und Neuropsychologische Defizite. Studien mit Tiermodellen, einschließlich Nagetiere, haben viele molekularen und zellulären Mechanismen in der Pathophysiologie beteiligt FASDs erläutert. Ethanol Verwaltung, schwanger zu Nagetieren wurde verwendet, um die Exposition des Menschen während der ersten und zweiten Trimester der Schwangerschaft zu modellieren. Dritten Trimester Ethanolkonsum bei Menschen wurde mit neonatalen Nagern modelliert. Allerdings haben einige Studien an Nagetieren die Wirkung der Ethanolexposition während der äquivalent zu allen drei Trimester der Schwangerschaft beim Menschen, ein Muster der Exposition, die häufig bei schwangeren Frauen aus. Hier zeigen wir, wie man Dampfkammern aus leicht zu bauen obtainable Materialien, die jeweils Platz für bis zu sechs Standard-Maus-Käfigen. Wir beschreiben eine Dampfkammer Paradigma, das verwendet werden kann, um Muster der Exposition gegenüber Ethanol bei minimaler Handhabung während aller drei Trimester. Unsere Studien zeigen, dass schwangere Dämme entwickelt signifikante metabolische Toleranz zu Ethanol. Allerdings hat neugeborenen Mäusen nicht entwickeln metabolischen Toleranz und die Anzahl der Föten, Gewicht Fötus, der Plazenta Gewicht, Anzahl der Jungtiere / Wurf, die Anzahl der toten Welpen / Wurf Welpen und Gewicht wurden durch Ethanolexposition nicht signifikant beeinflusst. Ein wichtiger Vorteil dieses Paradigma ist die Anwendbarkeit auf Studien mit genetisch modifizierten Mäusen. Zusätzlich minimiert dieses Paradigma Umgang mit den Tieren, eine große verwechseln in fetalen Alkohol-Forschung.
Einleitung
Trinken während der Schwangerschaft kann den Fötus schädigen, was zu anhaltenden Veränderungen in vielen Organen und Systemen, die die Lebensqualität für die betroffenen Menschen und ihre Familien deutlich verringern. Es wird geschätzt, dass ca. 10-30% der Frauen trinken während der Schwangerschaft in den USA, mit 1-8% in einer Binge drinking Muster 1,2. Die Palette der Wirkungen von Ethanolexposition während der fetalen Entwicklung hergestellt wird kollektiv als fetale Alkohol-Spektrum-Störungen (FASDs) bekannt. Aktuelle Schätzungen zeigen, dass FASDs sind ein großes Gesundheitsproblem mit einer Prävalenz so hoch wie 2-5% in den USA drei. Je sc....
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Protokoll
Alle Tier-Verfahren wurden von der Universität von New Mexico-Health Sciences Center Institutional Animal Care und Verwenden Committee genehmigt.
1. Vapor Chamber Versammlung
- Cut Polycarbonat-Platten mit einer Kreissäge oder Stichsäge auf die Abmessungen in dem Video für oben, unten, vorne, hinten, seitlich und Tür (Abbildung 1 und Tabelle 1).
- Mit einer Kreissäge oder Stichsäge, schneiden Sie eine Öffnung 8 cm hoch und 16 cm breit in der Mitte der Frontplatte.
- Messen und markieren Sie die Löcher für die Klavierband auf die 18-Zoll von 10-Zoll-Polycarbonatplatten, die die Tür....
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Ergebnisse
2A zeigt, dass sowohl schwangeren Mäusen und neonatalen Nachkommen wurden relativ stabil Ethanoldampfkonzentration in den Kammern ausgesetzt. Dies lag zwischen 4-6 g / dl. 2B zeigt die in den schwangeren Mäusen als Funktion der Zeit erreicht BECs. BECs wurden mit einem Standard-Alkohol-Dehydrogenase-Assay auf Basis 48 gemessen. Am G5, stieg schnell auf BECs ~ 60 mM 2 Stunden nach Beginn der Exposition und ihren Höhepunkt am Ende der 4 Stunden Belichtungszeit. BECs allmählich .......
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Diskussion
Hier beschreiben wir detailliert die Methoden für den Bau von Dampfinhalationskammern. Materialien und Werkzeuge erforderlich sind, um die Kammern zu bauen sind leicht von einer Reihe von kommerziellen Anbietern und die Schritte zur Konstruktion der Kammern sind relativ unkompliziert. Das System, das wir hier beschreiben keine Inline-Rückschlagventile enthalten, um den Rückfluss und Vermischung zu verhindern. Wir konnten keine nachweisbare Ethanol in der Luft zu messen nur Kammern was darauf hindeutet, dass wir keine Mi.......
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Offenlegungen
Die Autoren haben nichts zu offenbaren.
Danksagungen
Unterstützt vom National Institutes of Health gewährt R01-AA015614, AA014973-R01, T32-AA014127 und K12-GM088021. Die Autoren danken Samantha L. Blomquist für technische Unterstützung und Drs. Kevin Caldwell und Donald Partridge für das Manuskript und Video kritische Bewertung.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Polycarbonat 1/4" klar 48" x 24" | McMaster-Carr | 8574K23 | 10 |
| Moosgummi Kolbendichtung 3/8" b x 7/32" h | McMaster-Carr | 93085K67 | 10 ft |
| Anschweißen #16 | McMaster-Carr | 7515A11 | 3 |
| Klavierscharnier 12" lang | McMaster-Carr | 1658A11 | 2 x 1 ft |
| Niederhalter Standard | McMaster-Carr | 5126A26 | 8 |
| PEX Schlauch 1/2" | McMaster-Carr | 51275K88 | 10 ft |
| T-Stück mit Widerhaken (Schwarz) Stück 10 | McMaster-Carr | 5463K608 | 1 |
| Steckverschraubung mit Widerhaken (Schwarz) Stück 10 | McMaster-Carr | 5462K79 | 1 |
| Rohrverschraubung mit Widerhaken (Schwarz) Stück 10 | McMaster-Carr | 5463K596 | 1 |
| 3/8" Durchgangsadapter, Rohr auf Gewinderohr | McMaster-Carr | 5463K851 | 1 |
| Phillips Maschinenschraube 4-40 | McMaster-Carr | 91772A112 | 1 |
| Maschinenschraube Sechskantmutter 4-40 | McMaster-Carr | 90480A005 | 1 |
| Einbau-Durchflussmesser 2-20 | McMaster-Carr | 41945K76 | 3 |
| KOLBEN, FILTER 1.000 ml 6/PACK | VWR | 89001-800 | arabische Ziffer |
| Präzisionsdichtung Septen | VWR | 89084-490 | 1 |
| VWR Schwarz Gummistopfen #8 1-Loch | VWR | 59581-367 | 1 |
| ROHR TYGON R3603 3/8X9/16 50'VWR | 89068-556 | 1 | |
| ROHR TYGON R3603 1/4X11/16 50'VWR | 89068-502 | 1 | |
| Belüfterstein P2120 | VWR | 32573-007 | 1 |
| 3/8" T-Verbinder Pk von 20 | VWR | 46600-060 | 1 |
| VWR Trennschalter konisch Pk von 10 | VWR | 46600-110 | 1 |
| 3/8 Schlauch Tülle Ventil Inline-Kupplung | Colder Products Company | HFCD17612 | 1 |
| Luftpumpe mittlere Kapazität | LMI Hersteller | DB60L | 1 |
| Nexelate Drahtregal 36 "B x 24" T x 63 "H | Globale | industrielle T9A990135 | 1 |
| Vorbaurollen Set mit (4) 5" Polyurethan Rad | Global Industrie | T9A500591 | 1 |
Referenzen
- Centers for Disease Control and Prevention (CDC). World Health Organization Who. Alcohol use and binge drinking among women of childbearing age--United States. MMWR Morb Mortal Wkly Rep. 61 (28), 534-538 (2012).
- Ethen, M. K., et al.
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Nachdrucke und Genehmigungen
