Wir präsentieren ein Protokoll für die Verwendung eines Radio-Telemetrie-System, Herz-Kreislauf-Parameter in das Rückenmark durchtrennt T4 Ratten acht Wochen nach der embryonalen Hirnstamm neuronalen Stammzelltransplantation in die Läsion Website aufzuzeichnen. Telemetrie ist eine fortgeschrittene Technik, um Herz-Kreislauf-Funktion in der bewussten frei bewegenden Ratten mit Rückenmarksverletzungen genau zu bewerten.
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Methodenartikel
Ein Radio-Telemetrie-System zur Herz-Kreislauf-Funktion bei Ratten mit Rückenmarksdurchtrennung und embryonalen Neural Stem Cell Grafts überwachen
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Hoch thorakalen oder zervikalen Rückenmarksverletzungen (SCI) kann zu Herz-Kreislauf Dysfunktion führen. Herz-Kreislauf-Parameter zu überwachen, implantiert man einen Katheter mit einem Funksender in die Oberschenkelarterie von Ratten, die eine Durchtrennung des Rückenmarks T4 mit oder ohne Pfropfung von embryonalen Hirnstamm abgeleiteten neuralen Stammzellen grün fluoreszierendes Protein exprimieren, unter verbunden. Im Vergleich zu anderen Verfahren wie Kanülen-Einsteckteil oder Schwanz-Manschette ist Telemetrie vorteilhaft, den Blutdruck und die Herzfrequenz in frei beweglichen Tieren zu überwachen. Es ist auch in der Lage, Langzeit mehrerer Datenerfassungen. In Rückenmark verletzt Ratten wurden basalen Herz-Kreislauf-Daten unter ungebremst Zustand und autonome Dysreflexie in Reaktion auf kolorektale Dehnung erfolgreich registriert. Zusätzlich können kardiovaskuläre Parameter vor und nach der SCI in derselben Ratte verglichen werden, wenn ein Sender vor einer Rückenmarksdurchtrennung implantiert. Eine Einschränkung der beschriebenen Telemetry Verfahrens ist, daß die Implantation in die A. femoralis kann die Blutversorgung der ipsilateralen Hinterlauf beeinflussen.
Einleitung
Herz-Kreislauf Dysfunktion tritt nach Rückenmarksverletzungen (SCI) auf hohem Niveau. Es wird in ungeordneten Blutdruck und Herzfrequenz in Ruhe, orthostatische Hypotonie, Ausübung-induzierten Blutdruckabfall, und autonome Dysreflexie durch Episoden von Bluthochdruck und Baroreflex-vermittelten Bradykardie als Reaktion auf Sinnesreize unterhalb der Verletzungsebene 1,2 gekennzeichnet manifestiert. Diese Symptome beeinträchtigen die das tägliche Leben von Patienten mit Ruckenmark verletzt. Somit ist es wichtig, wirksame Werkzeuge zur Untersuchung von kardiovaskulären Veränderungen in Tieren mit SCI und experimentelle Behandlungen herzustellen.
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Protokoll
Alle Tier Protokolle wurden von der Institutional Animal Care und Use Committee (IACUC) zugelassen. NIH-Richtlinien für Labortierpflege und Sicherheit strikt befolgen. Tiere, die mit chirurgischen Eingriffen wurden ausreichend zur Minimierung Schmerzen und Beschwerden behandelt.
1. Rückenmark-und Zelltransplantation Curgery
- Autoklaven chirurgische Instrumente vor allen Operationen. Verwenden Hot Bead-Sterilisator (Fine Science Tools), um Krankheitserreger und mikrobielle Verunreinigungen von Instrumenten zwischen Verfahren auf verschiedene Tiere zu entfernen. Verwenden Sie sterile Handschuhe, Kittel, und Vorhänge während der Op....
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Ergebnisse
Verwendung des oben beschriebenen Telemetrietechnik haben wir erfolgreich kardiovaskulären Parameter in Rückenmark verletzten Tiere aufgezeichnet. Bei Tieren mit allein SCI, MAP wurde deutlich reduziert wohin h erhöht, naive Tiere, im Einklang mit früheren Berichten 9 verglichen. Bei Tieren mit BS-NSC Pfropfen, MAP und HR näherte Ebenen in naiven Tieren gemessen (Abbildung 2). Bei kolorektalen Dehnung wurde eine Ratte als dysreflexic angesehen, wenn die schädliche Stimulierung erzeugt einen A.......
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Diskussion
Traditionell wird ein mit Flüssigkeit gefüllter Kanüle in die Arterie eingeführt und mit einem Druckwandler verbunden ist, um Herz-Kreislauf-Parameter als Terminal Snapshot in jedem Tier 11 aufzunehmen. Kardiovaskulärer Leistung für eine lange Zeit kontinuierlich zu überwachen, werden radiotelemetrische Systeme in vielen Labors eingesetzt. Diese verfeinerte Werkzeug kann den Blutdruck in der bewussten aufzeichnen, sich frei bewegenden Tieren. Vergleich zu Kathetern Flüssigkeit gefüllt wird Telemetrie als eine.......
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Offenlegungen
Die Autoren haben nichts zu offenbaren.
Danksagungen
Die Arbeit wurde durch Zuschüsse von NIH/NINDS (NS054883), Craig H. Neilsen Foundation (280072) und der Veterans Administration und der Canadian Spinal Research Organization unterstützt. Wir danken dem Rat Resource and Research Center der University of Missouri, Columbia, Missouri, für die Bereitstellung von GFP-Ratten.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Fibrinogen (Ratte) | Sigma | F6755-25MG | 2 Std. bei 37 oC zu Dissovle |
| Thrombin (Ratte) | Sigma | T5772-100UN | Dissovle in 10 mM CaCl2 |
| 1% Terg-A-Zyme | Sigma | Z273287 | Enzymatische Lösung zur Reinigung von Telemetern |
| Fluorogold | Fluorochromel | Dissovle in destilliertem Wasser und vermeidet Licht | |
| Telemeter (PA-C40) | Data Sciences International | ||
| Telementric Aufzeichnungs- und Analysesystem | Data Sciences International | Signalstimulator, Datenaustauschmatrix, Empfänger, Umgebungsdruck-Referenzmonitor | |
| Ballonkatheter | Edward Lifesciences | 111F7-P | Für kolorektale Dehnung |
Referenzen
- Krassioukov, A. V., Furlan, J. C., Fehlings, M. G. Autonomic dysreflexia in acute spinal cord injury: an under-recognized clinical entity. J Neurotrauma. 20, 707-716 (2003).
- Lindan, R., Joiner, E., Freehafer, A. A., Hazel, C. Incidence an....
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Nachdrucke und Genehmigungen
