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Methodenartikel

Lokalisierung, Identifizierung und Exzision Murine Fettgewebe Depots

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DOI:

10.3791/52174

4. Dezember 2014

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Durch die drastische und negative Zusammenhang zwischen Fettleibigkeit und andere Begleiterkrankungen, Forschung über die Rolle Fettgewebe spielt in Krankheit und die allgemeine Gesundheit gerechtfertigt ist. Wir stellen ein Protokoll für die Isolierung und Entfernung von Fettgewebe Depots ermöglicht die Untersuchung von Fettgewebe unter Verwendung von in situ und in vitro-Verfahren.

Zusammenfassung

Fettleibigkeit hat in den letzten Jahrzehnten dramatisch zugenommen und betrifft über ein Drittel der erwachsenen US-Bevölkerung. Die wirtschaftlichen Auswirkungen von Fettleibigkeit erreichten im Jahr 2005 eine schwindelerregende Summe von 190,2 Milliarden US-Dollar allein an direkten medizinischen Kosten. Adipositas ist ein wesentlicher Risikofaktor für eine Vielzahl von Krankheiten. Historisch gesehen war wenig über Fett und seine wichtigsten und wesentlichen Funktionen im Körper bekannt. Braunes und weißes Fett sind die beiden Hauptarten von Fettgewebe, aber die aktuelle Literatur hat eine neue Art von Fett identifiziert, das als brites oder beiges Fett bezeichnet wird. Die Forschung hat gezeigt, dass Fettdepots spezifische Stoffwechselprofile aufweisen und bestimmte Depots eine Neigung zu Fettleibigkeit und anderen verwandten Erkrankungen ermöglichen. Das Ziel dieses Protokolls ist es, Forschern die Möglichkeit zu geben, Fettdepots zu identifizieren und zu entfernen, die die Analyse verschiedener faktorieller Effekte auf Fettgewebe ermöglichen. sowie die vorteilhafte oder nachteilige Rolle, die Fett für die Krankheit und die allgemeine Gesundheit spielt. Die Isolierung und Exzision von Fettdepots ermöglicht es den Untersuchern, sowohl grobe morphologische Veränderungen als auch histologische Veränderungen zu betrachten. Das isolierte Fett kann auch für molekulare Studien zur Bewertung von transkriptionellen und translationalen Veränderungen oder für In-vitro-Experimente zur Entdeckung von interessanten Zielen und Wirkmechanismen verwendet werden. Diese Technik ist anderen veröffentlichten Techniken überlegen, da das Design die Isolierung mehrerer Depots mit Einfachheit und minimaler Kontamination ermöglicht.

Einleitung

Adipöse einen bemerkenswerten Auftritt im Scheinwerferlicht der Medien, durch dramatische Zunahme Adipositas ist in den letzten Jahrzehnten des 20. Jahrhunderts. Übergewicht wirkt sich auf derzeit mehr als ein Drittel der Erwachsenen und 17% der Kinder und Jugendlichen in den Vereinigten Staaten (US) 1. Quer durch alle ethnischen Gruppen hat statistische Untersuchungen rund um die Adipositas-Epidemie gezeigt, dass nicht-hispanischen Schwarzen haben die höchste altersbereinigte Rate von Übergewicht (49,5%) im Vergleich zu Mexico-Amerikaner (40,4%) aller Hispanics (39,1%), und nicht- hispanischen Weißen (34,3%) 2. Die wirtschaftlichen Auswirkungen....

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Protokoll

HINWEIS: Alle Tierversuche wurden mit Zustimmung des Institutional Animal Care und Verwenden Committee (IACUC) von der University of Cincinnati und in Übereinstimmung mit dem Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren durch die National Institutes of Health (NIH-Veröffentlichung durchgeführt . 85-23, Revised 1996).

1. Euthanize und Sterilisieren der Maus

  1. Platzieren Sie die Maus in eine Dropbox gemacht, die einen supratheraputic Dosis von Isofluran und lassen Sie den Effekt zu inhalieren. Sobald die Maus getötet, aus dem Feld zu entfernen.
  2. Zervikal als ein zweites Mittel der Euthanasie verrücken.
  3. ....

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Ergebnisse

Identifizierung und Lokalisierung von Leisten subkutane Fettgewebe, interskapulären braunen Fettgewebe, viszerale Fettgewebe Nebenhoden (Abbildung 1) sowie den Aortenbogen perivaskulären Fettgewebe, thorakalen Aorta Fettgewebe, Neben Aorta Fettgewebe und der infrarenalen Fettgewebe (Abbildung 2) wurde erfolgreich mit Hilfe erreicht die beschriebene Operationsmethode. Die histologische Untersuchung und Differenzierung zwischen BAT und WAT Proben wurden positiv mit Hämatoxylin und Eosin (.......

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Diskussion

Übergewicht kann zu einer großen Vielzahl von Begleiterkrankungen und dem vollen Verständnis der Rolle, die adipöse spielt ist nicht vollständig geklärt führen; daher die weitere Forschung auf dem Gebiet der adipösen notwendig. Tiermodelle, insbesondere murine Modelle sind ideal für Vorlaufforschung in der Progression von Krankheiten und das Testen von potentiellen pharmazeutischen Behandlungen. Bei der Verwendung dieser Modelle ist eine genaue Trennung und Entfernung von Fettgewebedepots ein äußerst wichtiges und notwe.......

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Offenlegungen

Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen oder sonstige Interessenkonflikte haben.

Danksagungen

Die Autoren haben keine Danksagungen.

....

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
IsofluranMed-Vet International#RXISO-250
70% EthanolFisher07-678-001
DMEF-12Sigma AldrichD-6421Vor dem Anlegen des Taschentuchs im Wasserbad erwärmen.
2 ml MikrozentrifugenröhrchenMidsciMCT-200-C-S
Phosphat gepufferte KochsalzlösungSigma AldrichP5368-10PAK

Referenzen

  1. Ogden, C. L., Carroll, M. D., Kit, B. K., Flegal, K. M. Prevalence of obesity in the United States, 2009-2010. NCHS Data Brief. 82, 1-8 (2012).
  2. Flegal, K. M., Carroll, M. D., Kit, B. K., Ogden, C. L. Prevalence of obesity and trends in the distribution of body mass index....

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Nachdrucke und Genehmigungen

Schlagwörter

FettgewebeGewebeexzisionMausdissektionbraunes Fettgewebesubkutanes Fettperivaskul res Fettgewebehistologische AnalyseProteinexpressionGenexpression