Hier präsentieren wir ein Protokoll beschreibt, sauerstoffreiches ex situ Maschine Perfusion der Spenderleber Transplantate. Dieser Artikel enthält eine Schritt für Schritt-Protokoll zu beschaffen und bereiten den Lebertransplantat für Maschinendurchblutung, bereiten Sie die Perfusionsflüssigkeit, prime die Perfusion Maschine und durchzuführen, mit Sauerstoff angereicherten normothermen Maschine Perfusion des Transplantats.
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Methodenartikel
Ex-situ-normothermen Maschine Perfusion von Spenderlebern
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Im Gegensatz zu herkömmlichen statischen kalten Konservierung (0-4 ° C), kann ex situ-Perfusion Maschine eine bessere Konservierung von Spenderlebern. Kontinuierliche Perfusion von Organen die Möglichkeit bietet, Organqualität zu verbessern und ermöglicht ex situ Lebensfähigkeit Beurteilung der Spenderlebern vor der Transplantation. Dieses Video Artikel enthält eine Schritt für Schritt-Protokoll für Ex-situ-normothermen Maschine Perfusion (37 ° C) der menschlichen Spenderlebern mit einem Gerät, das einen Druck und Temperatur gesteuert pulsatile Perfusion der Leberarterie und kontinuierliche Perfusion der Pfortader stellt. Die Perfusionsflüssigkeit wird durch zwei Hohlfasermembran-Oxygenatoren mit Sauerstoff angereichert und die Temperatur zwischen 10 ° C und 37 ° C geregelt werden. Während der Perfusion kann die metabolische Aktivität in der Leber als auch der Grad der Schädigung durch die biochemische Analyse von Proben aus der Perfusionsflüssigkeit genommen beurteilt werden. Maschinendurchblutung ist ein sehr vielversprechendes Werkzeugum die Anzahl von Lebern, die zur Transplantation geeignet sind, zu erhöhen.
Einleitung
Die aktuelle Methode der Organkonservierung in Lebertransplantation ist spülen mit und anschließende Lagerung von Spenderlebern in kaltem (0-4 ° C) Konservierungsfluid (wie University of Wisconsin Lösung oder Histidin-Tryptophan-Ketoglutarat-Lösung). Dieses Verfahren wird als statisches Kühllager (SCS) bezeichnet. Obwohl die Stoffwechselrate von Lebern bei 0-4 ° C sehr gering ist, besteht immer noch die Nachfrage nach Sauerstoff 0,27 umol / min / g Lebergewebe, die bei der SCS 1 nicht bereitgestellt werden kann. Das herkömmliche Verfahren zum SCS führt daher zu einem gewissen Grad von (zusätzlichen) Verletzung des Spenderlebern. Während diese Menge an Kons....
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Protokoll
Dieses Protokoll wurde von der Medizinischen Ethikkommission (Medisch Ethische Toetsingscommissie) des University Medical Center Groningen, Niederlande zugelassen.
1. Herstellung der Perfusionsflüssigkeit
Hinweis: Das Gesamtvolumen des für normothermic Maschine Perfusion gemäß diesem Protokoll hergestellt Perfusionsflüssigkeit 2.233 ml und die gezielte Osmolarität der Perfusionsflüssigkeit 302 mOsmol / l.
- Von den Komponenten der in Tabelle 1 beschrieben Perfusionsflüssigkeit, halten Sie die menschlichen Erythrozytenkonzentrat, Frischplasma und Humanalbumin getrennt. Mischen Sie die ....
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Ergebnisse
12 menschliche Lebern, die für die Transplantation aus verschiedenen Gründen abgelehnt wurden, wurden nach dem Erhalt informierte Zustimmung für die Forschung aus Spenderfamilien verwendet. Spender-Eigenschaften sind in Tabelle 2 unter Verwendung des in diesem Dokument beschriebenen Protokoll beschrieben. Die menschlichen Spenderlebern wurden normothermically 6 h perfundiert. Die Qualität der Lebertransplantate wurden durch Überwachung der makroskopische Homogenität Leberperfusion (- D 2A)
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Diskussion
Dieses Video bietet eine Schritt für Schritt-Protokoll für normothermen Maschine Perfusion des menschlichen Spenderlebern mit einem Gerät, das druckgesteuerten Zwei Perfusion durch die Leberarterie und Pfortader ermöglicht. Während nach diesem Protokoll, habe technische Störungen der Perfusion Maschine nicht auf, und alle Transplantate waren gut perfundierten und gut mit Sauerstoff. Die Ex-situ perfundierten Lebern hatte stabile Hämodynamik und waren metabolisch aktiv, wie die Produktion von Gallenflüssigkeit <.......
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Offenlegungen
Die Autoren des Manuskripts habe keinen Interessenkonflikt offen zu legen.
Danksagungen
Diese Arbeit wurde finanziell durch Zuschüsse von Innovatief Actieprogramma Groningen (IAG-3), Jan de Cock Kornelis Stichting und Tekke Huizingafonds vorgesehen, die alle in den Niederlanden unterstützt. Wir sind dankbar für alle niederländischen Transplantation Koordinatoren für die Ermittlung der potentiellen verworfen Leber und informierte Zustimmung erhalten.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Leberunterstützung | Organ Unterstützung | OA. Li.Li.140 | Perfusionsgerät |
| Liver Assist Einwegverpackung | Organ Assist | OA. Li.DP.540 | Einweg-Set und Kanülen |
| Meredith No.8 | Vygon Nederlands B.V. | 1362082 | Gallengangskanüle |
| Humanalbumin 200 g/L / ALBUMAN | Sanquin | 15522598 | 100 ml |
| Modifizierte parenterale Ernährung | Baxter Nederland B.V. | N14G30E | 7,35 ml |
| Multivitamine zur Infusion / CERNEVIT | Baxter International Inc. | 9800927 | 7 μ l |
| Konzentrierte Spurenelemente zur Infusion / NUTRITRACE | B. Braun Melsungen AG | 14811332 | 7,35 ml |
| Metronidazol 5 mg/ml | Baxter Nederland B.V. | 98181882 | 40 ml |
| Cefazolin / SERVAZOLIN | Sandoz B.V. | 15611337 | 2 ml |
| Schnell wirkendes Insulin | verschiedener Hersteller | 20 ml | |
| Calciumglubionat, intravenöse Lösung 10%, 137,5 mg/ml | Sandoz | 97038695 | 40 ml |
| Steril H2O | Fresenius Kabi Nederland B.V. | 98084453 | 51,3 ml |
| NaCl 0,9% | Baxter Nederland B.V. | 15262510 | 160 ml |
| Heparin 5.000 IE/ml zur intravenösen Verabreichung | LEO Pharma B.V. | 98026178 | 4 ml |
| Natriumbicarbonat 8,4% | B. Braun Melsungen AG | 97973874 | Die Menge hängt vom pH-Wert |
| ab Gepackte rote Blutkörperchen (in SAGM) | Blutbank (Sanquin) | N0012000 | 750 ml |
| Frisches gefrorenes Plasma | Blutbank (Sanquin) | N04030A0/N04030B0 | 900 ml |
Referenzen
- Plaats, A., et al. Hypothermic machine preservation in liver transplantation revisited: Concepts and criteria in the new millennium. Ann. Biomed. Eng. 32 (4), 623-631 (2004).
- op den Dries, S., Sutton, M. E., Lisman, Y., Porte, R. J.
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Nachdrucke und Genehmigungen
