Die aktuelle Methode der Organkonservierung in Lebertransplantation ist spülen mit und anschließende Lagerung von Spenderlebern in kaltem (0-4 ° C) Konservierungsfluid (wie University of Wisconsin Lösung oder Histidin-Tryptophan-Ketoglutarat-Lösung). Dieses Verfahren wird als statisches Kühllager (SCS) bezeichnet. Obwohl die Stoffwechselrate von Lebern bei 0-4 ° C sehr gering ist, besteht immer noch die Nachfrage nach Sauerstoff 0,27 umol / min / g Lebergewebe, die bei der SCS 1 nicht bereitgestellt werden kann. Das herkömmliche Verfahren zum SCS führt daher zu einem gewissen Grad von (zusätzlichen) Verletzung des Spenderlebern. Während diese Menge an Konservierungsschaden ist nicht ein Problem in Spenderlebern von guter Qualität kann eine kritische und begrenzende Faktor bei suboptimalen Lebern, die bereits einen gewissen Grad der Schädigung im Spender erlitten werden. Aus diesem Grund werden Lebern mit suboptimaler Qualität oder sogenannten erweiterten Kriterien Donor (ECD) Leber zur Transplantation häufig das Risiko, o abgelehntf frühen Transplantatversagen wird als zu hoch zu sein. Hohe verzögerten Transplantatfunktion, primäre nicht-Funktion, und nicht-Anastomosen Gallengangstenosen (NAS) haben bei Empfängern von Lebern von der Spende nach dem Kreislauf Tod (DCD), ältere Spender oder Empfänger von Transplantaten steatotic 2 beschrieben. NAS sind eine Hauptursache von Morbidität und Mortalität nach einer Lebertransplantation. NAS kann in beiden extra- und intrahepatischen Gallengänge Spender auftreten und kann durch intraduktale Gallenschlamm und Guss Bildung 3,4 begleitet werden. Obwohl die Ätiologie von NAS wird gedacht multifaktoriell zu sein, hat Ischämie / Reperfusion Verletzungen der Gallengänge bei Transplantaterhaltung und Transplantation als eine wichtige zugrunde liegende Mechanismus 2,5 identifiziert. Transplantation eines DCD Transplantats wurde als einer der stärksten Risikofaktoren für die Entwicklung von NAS identifiziert. Die Kombination von einer Periode warmer Ischämie in einem DCD Donor Kaltischämiezeit während Organkonservierung und nachfolgende ReperfusionVerletzung im Empfänger gedacht für irreversible Schädigung der Gallenwege, die in Kombination mit einem schlechten regenerative Kapazität der Gallenwege, ergibt fibrotische Narbenbildung und Verengung der Gallengänge nach einer Lebertransplantation 2,5 verantwortlich. NAS wurden in bis zu 30% der Patienten, die eine Leber DCD 6-8 berichtet. Es ist deutlich geworden, dass die aktuelle Methode der SCS von Lebertransplantationen für eine Transplantation nicht ausreichend für preinjured ECD Lebern wie die von DCD Spender ist. Alternative Methoden nötig sind, um zu steigern und optimieren den Einsatz von ECD Lebern für Transplantationen.
Maschine Perfusion (MP) ist ein Verfahren zur Organkonservierung, die eine bessere Konservierung von Spenderorganen bereitstellen kann, verglichen mit SCS. MP kann zur Konservierung von Transplantaten ECD besonders relevant sein. Ein wichtiger Vorteil der MP ist die Möglichkeit, Sauerstoff an das Transplantat während der Konservierungsdauer bereitzustellen. MP kann bei verschiedenen Temperaturen durchgeführt werden,die als hypo (0-10 ° C), subnormothermic (10-36 ° C) und normothermic (36-37 ° C), MP (NMP) klassifiziert wurden. Je nach dem für MP verwendeten Temperatur, hat die Art der Perfusionsflüssigkeit angepaßt werden und mit steigender Temperatur mehr Sauerstoff zugeführt werden sollte. Die erste klinische Anwendung von MP in menschlichen Lebertransplantation wurde am hypothermen Perfusion ohne aktive Sauerstoffversorgung des Perfusionsflüssigkeit 9,10 basiert. In Tiermodellen hat hypo oxygenierten MP (0-10 ° C) wurde gezeigt, dass schützenden Wirkungen gegen Ischämie / Reperfusion von Lebertransplantationen 11 und eine bessere Konservierung des peribiliären Gefäßplexus von den Gallengängen 12 zur Verfügung zu stellen. Subnormothermic oxygenierten MP bei 20 ° C oder 30 ° C ist auch in Tiermodellen untersucht worden, und es wurde gezeigt, um eine schnellere Genesung von Transplantatfunktion DCD Lebern bereitzustellen, im Vergleich zu 13,14 SCS. Die Machbarkeit subnormothermic Sauerstoff angereichert MP menschlicher Lebern war recständig in einer Reihe von sieben verworfen menschlichen Spenderlebern 15 gemeldet. NMP (37 ° C) ist für die Beurteilung der Transplantatüberlebensfähigkeit und Funktionalität vor der Transplantation 16,17. Darüber hinaus ermöglicht die schrittweise MP Wiedererwärmung des Transplantats vor der Transplantation, die gezeigt wurde, dass die Verwertung und Wiederbelebung des Transplantats 18 zu erleichtern.
Die Perfusionsvorrichtung im aktuellen Protokolls für hepatische Perfusion Maschine verwendet ermöglicht Dual Perfusion (über die Pfortader und die Leberarterie) mit zwei Kreiselpumpen, die einen kontinuierlichen Pfortaderflusses und eine pulsierende arterielle Strömung bereitzustellen. Das System ist druckgesteuert, so dass die automatische Regulierung der Strömung durch die Leber, in Abhängigkeit von der intrahepatischen Beständigkeit. Zwei Hohlfasermembran-Oxygenatoren ermöglichen die Sauerstoffversorgung des Transplantats, als auch für die Entfernung von CO 2. Die Temperatur kann auf Basis der beabsichtigten Art der MP (Minimum temperat eingestellt werden ure von 10 ° C). Fluss, Druck und Temperatur werden auf der Vorrichtung in Echtzeit, die eine kontinuierliche Kontrolle der Perfusion Vorgangs angezeigt. Eine neue sterile Einweg-Schlauchsatz, Behälter und Oxygenatoren für die Perfusion von jedem Transplantat (Abbildung 1) zur Verfügung.
Das Ziel dieses Artikels ist es, Video eine Schritt für Schritt-Protokoll für ex situ normothermen Maschine Perfusion des menschlichen Spenderlebern mit dieser neu entwickelten Leberperfusion Maschine bereitzustellen.

Figur 1: (A) Eine schematische Zeichnung, (B) ein Foto der Perfusion Maschine (C) eine genauere Ansicht des Oxygenators, und (D) Zentrifugalpumpe zum normothermic Perfusion von menschlichem Spenderlebern verwendet.bekommen = "_ blank"> Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.