Dieses Manuskript beschreibt ein Morris Water Maze (MWM) Protokoll, das auf die Verwendung mit einem häufig verwendeten Mausmodell der Alzheimer-Krankheit zugeschnitten ist. Das MWM wird häufig in transgenen Mausmodellen eingesetzt. Die Implementierung eines Verfahrens, das empfindlich auf die Hintergrundbelastung des Mausmodells reagiert, ist für die Erkennung von Gruppenunterschieden unerlässlich.
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Methodenartikel
Morris Wasser-Labyrinth-Test: Optimierung für Mausstamm und Testumgebung
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Das Morris-Wasserlabyrinth (MWM) ist eine häufig verwendete Aufgabe zur Bewertung des hippocampusabhängigen räumlichen Lernens und Gedächtnisses in transgenen Mausmodellen für Krankheiten, einschließlich neurokognitiver Störungen wie der Alzheimer-Krankheit. Der Hintergrundstamm des verwendeten Mausmodells kann jedoch einen erheblichen Einfluss auf den beobachteten Verhaltensphänotyp haben, wobei einige Stämme im Vergleich zu anderen eine überlegene Lernfähigkeit aufweisen. Um sicherzustellen, dass Unterschiede zwischen transgen-negativen und transgen-positiven Mäusen nachgewiesen werden können, ist die Identifizierung eines Trainingsverfahrens wichtig, das empfindlich auf den Hintergrundstamm reagiert. Wenn das MWM-Protokoll nicht an die Hintergrundbelastung des Mausmodells angepasst wird, kann dies zu Unter- oder Übertraining führen, wodurch Gruppenunterschiede in Sondenversuchen maskiert werden. Hier wird ein MWM Protokoll beschrieben, das auf den Einsatz mit dem F1 FVB/N x 129S6 Hintergrund zugeschnitten ist. Dies ist ein häufig verwendeter Hintergrundstamm, um die altersabhängigen Auswirkungen von mutiertem P301L tau (rTg(TauP301L)4510 Mäuse) auf die Gedächtnisdefizite im Zusammenhang mit der Alzheimer-Krankheit zu untersuchen. Ebenfalls beschrieben wird eine Strategie zur Re-Optimierung, die von der jeweiligen verwendeten Testumgebung vorgegeben wird.
Einleitung
Transgene Mausmodelle maßgeblich bei der Bewertung der Pathophysiologie der Alzheimer-Krankheit (AD) sowie das Potential therapeutischer Maßnahmen. Kognitiven Aufgaben, wie zB die Morris-Wasserlabyrinth (MWM), sind häufig mit dieser Modelle verwendet werden, um die molekularen Korrelate von Gedächtnisstörungen zu erkennen und um die Wirksamkeit von vorklinischen Medikamente. Entscheidend ist jedoch, dass der dynamische Bereich der kognitiven Aufgabe breit genug ist, um feine Behandlungswirkungen erkennen. Mit Maus-Modellen der AD, sind kognitive Defizite in der Regel altersabhängig und Mäuse zeigen fortschreitende Rückgang der Leistung (zB 1). Ver....
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Protokoll
Alle experimentellen Verfahren wurden in Übereinstimmung mit den Standards der Institutional Animal Care und Verwenden Committee (IACUC) durchgeführt und von West Virginia University IACUC genehmigt.
1. Pre-Handhabung
- Einrichten des Pool
- Prop die Pre-Handling-Pool so dass es zu einer komfortablen Höhe angehoben wird.
- Platz 2 l Wasser (21 ° C) in der Pre-Handling-Pool auf eine Höhe von etwa 1 cm.
Hinweis: Sie fügen Färbung nicht.
- Verfahren
- Bringt die Mäuse aus dem Vivarium zu den Testraum.
- Stellen Sie sicher, das Thema Identifikation (vorbehaltlich Nummer, Schwanz ....
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Ergebnisse
Wir haben den Morris-Wasserlabyrinth verwendet, um die Wirkungen von Beta-Amyloid (Tg2576 Mäuse) und mutierten P301L tau (RTG (TauP301L) 4510-Mäuse) auf Raumbezugs Speicher (zB 1,5,7,8). Figur 3 ist zu studieren der Vertreter Ergebnis in unserer Studie berichteten Untersuchung der Wirkung von Altersdiabetes P301L-tau Ausdruck auf Lernen und Gedächtnis 8. Verwendung Testumgebung A. Um Motor und visuellen Fähigkeiten zu beurteilen, wurden die Mäuse über sichtbare Plattform T.......
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Diskussion
MWM Aufgabe wird häufig verwendet, um das Lernen und Gedächtnis zu beurteilen. Jedoch kann die Robustheit dieser Aufgabe durch viele Faktoren beeinflusst werden und benötigt die Optimierung sowohl Hintergrundstamm und Testumgebung. Wie in Abbildung 4, die gleiche Trainingsprotokoll gezeigt und angewandte visuelle Hinweise in zwei verschiedenen Testräume (äquivalente Größe und Layout) verwendet ergab signifikant unterschiedliche Sonde Leistung. Da viele Funktionen des Testraum könnte zu räumlichen Inform.......
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Offenlegungen
Die Autoren haben nichts zu offenbaren.
Danksagungen
, Das Nationale Institut für neurologische Erkrankungen und Schlaganfall - Diese Arbeit wurde von der National Institute of General Medical Sciences (U54GM104942 Reed / Engler-Chiurazzi) unterstützt (Ashe - R01NS33249, R01NS63249 und R01NS79374), Cobre (Engler-Chiurazzi - P20GM109098), der Alzheimer Association (Reed - nirgens-12-242187), ein WVU Fakultät Forschungs Senat Grant (Reed), ein WVU PSCOR Zuschuss (Reed) und internen Mitteln des WVU College of Medicine Dekanat (Engler-Chiurazzi). Der Inhalt ist allein in der Verantwortung der Autoren und nicht unbedingt die offizielle Meinung der NIH oder Alzheimer-Gesellschaft.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Viewer-Tracking-Software | Biobserve | Diese spezielle Software ist nicht erforderlich - es sind andere Tracking-Systeme verfügbar | |
| Vorbehandlungspool | Abmessungen ca. 1 Fuß breit x 2 Fuß lang x 1,5 Fuß tief | ||
| Plastikbecher | 1 L | ||
| Schaufel | |||
| Kleines Netz | |||
| Stoppuhr | |||
| Ungiftige weiße Temperafarbe | Jede Farbe kann verwendet werden; die meisten Tracking-Softwareprogramme verlangen jedoch, dass die Farbe mit der Farbe des Tieres kontrastiert. | ||
| Sichtbare Plattform | Die Farbe sollte einen Kontrast zu der des Labyrinths | ||
| Gardinenstange | |||
| Vorhänge | |||
| Runde Wanne | Normalerweise weiß; ungefähr 4 Fuß im Durchmesser | ||
| Versteckte Plattform | Lackiert in der gleichen Farbe wie das Wasser |
Referenzen
- Ramsden, M., et al. Age-dependent neurofibrillary tangle formation, neuron loss, and memory impairment in a mouse model of human tauopathy (P301L). The Journal of Neuroscience. 25, 10637-10647 (2005).
- Attar, A., et al.
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Nachdrucke und Genehmigungen
