Das Ziel dieses Protokolls ist ein Standardverfahren zu präsentieren intravenösen Glukosetoleranztests (IVGTTs) zur Durchführung der glykämischen Kontrolle bei nicht-menschlichen Primaten zu bewerten und zu beurteilen, ihre metabolischen Status von gesunden zu dysmetabolische.
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Methodenartikel
Charakterisierung von metabolischen Status in nicht-menschlichen Primaten mit der intravenösen Glukosetoleranztest
In diesem Artikel
Zusammenfassung
Zusammenfassung
Die intravenöse Glukosetoleranztest (IVGTT) spielt eine wichtige Rolle bei der Charakterisierung von Glukose-Homöostase. Zusammengenommen mit Serum biochemische Profile einschließlich der Blutglucosespiegel sowohl im fed und nüchternen Zustand, HbA1c, Insulinspiegel, der klinischen Geschichte der Ernährung, der Körperzusammensetzung und des Körpergewichts-Status, eine Beurteilung normaler und abnormaler glykämische Kontrolle vorgenommen werden können . Interpretation eines IVGTT durch Messung von Veränderungen in Glukose- und Insulinspiegel über die Zeit in Bezug auf die Dextrose Herausforderung getan. Kritische Komponenten berücksichtigt werden , sind: peak Glucose- und Insulinspiegel in Bezug auf T0 (Ende der Glukoseinfusion) erreicht hat , die Glucose - Clearance - Rate K aus der Steigung abgeleitet von schnellen Glukose - Clearance in den ersten 20 min (T1 bis T20), der Zeit , zu Glukose Basis zurückzukehren, und die Fläche unter der Kurve (AUC). Diese werden IVGTT Maßnahmen charakteristische Veränderungen wie Glukose - Homöostase bewegt sich von einem gesunden t zeigenoa erkrankten metabolischen Zustand 5. Hier werden wir die Charakterisierung von nicht-menschlichen Primaten (Rhesus und Cynomolgus-Makaken) beschreiben, die die relevantesten Tiermodell der Typ-II-Diabetes (T2D) beim Menschen und die IVGTT und klinische Profile dieser Tiere von einem mageren gesund, zu fettleibig dysmetabolische sind, und T2D Zustand 8, 10, 11.
Einleitung
Die IVGTT ist eine bequeme funktionellen Assay, der routinemßig eingesetzt wird , um die β-Zellfunktion beim Menschen bei verschiedenen metabolischen Zuständen 5, 7 zu bestimmen. In Tiermodellen von T2D ist es gut als Werkzeug erkannt Tiere zu kennzeichnen , die von metabolischen Krankheitsprogression zeigen eine gesunde zu einem dysmetabolische hyperglykämischen Zustand 8, 9. Das nächstgelegene Tiermodell der T2D ist in nicht - menschlichen Primaten (NHP) gezeigt, von denen Rhesus und Cynomolgus - Makaken bemerkenswerte Beispiele sind. Diese Tiere entwickeln natürlich T2D mit den gleichen Risikofaktoren von Alter und Adipositas beitragen zu sei....
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Protokoll
Alle Tierverfahren des David H. Murdock Research Institute IACUC auf dem North Carolina Research Campus (NCRC) gelegen genehmigt wurden, unter Protokoll 14-017, Charakterisierung eines nicht-menschlichen Primatenmodell von Diabetes und Prädiabetes / Insulin-Resistenz und Wirksamkeit von Therapeutika zu verbessern Insulinempfindlichkeit und metabolischen Funktion.
1. Tierauswahl und Studienvorbereitung
- Wählen Sie Ernährung und Gewicht stabil Tiere auf Basis von monatlichen Nahrungsaufnahme und das Körpergewicht Aufzeichnungen.
HINWEIS: Tiere, die eine jüngste Rückgang der Appetit gezeigt haben, sollte nicht gekennzeichnet....
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Ergebnisse
Die Ergebnisse sind in Abbildung 1 dargestellt sind demonstrative typischer Glukose und Insulin - Kurven aus reifen, gesunden und diabetischen Cynomolgus - Makaken im Laufe von 30 min IVGTT. Daten von gesunden und fortgeschrittener diabetischer Affen gezeigt, um die offensichtlichen Unterschiede zwischen den Tieren aus den beiden äußersten Enden des Bereichs der metabolischen Charakterisierung zu kontrastieren. Dieses IVGTT Protokoll wurde in Rhesus-Makaken mit ähnlichen.......
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Diskussion
Die IVGTT bewertet die Fähigkeit von Glukose-stimulierte Freisetzung von Insulin durch eine einzige Dextrose Infusion basierend auf dem Körpergewicht 5, 12, 13. Aus dem Test, der Nüchternblutzucker und Insulinspiegel erreicht wird , und es ermöglicht eine Beurteilung der Fähigkeit des Tieres Release Insulin und gibt die erhöhte Glukosespiegel zu den Ausgangswerten. Dies bietet dem Benutzer Informationen das Tier als eine normale Glucose und Insulinspiegel gesunden Kontrolle wurde ein hyperinsulinemic dysmetab.......
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Offenlegungen
Die Autoren sind mit einem Auftragsforschungsinstitut (Crown Bioscience) aktiv auf dem Gebiet der Stoffwechselerkrankungen assoziiert.
Danksagungen
Die Autoren möchten die starke Unterstützung der DHMRI CLAS Tierpflegepersonal, Facility Manager Herr Daniel Peralta und behandelnde Tierarzt, Dr. Glicerio Ignacio, DVM MRCVS anzuerkennen.
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Materialien
| Name | Unternehmen | Katalognummer | Kommentare |
|---|---|---|---|
| Allegra X-15R Zentrifuge | Plasma: 4 ° C bei 3.000 U/min für 10 min | ||
| Sorvall ST16R Zentrifugenserum | : 22 ° C bei 3.000 U/min für 10 min | ||
| Thermo Scientific -86 ° C Gefrierschrank, Forma 88000 Serie | Modell: 88500A | ||
| Dextrose 50% (D50) | Webster | 07-8008986 | I.V. Glukoseinfusat |
| 3 ml Luer-Lock-Spritze | Midwest Veterinary Suppy | serielle Blutabnahme | |
| 5 ml Luer-Lock-Spritze | Midwest Veterinary Suppy | heparinisierte Kochsalzlösung | |
| Spülung 10 ml Luer-Lock-Spritze | Midwest Veterinary Suppy | Lieferung von I.V. D50 | |
| Mullschwämmen 2 x 2 | Midwest Veterinary Suppy | 366.23000.4 | Gebraucht Trocken, mit 70% Alkohol und 2% Chlorohex Lösung |
| 4 ml Serum-Separator-Röhrchen | Midwest Veterinary Supply | 366.45000.4 | Blutentnahmeröhrchen für Superchem Panel |
| K2EDTA, 2 ml | VWR | 95057-239 | Blutentnahmeröhrchen |
| Aprotinin, 100 mg | Sigma | A1153-100MG | Blutentnahmeröhrchen Proteasezusatz |
| 22 G x 1" Katheter | Midwest Veterinary Suppy | 193.75250.2 | I.V. Katheter |
| Injektionsstopfen mit Kappe | Midwest Veterinary Suppy | 001.11500.2 | %50 Dextrose-Infusionsanschluss |
| Porus Tape, 1/2" x 10 yd | Midwest Veterinary Suppy | 001.85000.2 | halten die Haftung von Kathetern und Hep aufrecht. Schlösser |
| Chlorhexidin Lösung 2% | Midwest Veterinary Suppy | 193.08855.3 | Vorbereitung Katheterstelle |
| 70% Ethanol | VWR | 71001-654 | Vorbereitung Katheterstelle |
| Tourniquet | Webster | 07-8003432 | |
| 3-Wege Absperrhahn | Midwest Veterinary Supply | 366.28510.4 | Hep. Schloss |
| 37" Erweiterungsset | Webster | 07-8454200 | Hep. Lock |
| Exel 50-60cc LL Spritzen | Midwest Veterinary Suppy | 001.12250.2 | Heparinisierte Kochsalzlösung Spülung |
| 250 ml Beutel 0,9% Kochsalzlösung | Webster | 07-8365593 | Spülung |
| 1.000 U Heparin, 10 ml | Webster | 07-883-4916 | |
| Ketamin (Ketaset) 100 mg/ml | Fort Dodge | (AV bestellt) | |
| Precision Xtra Glukoseteststreifen 50/bx | Abbott (American Diabetes Wholesale) | 9381599728K7 | Test Baseline/T3 Blutzuckerspiegel |
| Masimo Rad 57 | DRE | 6052057V | Pulsoximeter |
| Pavia Rektalthermometer | Patterson | 07-8391335 | |
| Precision Xtra Blutzuckermessgerät | Abbott | 9381599728K7 | Handheld-Blutzuckermessgerät |
Referenzen
- Bergman, R., Phillips, L., Cobelli, C. Physiologic evaluation of factors controlling glucose tolerance in man. J. Clin. Invest. 68, 1456-1457 (1981).
- Bergman, R., Prager, R., Volund, A., Olefsky, J. M. Equivalence of the insulin....
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Nachdrucke und Genehmigungen
