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Research Article
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Erratum Notice
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Retraction Notice
The article Assisted Selection of Biomarkers by Linear Discriminant Analysis Effect Size (LEfSe) in Microbiome Data (10.3791/61715) has been retracted by the journal upon the authors' request due to a conflict regarding the data and methodology. View Retraction Notice
Wir präsentieren ein Protokoll zur Beurteilung von Veränderungen in der neuromuskulären Funktion. Die perkutane elektrische Nervenstimulation ist eine nicht-invasive Methode, die muskuläre Reaktionen hervorruft. Die elektrophysiologischen und mechanischen Eigenschaften dieser Reaktionen ermöglichen die Bewertung der neuromuskulären Funktion vom Gehirn bis zum Muskel (supraspinale, spinale und periphere Ebene).
Perkutane elektrische Nervenstimulation ist eine nicht-invasive Methode, die häufig zur Bewertung der neuromuskulären Funktion vom Gehirn bis zum Muskel (supraspinale, spinale und periphere Ebene) verwendet wird. Das vorliegende Protokoll beschreibt, wie diese Methode zur Stimulation des Nervus tibialis posterior verwendet werden kann, der die Plantarbeugemuskulatur aktiviert. Die perkutane elektrische Nervenstimulation besteht darin, einen elektrischen Reiz an einen motorischen Nerv zu induzieren, um eine Muskelreaktion hervorzurufen. Direkte (M-Welle) und/oder indirekte (H-Reflex) elektrophysiologische Reaktionen können in Ruhe mit Hilfe der Oberflächen-Elektromyographie aufgezeichnet werden. Mechanische Reaktionen (Zucken des Drehmoments) können mit einem Kraft-Momenten-Ergometer quantifiziert werden. Die M-Welle und das Twitch-Drehmoment spiegeln die neuromuskuläre Übertragung und die Erregungs-Kontraktions-Kopplung wider, während der H-Reflex einen Index für die Erregbarkeit der Wirbelsäule liefert. Die EMG-Aktivität und mechanische (überlagerte Zuckungen) Reaktionen können auch während der maximalen willkürlichen Kontraktionen aufgezeichnet werden, um das Niveau der willkürlichen Aktivierung zu bewerten. Die perkutane Nervenstimulation ermöglicht eine Beurteilung der neuromuskulären Funktion beim Menschen und ist insbesondere für Studien zur Bewertung der neuromuskulären Plastizität nach akutem (Müdigkeit) oder chronischem (Training/Detraining) Training von großem Nutzen.
Perkutane elektrische Nervenstimulation wird weithin verwendet, um die neuromuskuläre Funktion 1 zu bewerten. Das Grundprinzip besteht aus Induktion einer elektrischen Stimulus zu einer peripheren motorischen Nerven, um eine Muskelkontraktion hervorzurufen. Mechanische (Drehmomentmessung) und elektrophysiologische (elektromyographische Aktivität) Reaktionen werden gleichzeitig aufgezeichnet. Drehmoment an der betrachteten gemeinsame aufgezeichnet ist, wird unter Verwendung eines Ergometers bewertet. Elektromyographischen (EMG) Signal aufgezeichnet unter Verwendung von Oberflächenelektroden wurde gezeigt, dass die Aktivität des Muskels 2 stellen. Diese nicht-invasive Methode ist nicht schmerzhaft und leichter als intramuskuläre Aufnahmen realisiert. Sowohl monopolare als auch bipolare Elektroden verwendet werden. Die monopolaren Elektrodenkonfiguration wurde gezeigt empfindlicher auf Änderungen der Muskeltätigkeit 3, die kleine Muskeln nützlich sein kann ist. Jedoch haben bipolare Elektroden gezeigt wirksamer bei der Verbesserung des Signal-Rausch-r zu seintio 4 und werden am häufigsten als ein Verfahren zum Aufzeichnen und zur Quantifizierung Motoreinheit Aktivität verwendet. Die nachfolgend beschriebene Methodik wird auf bipolare Aufnahmen konzentrieren. EMG-Aktivität ein Indikator für die Wirksamkeit und die Integrität des neuromuskulären Systems. Die Verwendung von perkutanen Nervenstimulation bietet weitere Einblicke in die neuromuskuläre Funktion, dh Änderungen an Muskel-, Wirbelsäulen oder supra spinaler Ebene (Abbildung 1).

Abb. 1: Übersicht über die neuromuskuläre Messungen STIM: Nervenstimulation. EMG: Elektromyographie. VAL: Freiwillige Aktivierungsniveau. RMS: Root Mean Square. M max: Maximal M-Wellen-Amplitude.
Im Ruhezustand wird die Verbindung Muskelaktionspotential, auch als M-Welle, ist die kurze Latenzzeiten Reaktion nach Reizartefakt beobachtet und stellt erregbaren Muskelmasse durch die direkte activ ation von Motoraxonen die zur Muskel (Abbildung 2, Nummer 3). M-Wellenamplitude steigt mit der Intensität bis zum Erreichen einer Hochebene von seinem Maximalwert. Diese Antwort, die so genannte M max, stellt die Synchron Summierung aller unter den Oberflächen-EMG-Elektroden 5 aufgezeichneten Motoreinheiten und / oder Muskelfaser Aktionspotentiale. Die Entwicklung der Spitze-zu-Spitze-Amplitude oder Wellenbereich verwendet wird, um Änderungen der neuromuskulären Transmission 6 identifizieren. Veränderungen der mechanischen Reaktionen mit dem M-Welle, dh Spitzen Zucken Drehmoment / Kraft, verbunden sind, können aufgrund von Veränderungen im Muskel Erregbarkeit und / oder innerhalb der Muskelfasern 7 sein. Die Assoziation von M max Amplitude und Spitzen Zucken Drehmomentamplitude (Pt / M-Verhältnis) liefert einen Index von elektromechanischen Wirkungsgrad des Muskel 8, dh mechanische Reaktion für eine gegebene elektrische Motorbefehl.
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Abb. 2: Motor und reflexive Pfade durch Nervenstimulation aktiviert elektrische Stimulation eines gemischten (Motor / sensorische) Nerven (STIM) induziert eine Depolarisation der beiden Motor Axon und Ia afferenten Brand. Depolarisation Ia Afferenzen Richtung des Rückenmarks aktiviert ein alpha Motoneuronen, die wiederum ruft eine H-Reflex-Reaktion (Bahn 1 + 2 + 3). In Abhängigkeit von der Reizstärke, Motor Axon Depolarisation evoziert eine direkte muskuläre Antwort: M-Welle (Weg 3). Bei maximaler M-Wellenintensität wird ein antidrome Strom auch generiert (3 ') und kollidiert mit Reflex volley (2). Diese Kollision teilweise oder vollständig bricht den H-Reflex auf.
Der H-Reflex ist eine elektrophysiologische Reaktion verwendet, um Veränderungen in der Ia-α Motoneuron Synapse 9 beurteilen. Dieser Parameter kann im Ruhezustand oder während der freiwilligen Kontraktionen bewertet werden. H-Reflex stellt eine Variante des Dehnungsreflex (Abbildung 2, number 1-3). Der H-Reflex aktiviert Motoreinheiten monosynaptisch von Ia afferente Bahnen 10,11 rekrutiert, und kann eine periphere und zentrale Einflüsse 12 unterzogen werden. Das Verfahren erinnert an einen H-Reflex ist bekannt, dass eine hohe intraindividuelle Zuverlässigkeit Rücken Erregbarkeit in Ruhe 13,14 und während isometrische Kontraktionen 15 zu beurteilen haben.
Während einer willkürlichen Kontraktion, kann der Betrag der freiwilligen neuronalen Antrieb mit der Amplitude des EMG-Signals beurteilt werden, mit Hilfe der Root Mean Square Allgemeinen quantifiziert (RMS). RMS-EMG wird häufig verwendet, ein Mittel zur Quantifizierung der Erregung des Motorsystems während einer willkürlichen Kontraktion (Abbildung 1). Wegen der intra- und interindividuelle Variabilität 16 hat RMS EMG zur Verwendung der EMG während eines muskelspezifischen maximalen willkürlichen Kontraktion (RMS EMGmax) aufgezeichnet normalisiert werden. Darüber hinaus, weil Änderungen in EMG-Signal be aufgrund von Veränderungen am peripheren Ebene, die Normalisierung unter Verwendung eines peripheren Parameter, wie beispielsweise M-Welle erforderlich ist, um nur die zentrale Komponente des EMG-Signals zu beurteilen. Dies kann durch Dividieren der RMS-EMG durch die maximale Amplitude oder der Effektivwert Mmax der M-Welle durchgeführt werden. Normalisierung mit RMS Mmax (dh RMS EMG / RMS Mmax) ist die bevorzugte Methode, da sie berücksichtigt die mögliche Änderung der M-Wellendauer 17.
Motor Befehle können auch durch die Berechnung der freiwilligen Aktivierungsniveau (VAL) ausgewertet werden. Diese Methode verwendet das Zucken Interpolationstechnik 18 durch Überlagerung einer elektrischen Stimulation an M max Intensität während einer maximalen willkürlichen Kontraktion. Das zusätzliche Drehmoment durch die Stimulierung der Nerven hervorgerufen wird, um eine gleich Nervenstimulation in entspannter potenziert Muskel 19 erzeugte Kontrollzuckungsstärke verglichen. Um maximale VAL, das ursprüngliche Zucken interpo bewertenvon Merton 18 beschrieben lation Technik beinhaltet einen einzelnen Stimulus über einen willkürlichen Kontraktion interpoliert. Kürzlich wurde die Verwendung von paarweisen Stimulation immer beliebter geworden, da die hervorgerufenen Drehmoment Inkrementen größer sind, leichter erkannt und weniger variabel gegenüber dem Einzelstimulationsantworten 20. VAL liefert einen Index der Leistungsfähigkeit des Zentralnervensystems bis maximal aktivieren die arbeitenden Muskeln 21. Derzeit VAL ausgewertet mit dem Zucken Interpolationstechnik ist das wertvollste Methode zur Beurteilung der Höhe der Muskelaktivierung 22. Darüber hinaus ist das maximale Drehmoment beurteilt Verwendung eines Ergometers die richtig studiert Festigkeitsprüfung Parameter erhoben der Einsatz in Forschung und klinischen Einrichtungen 23.
Elektrische Nervenstimulation kann in einer Vielzahl von Muskelgruppen (zB Ellbogenbeuger, Handgelenk Flexoren, Kniestrecker, Plantarflexoren) verwendet werden. Allerdings macht Nerven Zugänglichkeit derTechnik schwierig in einigen Muskelgruppen. Die Plantarflexoren, insbesondere Triceps surae (soleus und gastrocnemii) Muskeln, werden häufig in der Literatur 24 untersucht. In der Tat sind diese Muskeln in der Fortbewegung beteiligt sind, rechtfertigt ihre besonderen Interesse. Der Abstand zwischen den Stimulationsstelle und Aufzeichnungselektroden erlaubt die Identifizierung der verschiedenen hervorgerufenen Wellen des Triceps surae Muskeln. Die oberflächliche Teil des N. tibialis posterior in der Kniekehle und die große Anzahl von Spindeln erleichtern die Reflexreaktionen im Vergleich zu anderen Muskeln 24 aufzuzeichnen. Aus diesen Gründen konzentriert sich die aktuell präsentierten Reflex Methodik auf der Triceps surae Gruppe von Muskeln (soleus und gastrocnemius). Das Ziel des Protokolls ist es daher, perkutan Nervenstimulationstechnik zu beschreiben, die neuromuskuläre Funktion im Trizeps Surae untersuchen.
Die experimentellen Verfahren umrissen erhalten Institutional ethischen Zulassung und stehen im Einklang mit der Deklaration von Helsinki. Die Daten wurden von einem Vertreter Teilnehmer, der Kenntnis von den Verfahren war und gab sein schriftliches Einverständnis gesammelt.
1. Instrumentenaufbereitung

Abb. 3: Versuchsaufbau Klassische Versuchsaufbau Elektromyographie (EMG) und Drehmoment-Signale zu erfassen.
2. Prüfverfahren im Ruhezustand
3. Prüfverfahren Während willkürlichen Kontraktion
4. Datenanalyse

Abbildung 4: Erläuterung der elektrophysiologische und mechanische Reaktionen (A) Messung der Spitze-zu-Spitze-Amplitude (mV), Latenz (ms) und die Fläche (mV.ms) eines typischen M-Welle.. (B) Messung der Peak-twitch Drehmoment (Nm), Kontraktionszeit (ms) und die Halb Relaxationszeit (msec) eines Zucken. 


Figur 5: Messung überlagert undpotenziert Wams auf mechanisches Signal. Um das überlagerte Spitzendrehmoment (PTS) aufnehmen, wird die Stimulation Wams während der Hochebene von isometrischen Maximal willkürlichen Kontraktion (MVC) hervorgerufen. Um potenzierten Spitzendrehmoment (Pt P) aufzunehmen, wird die Stimulation Wams in Ruhe nach dem Offset von MVC hervorgerufen.
Zunehmender Reizstärke führt zu einer unterschiedlichen Entwicklung der Reaktionsamplituden zwischen H- und M-Wellen. Im Ruhezustand einen Maximalwert erreicht die H-Reflex, bevor sie von EMG-Signal völlig abwesend, während M Wellen schrittweise bis zum Erreichen einer Hochebene auf maximale Intensität erhöht (siehe Abbildung 4 eine graphische Darstellung der M-Welle und 6 für die Evolution der M-Wellen und H-Reflex mit Intensität). Für M. soleus, ist die Latenz zwischen dem Reizbeginn und M-Welle etwa 10 msec (4A) und in der Regel zwischen 25 und 40 ms für die H-Welle. Jedoch wird die Verzögerung zwischen den Muskelgruppen und des Subjekts Schenkellänge oder Gesamthöhe aufgrund der Entfernung zwischen der Stimulationsstelle und den Muskel zu variieren. Bei Stimulierung bei M-max Intensität wird eine maximale Spitzendrehmoment Zucken zu beachten (4B). M-Wellen, H-Reflexe und Spitzen Zucken Drehmomente in Abhängigkeit von dem abweichen Zustand. Zum Beispiel neigen diese Parameter während der willkürlichen Kontraktion zu erhöhen und zu verringern, in Gegenwart von Ermüdungs 17.

Abbildung 6: Typische Rekrutierungskurven in Ruhe Amplituden der Reflexantworten (H-Reflex, weiße runde) und direkte Muskelreaktionen (M-Welle, schwarze runde) mit zunehmender Reizstärke.. Bodenplatten präsentieren typische Spuren an vier progressiv erhöht Intensitäten (von A nach B). (A) schwache Intensität und erinnert nur eine H-Reflexantwort. (B) Intensity Bereitstellung der maximalen H-Wellen-Amplitude (H max). (C) Bei Intensität, die H max, die Kollision zwischen antidromic und Reflex Salven induziert eine Abnahme der H Antwortamplitude. (D) Bei M max Intensität, wird H-Reflex völlig aufgehoben und M-Welle ein Plateau erreicht.iles / ftp_upload / 52.974 / 52974fig6highres.jpg "target =" _ blank "> Bitte klicken Sie hier, um eine größere Version dieser Figur zu sehen.
Maximale VAL während einer MVC ausgewertet. 5 zeigt eine überlagerte Drehmoment durch elektrische Reizung während der MVC induziert. Die Wirkung durch Stimulation induzierte ein unvollständiges Einstellung von Motoreinheiten und / oder einer submaximalen Entladungsfrequenz der Motoreinheiten, und somit ein Defizit an freiwilligen Aktivierung (den Effekt der Stimulation in der Mitte der Abbildung 5). Wie frühere Parameter variiert maximale VAL unter der Bedingung (zB Höhe der Kontraktion, Müdigkeit) 21 je.
Diese verschiedenen Techniken wurden zuvor validiert. In der Tat zeigten die jüngsten Studien eine gute Zuverlässigkeit für M-Welle und die zugehörige Spitzen Zucken Drehmoment 22, H-Reflex-14 und maximal 41 VAL.
Die Autoren haben nichts offenzulegen.
Wir präsentieren ein Protokoll zur Beurteilung von Veränderungen in der neuromuskulären Funktion. Die perkutane elektrische Nervenstimulation ist eine nicht-invasive Methode, die muskuläre Reaktionen hervorruft. Die elektrophysiologischen und mechanischen Eigenschaften dieser Reaktionen ermöglichen die Bewertung der neuromuskulären Funktion vom Gehirn bis zum Muskel (supraspinale, spinale und periphere Ebene).
Die Autoren haben keine Danksagungen.
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