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Methodenartikel

Kombinierte Shuttle-Box-Training mit Elektrophysiologische Cortex Ableitung und Stimulation als ein Instrument zur Wahrnehmung und Lernen Studie

10K Aufrufe

DOI:

10.3791/53002

22. Oktober 2015

* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Shuttle-box Vermeidung Lernen wird in Behavioral Neuroscience etablierte. Dieses Protokoll beschreibt, wie Shuttle-Box-Lernen bei Nagetieren mit ortsspezifischen elektrischen intracortical Mikrostimulation (ICMS) und gleichzeitige chronische in vivo-Aufnahmen als Werkzeug, um mehrere Aspekte des Lernens und Wahrnehmung studieren kombiniert werden.

Zusammenfassung

Shuttle-box Vermeidung Lernen ist ein etabliertes Verfahren in der Verhaltensneurowissenschaften und Versuchsaufbauten waren traditionell nach Maß; die notwendige Ausrüstung ist nun durch mehrere Handelsunternehmen zur Verfügung. Dieses Protokoll enthält eine detaillierte Beschreibung eines Zwei-Wege-Shuttle-Box-Vermeidungslernparadigma in Nagetieren (hier Mongolische Rennmäuse; Meriones unguiculatus) in Kombination mit ortsspezifischen elektrischen intrakortikale Mikrostimulation (ICMS) und gleichzeitiger chronisch elektrophysiologische in-vivo-Aufnahmen. Die ausführliche Protokoll ist auf mehrere Aspekte der Lernverhalten und die Wahrnehmung in verschiedenen Nagetierarten zu studieren.

Standortspezifische ICMS auditiver kortikalen Schaltkreisen als konditionierte Stimuli hier als Werkzeug, um die Wahrnehmungs Relevanz von bestimmten afferenten, abführenden und intrakortikale Verbindungen testen. Verschiedene Aktivierungsmuster können durch die Verwendung verschiedener Stimulationselektrode arr hervorgerufen werdenays für die lokale, Schicht abhängige ICMS oder entfernte ICMS Websites. Verwendung Verhaltenssignalerkennungsanalyse festgestellt werden kann, die Stimulationsstrategie ist am wirksamsten zum Hervorrufen einer behaviorally nachweisbar und der Schenkelsignals. Ferner parallelen Mehrkanal-Aufnahmen mit unterschiedlichen Elektrodenkonstruktionen (Oberflächenelektroden, Tiefenelektroden, etc.) zu ermöglichen für die Untersuchung der neuronalen Observablen über den Zeitverlauf eines solchen Lernprozessen. Es wird diskutiert werden, wie sich Änderungen der Verhaltens Design kann die kognitive Komplexität zu erhöhen (zB Erkennung, Diskriminierung, Umkehr Lernen).

Einleitung

Ein grundlegendes Ziel der Behavioral Neuroscience ist es, spezifische Verbindungen zwischen neuronalen strukturellen und funktionellen Eigenschaften, Lernen und Wahrnehmung zu etablieren. Neuronale Aktivität mit der Wahrnehmung und Lernen verbunden sind, können durch elektrophysiologische Ableitung von Aktionspotentialen und lokaler Feldpotentiale in verschiedenen Hirnstrukturen an mehreren Stellen untersucht werden. In der Erwägung, elektrophysiologischen Ableitungen bieten korrelative Zusammenhänge zwischen neuronaler Aktivität und Verhalten, hat direkte elektrische Mikrostimulation intrakortikale (ICMS) seit über einem Jahrhundert war die direkte....

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Protokoll

Alle Experimente in dieser Arbeit vorgestellt wurden in Übereinstimmung mit den ethischen Standards durch das deutsche Recht für den Schutz von Versuchstieren festgelegt durchgeführt. Die Experimente wurden von der Ethikkommission des Landes Sachsen-Anhalt genehmigt.

1. Maßgeschneiderte Multichannel-Elektroden-Arrays für Mikrostimulation und Recording

  1. Maßgeschneiderte Mikrostimulation Array
    1. Für die Bereitstellung von ICMS, bereiten Stimulationselektroden in der gewünschten Raumgestaltung (hier seitliche Anordnung von 2 Kanäle) mit 3-cm lang Teflon isolierten Edelstahldrähte (Ø mit Isolation = 50 um). Siehe

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Ergebnisse

Dieser Abschnitt zeigt ein repräsentatives Beispiel der Shuttle-Box-Lernen in einer Wüstenrennmaus. Das Thema wurde geschult, um zu unterscheiden das ICMS Website zwischen zwei Stimulationselektroden implantiert 700 um voneinander im auditorischen Cortex (Abbildungen 1 und 2). Stimulation Arrays können in unterschiedlichen räumlichen Designs (Abbildung 1) angepasst werden. Hier wurde der Diskriminierung der beiden ICMS-Websites innerhalb von 3 Trainingseinheiten mit Dar.......

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Diskussion

Dieses Protokoll beschreibt ein Verfahren zur gleichzeitigen ortsspezifische ICMS und Mehrkanal-elektrophysiologischen Ableitungen in einem Lern ​​Tier mit Hilfe eines Zwei-Wege-aversiven Fuß-Schock-gesteuerten Shuttle-Box-System. Das Protokoll betont technischen Schlüsselbegriffe für eine solche Kombination und weist darauf hin, wie wichtig die Erdung des Tieres nur über seinen gemeinsamen Masseelektrode, so dass die gridfloor mit variabler Spannung. Hier wurde Gehör Shuttle-box Lernen Mongolische Rennmäuse angewendet .......

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Offenlegungen

Die Autoren haben nichts zu offenbaren.

Danksagungen

Die Arbeit wurde durch Zuschüsse aus dem Deustche Forschungsgemeinschaft DFG und dem Leibniz-Institut für Neurobiologie unterstützt. Wir danken Maria-Marina Zempeltzi und Kathrin Ohl für die technische Unterstützung.

....

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Teflonisolierter EdelstahldrahtCalifornia Fine WireØ 50µ m mit Isolierung
Pin-Steckverbinder-System Molex Holding GmbH510470200PicoBlade TEM Raster 1,25 mm
Raster QuantifoilScience ServicesEQ225-N27
Dentalacryl PaladurHeraeus Kulzer64707938
Handbohrmaschine OmniDrill35WPI 
Ketamin 500mg/10mlRatiopharm GmbH7538837
Rompun 2%, 25mlBayer Vital GmbH5066.0
Natrium-Chlorid 0,9%, 10mlB.Braun AG 
Gleitgel KY-JellyJohnson & & Johnson
Shuttle-box E10-E15Coulbourn InstrumentsH10-11M-SC
Stimulusgenerator MCS STG 2000Mehrkanalsysteme
Plexon Kopfbühnenkabel 32V-G20Plexon Inc.HSC/32V-G20
Plexon Kopfstufe  32V-G20Plexon Inc.HST/32V-G20
PBX Vorverstärker 32 KanälePlexon Inc.32PBX Box
Mehrkanal-ErfassungssystemPlexon Inc.MAP 32/HLK2
Kryostate CM3050 SLeica Microsystems GmbH
Signalverarbeitungskarte Ni-DaqNational Instruments
Lab StandardTM Stereotaxic InstrumentsStoelting Co. 
Audio-Abschwächer g.pahg.pah Guger technologies
Cresyl violet acetateRoth GmbH7651.2
Roticlear Roth GmbHA538.1
Natriumacetat-TrihydratRoth GmbH6779.1
Kaliumhexacyanoferrat(II)-trihydratRoth GmbH7974.2
Dinatriumhydrogenphospaht-DihydratMerck1.065.801.000
ICM-ImpedanzkonditionierungsmodulFHC55-70-0
TiertemperaturreglerWorld Precision InstrumentsATC2000
503599PRID00000772

Referenzen

  1. Cohen, M. R., Newsome, W. T. What electrical microstimulation has revealed about the neural basis of cognition. Current Opinion in Neurobiology. 14 (2), 169-177 (2004).
  2. Histed, M. H., Bonin, V., Reid, R. C. Direct acti....

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Nachdrucke und Genehmigungen

Tags

Intrakortikale Mikrostimulationauditorischer KortexZwei-Wege-Vermeidungslernenbehaviorale SignaldetektionMultielektroden-Arraysortsspezifische Stimulationneuronale MassenwirkungAnalyse des Lernverhaltens