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Methodenartikel

Bedingungen, die sozialen Raum, in

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DOI:

10.3791/53242

⸱

5. November 2015

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Biology, University of Western Ontario, 2Department of Biology, York College/CUNY, 3Department of Entomology, Cornell University

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Die Wirkung von Genen und Umwelt auf den sozialen Raum von Drosophila melanogaster kann durch ein leistungsfähiges, aber einfaches analytisches Paradigma quantifiziert werden. Wir zeigen hier verschiedene Faktoren, die diesen sozialen Raum beeinflussen können und daher bei der Gestaltung von Experimenten in diesem Paradigma berücksichtigt werden müssen.

Zusammenfassung

Die hier beschriebene sozialen Raum Test kann verwendet werden, um soziale Interaktionen von Drosophila melanogaste r quantifizieren - oder andere kleine Insekten - auf einfache Weise. Wie wir früher gezeigt 1, in einem zweidimensionalen Raum, wir zuerst zwingen die entfernt, um eine feste Gruppe zu bilden, anschließend so ihre bevorzugte Abstand voneinander einnehmen. Nachdem die Fliegen angesiedelt haben, messen wir den Abstand zum nächsten Nachbarn (oder sozialer Raum), die Verarbeitung ein statisches Bild mit kostenlosen Online-Software (ImageJ). Die Analyse der Abstand zum nächsten Nachbarn ermöglicht es den Forschern, die Auswirkungen der genetischen und Umweltfaktoren auf die soziale Interaktion zu bestimmen, bei der Kontrolle für potenzielle Störfaktoren. Diverse Faktoren wie Steigfähigkeit, Tageszeit, Geschlecht und Anzahl der Fliegen, können soziale Abstand von Fliegen zu ändern. Wir schlagen daher vor, eine Reihe von experimentellen Kontrollen, diese verwirrende Auswirkungen zu mildern. Dieser Test kannfür wenigstens zwei Zwecke verwendet werden. Erstens können die Forscher bestimmen, wie ihre Lieblingsklimaverschiebung (wie Isolation, Temperatur, Spannung oder Toxine) werden soziale Abstand 1,2 auswirken. Zweitens können die Forscher die genetischen und neuronalen Grundlagen von dieser Grundform des Sozialverhaltens 1,3 zu sezieren. Insbesondere haben wir es als ein diagnostisches Werkzeug, um die Rolle von orthologen Genen vermutlich im Sozialverhalten in anderen Organismen, wie zum Beispiel Kandidatengene für Autismus bei Menschen 4 einbezogen werden studieren.

Einleitung

Soziale Interaktionen sind entscheidend für die richtige Entwicklung und Gesundheit von Personen innerhalb einer Gruppe als Ganzes, und kann auf zahlreiche Arten von Menschen (Homo sapiens) zu einfacheren Organismen wie Fruchtfliegen (Drosophila melanogaster) 5,6 beobachtet werden. Akustische, visuelle, Geruchs-, Tast- oder gustation: Eine individuelle Fruchtfliege oder Mensch haben gemeinsame Mittel zur sensorischen Informationen, die während dieser Interaktionen, sei es zu verarbeiten. Wir und andere Hypothese ist, dass es ein möglicherweise freigegebenen neurocircuitry Basiswert Verhaltensreaktionen auf soziale Interaktionen, und dass die neuronalen Zellen und Genen beteiligt sein könnten evolutionär konservierten 7. Sobald die erste Wechselwirkung stattgefunden hat, wird die soziale Raum zwischen den interagierenden Individuen entweder erhöhen (soziale Vermeidung 8) oder verringern (Gruppenbildung / Aggregation 5). Komplizierter Wechselwirkungen, wie Aggression oder Balz, kann dann.

Weder anspruchsvolle Werkzeuge und Methoden, noch große Investitionen in Zeit und Training sind erforderlich, um diese einfache Form der Sozialverhalten zu quantifizieren, so dass es ein leistungsstarkes analytisches Werkzeug. Hier erläutern wir eine einfache Protokoll, das inter-fly Entfernung oder sozialen Raum quantifiziert, um die soziale Interaktion in stabilen Gruppen von Drosophila melanogaster zu bewerten, wie in den folgenden Studien 1-4,9 verwendet. Sozialraum bezieht sich auf ein Maß für die Entfernung zwischen einer Fliege und seine nächsten Nachbarn 10. Sozialen Raum ist konsistent für eine bestimmte Population von D. melanogaster als Versuchsbedingungen werden beibehalten (durchschnittlich etwa in 1-2 Körperlängen) und variiert in Bezug auf die soziale Erfahrung der Fliegen und erhöht, wenn das Individuum isoliert 1 gehalten. Proper Vision ist es notwendig, normale soziale Distanz zu halten, aber nicht klassische Riechstoffe bzw. CVA Wahrnehmung 1. Maß der sozialen Raum kann somitals diagnostisches Werkzeug, um soziale Interaktionen zu analysieren und zu quantifizieren, das soziale Verhalten in D. verwendet melanogaster 1. Wir beschreiben hier in Einzelheiten, wie Sie diese Quantifizierung durchzuführen, und in welchem ​​Umfang gemeinsame experimentelle Variablen beeinflussen dieses Verhalten.

Wir zeigen, dass die Ausrichtung der Kammer, in der der Test durchgeführt wird, sowie die Anzahl der Fliegen - in einem Ausmaß - zu tun beeinflusst sozialen Raum. Es wurde bereits gezeigt, dass die Kammergeometrie wirkt sich spontan explorativen Bewegung Fliegen 11,12, und dieses Phänomen kann letztendlich auswirken, wo sie sich niederlassen wollen. Doch solange die Flugdichte (fly / cm 2) und Kammer Orientierung gleich gehalten wird, bleibt auch der soziale Raum der Fliegen konstant. Die Robustheit dieses Tests wird durch die Tatsache, dass unabhängige Laboratorien mit unterschiedlichen Kammergrößen, die Form und Orientierung kann das Ergebnis durch Mutanten des wh angezeigt replizieren illustriertite-Gen (betrifft Auge Pigmentierung), was einer Steigerung sozialer Raum ist (vertikale Dreieck oder Horizontalkreis in 1, horizontal Platz mit Luftstrom in 3).

Unsere Ergebnisse zeigen auch, dass die Aufrechterhaltung der Zeitpunkt, zu dem der soziale Raum-Experiment durchgeführt wird ist entscheidend für die Konsistenz der Ergebnisse, wie wir zeigen, dass Männer, nicht aber Frauen, weiter auseinander in den Abendstunden gibt. Die Unterschiede zwischen Tages- und Abendstunden zu sehen sind jedoch nicht aufgrund von Aktivitätsunterschiede der Fliegen, und wir Argumente angibt, dass die Aktivitätsniveaus nicht mit sozialen Raum korreliert zu diskutieren.

Schließlich gibt es genetischen Grundlagen für die Bestimmung des sozialen Raums, wie sie in der weißen Mutante angegebenen bereits beschriebenen 1,3, und die Unterschiede zwischen verschiedenen Inzucht und wild gefangenen Stämme von Fliegen, die wir hier präsentieren.

Daher macht dieser Test ein ausgezeichnetes Werkzeug foder die Untersuchung der Auswirkungen von genetischen als auch Umweltfaktoren.

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Protokoll

1. Geräte und Reagenzien Erstellt In-house (siehe Liste der Materialien für Others)

  1. Bereiten Sie eine Drosophila kalten Narkosegerät wie zuvor beschrieben, 8.
  2. Bereiten Sie eine Fliege Aspirator wie zuvor beschrieben 13.
  3. Bereiten sozialen Raum Kammern und Inhaber.
    1. Bestellen oder Glasscheiben und Acrylabstandshalter, um die sozialen Raum Kammern erstellen. Jeder Sozialraumkammer besteht aus zwei quadratischen Glasscheiben (17,6 cm x 17,6 cm, mit einer Dicke von 0,3 cm), zwei rechtwinkligen Dreiecks Acryldistanzstücke (mit einer Höhe von 16,5 cm, einer Basis von 8,9 cm, mit einer Dicke von 0,3 cm ) und zwei rechteckige Räume (9 cm × 1,5 cm mit einer Dicke von 0,3 cm) (1A).
    2. Montieren Sie das Glas und Acryl sozialen Raum Kammer, dass sie identisch mit der Kammer in 1B ist. Um dies zu tun, starten Sie, indem Sie eine dreieckige Abstandshalter flach auf einem Quadratglasscheibe, so dass die rechten Winkeldes dreieckigen Abstandshalter ist mit einer der Ecken der quadratischen Scheibe ausgerichtet ist. Als nächstes legen Sie die zweite dreieckige Abstands flach auf der Oberseite des quadratischen Bereich Spiegelung der ersten dreieckigen Abstandshalter.
      HINWEIS: Stellen Sie sicher, Handschuhe zu tragen, um nicht die Stücke mit Ölen und Gerüche von Ihren Händen zu verunreinigen.
    3. Legen Sie zwei kleine rechteckige Abstandshalter flach auf dem Platz Bereich entlang der Seite der Scheibe, die nicht abgedeckt ist. Die Acryl-Abstandshalter auf der Oberseite des quadratischen Ebene sollte jetzt bilden eine dreieckige Arena.
    4. Legen Sie einen zweiten quadratischen Glasscheibe auf der Oberseite der Acrylabstandshalter, so dass sie über der ursprünglichen Glasscheibe unten ausgerichtet ist.
    5. Verwenden Sie vier Binder Clips, um die Scheiben und Abstandshalter zu sichern zusammen, um den sozialen Raum Kammer zu bilden. Platzieren eines Clips in der Nähe der Ecke, über die lange Seite von jedem der dreieckigen Abstandshalter, Sichern sie im Inneren der Glasscheiben. Auf diesen gleichen Seiten, legen Sie einen Clip in der benachbarten Ecke, gegenüber jedem der rechteckigen Abstandhalter und sichern Sie sie inSeite der Glasscheiben.
    6. Bauen Sie ein Stativ und eine Flasche Klemme, so dass die Klemm den sozialen Raum Kammer in einer aufrechten Position zu halten, wie der soziale Raum Kammer ruht auf seinem Rand auf der Oberseite der Arbeitsfläche.
    7. Für jede Wiederholung in dem Experiment, montieren einen sozialen Raum Kammer und unterstützen zu stehen.
  4. Bereiten Sie eine Kletter Assay Antwortgerät, um die Steigfähigkeit der getesteten Fliegen zu überprüfen.
    1. Verwenden Sie einen Gegenstromapparat, wie zuvor beschrieben, 14,15.
  5. Stellen Sie sicher, homogene Lichtverhältnisse, indem das Experiment auf eine Arbeitsfläche mit einer weißen Bank Abdeckung und vor einem weißen Hintergrund.

2. Vorbereitung die Fliegen vor dem Experiment

  1. Pflegen Fliegen in Flaschen mit Standard Drosophila Fliegen Essen. Halten Sie sie in einer Inkubationskabine bei 25 ° C auf einem 12 h Hell / Dunkel-Zyklus.
  2. Ein bis zwei Tage vor der Experiment, sammeln und Sex fliegt unter kaltem Anästhesie, wie zuvor beschrieben, 8.
    1. Chill die kalte Narkosegerät bei -4 ° C. Platz fliegt in 50 ml Kunststoffröhrchen. Vollständig versenken die Kunststoffröhrchen, die Fliegen in Eis in einem isolierten Eiskübel, warten Sie mindestens 5 Minuten für Fliegen unbeweglich zu werden.
    2. Legen Sie die Fliegen an der Polyethylenfolie des kalten Narkosegerät. Bei RT, verwenden Sie ein Stereomikroskop, um Männer von Frauen zu trennen. Pflegen Fliegen, in Gruppen, in Durchstechflaschen mit Standard Drosophila Fliegen Essen, nicht mehr als 40 Fliegen pro Fläschchen.
  3. Zwei Stunden vor Beginn des Experiments zu gewährleisten, dass die Temperatur des Raums, wo das Experiment durchgeführt werden zwischen 24-25 ° C und einer Luftfeuchtigkeit von ca. 50%.
  4. Übertragen Sie die Fliegen in neue Phiolen haltige Speisen, und legen Sie sie für 2 Stunden auf der Arbeitsfläche, wo das Experiment durchgeführt.
    HINWEIS: Für diese experiments, die Fliegenstämme verwendet wurden, waren Drosophila melanogaster Stämme: Canton-Spezial oder Canton-S (CS), w 1118 Cs 10 (oder W - w 1118 Canton-S ausgekreuzt 10 Mal) waren Oregon und Samarkand entfernt alle aus unserem Labor Aktien 16; Elwood Fliegen wurden im Herbst 2011 in der Nachbarschaft von Elwood Huntington auf Long Island, New York, USA 8 gesammelt. Außer, wenn nicht anders angegeben, wurden die Ergebnisse vorgestellt erhalten mit Canton-S fliegt (in den Farben rot).

3. Durchführung des Experiments

  1. Führen Sie das Experiment von 12.00 bis 03.00 Uhr (Zeitgeber-Zeit - die Zeit in Stunden nach dem Beginn der Licht - der ZT 4 bis 7).
  2. Bereiten Sie den sozialen Raum Kammer für den Transfer von Fliegen.
    1. Legen Sie einen sozialen Raum Kammer flach auf eine Arbeitsfläche, mit der Seite enthalten rechteckige Abstandshalter, die am nächsten zu Ihrem Körper.
    2. Entfernen Sie one Clip nächst Ihren Körper und schieben Sie eine rechteckige Abstandshalter nach außen, wodurch ein Abstand von ca. 1 cm zwischen den rechteckigen Abstandhalter.
    3. Mit Klebeband und eine Markierung, zu kennzeichnen den sozialen Raum Kammer in einer oberen Ecke mit Sex, Dehnung, und wiederholen Sie die Nummer. Achten Sie darauf, das Band nicht Teil des inneren dreieckigen Arena Fall Rechnung zu tragen.
  3. Übertragen Sie die Fliegen in den sozialen Raum Kammer.
    1. Transfer fliegt von ihrem Fläschchen, das Essen in ein neues, leeres Fläschchen. Saugen Sie fliegt von der leeren Durchstechflasche und überführen sie in der sozialen Raum Kammer.
      1. Atmen Sie ein, um die Fliegen in die Spitze der Saugvorrichtung zu ziehen. Setzen Sie die Spitze in die 1 cm Abstand zwischen den rechteckigen Abstandshalter der sozialen Raum Kammer und Ausatmen mit einer konsistenten Rate, um die Fliegen in den inneren dreieckigen Arena zu erzwingen.
      2. Unmittelbar schieben Sie die rechteckige Abstandshalter wieder an seinen Platz und schloss die Basis des inneren dreieckigen Arena, und platzieren Sie den Binder Clip wieder ein.
  4. Auf einem stampfenden Unterlage, die auf unterschiedlichen Bank als dort, wo die experimentelle Arbeit erfolgt befindet, halten Sie die sozialen Raum Kammer aufrecht, so dass die rechteckige Abstandshalter auf der Unterseite. Pfund dreimal alle Fliegen zu gewährleisten, hat an der Unterseite der Arena gefallen.
    HINWEIS: Aufgrund der Acryldistanz ragte aus dem kleinsten Kammergröße (1D), schlagen die Ellbogen auf die Arbeitsfläche und gleichzeitig einen sicheren Halt am Gerät, um sicherzustellen, die Fliegen wurden auf den Boden gefallen ist.
  5. Starten Sie einen Timer.
  6. Setzen Sie den sozialen Raum Kammer auf der Arbeitsfläche und verwenden Sie das Stativ und Kolben Klammer, um sie aufrecht zu halten. Legen Sie ein Lineal oder einen Aufkleber der bekannten Länge flach gegen den sozialen Raum Kammer, aber nicht zur Deckung etwaiger Teil des inneren dreieckigen Arena.
    1. Für horizontal Experimenten, stellen Sie den sozialen Raum Kammer in dem Stützgestell; stattdessen legen den sozialen Raum Kammer flach auf die Arbeitsfläche.
  7. Wenn die Fliegen niedergelassen haben, in der Regel nach etwa 30 Minuten, nehmen Sie ein Bild von der sozialen Raum Kammer. Stellen Sie sicher, dass der Rahmen enthält die gesamte innere dreieckige Arena, das Lineal, und das Etikett.
  8. Wiederhole das Experiment für jeden Genotyp und Zustand (idealerweise 3 internen Wiederholungen und 3 unabhängige Wiederholungen).

4. Analyse der Sozialraumdaten

  1. Importieren Sie die folgenden Makros in ImageJ 17
    1. ImageJ finden Sie hier: http://rsbweb.nih.gov/ij/.
    2. Sie können einen Befehl 'Messen Sie Entfernungen "im Plugins-Menü zu erstellen, indem Sie die Makros unter in einer Datei mit dem Namen' Measure_Distances.txt 'im Ordner ImageJ / plugins, in der Makro-Unterordner, und mit der Hilfe> Update Menüs Befehl."
    3. Kopieren Sie in einer TXT-Datei, die Makros, die in Zusatzdaten zur Verfügung gestellt werden und wurden ursprünglich in 3 veröffentlicht.
  2. Laden Sie die Bilder auf einen Computer, und öffnen Sie eine picture mit ImageJ.
    1. Eröffnen Sie ein Maßstab durch eine Linie von der 0 cm bis 1 cm Markierungen auf dem Lineal in das Bild, und auf der Registerkarte Analysieren, wählen Sie die Set-Skala Funktion, um eine Skala von 1 cm für den Abstand eingestellt (gleiche Ansatz für den Aufkleber von bekannt Länge). Wählen Sie die globale Option, bevor die Waage auf dem Bild.
    2. Schneiden Sie das Foto mit der Crop-Funktion unter der Registerkarte Bild, so dass es alle der Fliegen, während das Entfernen so viel von dem Rest des Bildes wie möglich.
    3. Machen Sie das Bild schwarz und weiß, indem Sie 8-Bit aus dem Optionstyp auf der Registerkarte Bild.
    4. Entfernen Sie alle Hintergrundgeräusche aus dem Bild, indem Sie auf der Schwelle Funktion unter der Option Anpassen der Registerkarte Bild. Ziehen Sie die Regler zu erhöhen oder zu entfernen Sie den Kontrast, so dass der Körper jedes fly deutlich ohne weitere Markierungen im Bild zu sehen ist. Wenn es Markierungen, die nicht fliegen, fangen sie mit dem Rechteckwerkzeug und löschen.
    5. Stellen Sie dieMessungen mit Hilfe der Messungen Tool Set unter der Registerkarte Analysieren. Wählen Bereich, Schwerpunkt, Centroid und Anzeigebezeichnung. Als nächstes wählen Sie die Analyze Partikel verfügen auf der Registerkarte Analysieren, um eine nummerierte Liste aller schwarzen Flecken, die Fliegen zu erstellen.
      1. Bei Verwendung Analysieren Teilchen; Set-Größe von 0,01 bis 0,1 (Wählen Sie keine Pixeleinheit); Rundheit von 0,00 bis 1,00; Show Konturen; Ergebnisse darstellen, und fügen Sie den Manager.
      2. Stellen Sie sicher, dass jeder schwarze Punkt (jedes Teilchen) ist eine genaue Darstellung der Fliegen, die im Originalbild sind, durch den Vergleich der nummerierten Liste zu dem Originalbild.
        HINWEIS: Wenn einige Fliegen, die sehr nahe beieinander liegen als ein Teilchen gezählt, manuell zeichnen eine weiße Linie, die zwei Fliegen auf dem binären Bild zu trennen.
    6. Während die Liste ausgewählt ist, verwenden Sie den Nearest Neighbor - Liste Entfernungen Makro im Rahmen des zweiten Makros Optionen auf der Registerkarte Plugins, um eine neue Liste der Entfernungen enthält erstellen, in cm, von EAch zu fliegen, um ihre nächsten Nachbarn.
  3. Kopieren Sie die nächsten Nachbarn Entfernungen von ImageJ und fügen Sie ihn in eine Säule mit einem Tabellenkalkulationsprogramm.
    1. Kompilieren Sie alle Daten von jeder Wiederholung auf denselben Tabellenkalkulation und die Organisation von Genotyp und Zustand.
  4. Führen Sie die Datenanalyse unter Verwendung von Statistik-Software. In diesem Experiment Graph Pad Prism (Version 6 für MacOSX, GraphPad Software, San Diego Kalifornien USA, www.graphpad.com) wurde verwendet, um one-way ANOVA und Kruskal-Wallis-Tests, Tukey und Dunnet Post-Hoc-Tests durchzuführen.
  5. Die Verteilung der Abstände folgt eine nichtparametrische Verteilung 1, und Daten werden als Box und Tukey-Whisker (Ausreißer zu eliminieren) vertreten.

5. Klettern Assay (Führungsverhalten)

  1. Verwenden Sie einen Kletter Test als Kontrolle, um Testfliegen Steigfähigkeit 14,15,18.
    1. Verwenden Sie die Gegenstromapparat, so dass drei Versuche cparallel ein ausgeführt werden.
  2. Transfer 50 bis 100 naiv Fliegen (Fliegen, die vorher nicht getestet wurden) in drei verschiedenen Teströhrchen, und rasten sie in der 1., 3. und letzten Schlitze an der Unterseite des Gegenstromapparat, mit frischen leeren Ampullen in den gegenüberliegenden Stellen.
  3. Legen Sie frische, leere Durchstechflaschen in den leeren Slots an der Unterseite des Geräts.
  4. Tippen Sie unten das Gerät drei Mal, so dass alle Fliegen sind an der Unterseite eines jeden Rohres, um das Experiment zu initiieren.
  5. Starten Sie den Timer für 15 Sekunden (Zeit, die ausreichend für ~ 100% der 3-7 Tage alten Canton-S, um die Top-Ampulle zu erreichen - siehe Abbildung 3F).
  6. Schieben Sie den oberen Teil des Gegenstromgerät, um die Randflaschen um einen Schlitz zu verdrängen.
  7. Sammeln Sie fliegt durch Tippen auf das Gerät nach unten, bis alle Fliegen in den unteren Durchstechflaschen zu bringen.
    1. 1 und 2. Rohre (oder 3. und 4., 5. und 6.) entsprechen jeweils den Fliegen, die nicht erreichte nach oben und die Fliegen, die die Top-Ampulle erreicht.
  8. Berechnen Sie die Performance Index (PI).
    1. Zählen Sie die Anzahl der Fliegen in jedem Fläschchen.
    2. Der PI ist der Prozentsatz von Fliegen in der Lage, auf dem oberen Rohr zu klettern.
    3. Die mittels der PI einer Normalverteilung folgen 1, und Daten werden als Spalten Graphen der Mittelwert plus oder minus Standardfehler auf den Mittelwert (SEM) dargestellt.
      HINWEIS: Alternativ kann die PI als der Prozentsatz von Fliegen in der Lage, den oberen Teil des unteren Ampulle (für ältere Linie erreichen, berechnet werden kann, ist 5 sec die Zeit, die ausreicht, um einen Unterschied in der Steigfähigkeit zwischen infizierten und nicht quantifizieren infiziert 12 Tage alt Canton-S aus einem Standbild quantifiziert: siehe Ergebnisse). Andere haben verschiedene Maßnahmen der Leistung in Schreck-induzierten negativen Geotaxis, die auch angemessen zu quantifizieren Steigfähigkeit von 19 bis 22 verwendet.

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Ergebnisse

Der soziale Raum Kammer kann als Werkzeug verwendet, um das Sozialverhalten von Drosophila melanogaster zu quantifizieren. Acrylabstandshaltern und Glasscheiben zusammengeklemmt, um eine innere Dreiecks Arena, die einen zweidimensionalen Bereich, in dem Fliegen können stabile Gruppen ohne die Anwesenheit von vielen potentiell verwirrende Cues Formular bilden. Beim Fliegen auf die vertikale Arena übertragen, werden sie von herunter abgegriffen erschreckt, und sie durch eine Escape-Verhalten zu reagieren: negativ...

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Diskussion

In diesem Protokoll wurde ein detailliertes Verfahren für die Quantifizierung von sozialen Raum beschrieben. Einige wichtige Schritte, um das Experiment zu gewährleisten erfolgreich sind: 1) immer Schutzhandschuhe verwenden bei der Reinigung und die Einrichtung der Vorrichtung, die eigenen Öle und Düfte aus der Innenkammer der Vorrichtung zu halten, 2) sicherzustellen, Fliegen werden mindestens einen Tag gesammelt, bevor das Experiment damit die möglichen Auswirkungen von kaltem Narkose zu verringern, 3) 2 h vor dem Exp...

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Offenlegungen

Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen haben.

Danksagungen

Die Autoren danken Dr. Tadmiri Venkatesh für seine Ermutigung, dieses Manuskript vorzubereiten, Dova Brenman und Selwyn Chui für ihre konstruktiven Kommentare, Elyssa Burg und Wayne Rasband für das Design des Makros in ImageJ für alle Zwischenfliegenabstände und für die nächsten Nachbarabstände. Die Autorinnen und Autoren danken auch den Gutachterinnen und Gutachtern für ihre konstruktiven Kommentare.

A.A.A., M.C.C. und A.F.S waren für das Forschungsdesign verantwortlich; S.N.J., A.A.A., M.N., Z.R. und A.J.M. führten die Experimente durch. A.A.A., M.N., A.J.M. und M.C.C und A.F.S. analysierten die Daten; A.R.M. und A.F.S. schrieben das Manuskript.

Diese Arbeit wurde durch PSC-CUNY-Forschungspreise unterstützt, gemeinsam finanziert vom Professional Staff Congress und der City University of New York an A.F.S.; durch interne Finanzierung der Western University an A.F.S.; durch ein Stipendium für die Hauptfächer Mathematik, Biologie, Chemie und Geologie für angehende Lehrer und durch ein Stipendium der Louis Stokes Alliance for Minority Participation an A.A.A.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Stereo-Zoom-Mikroskop Nikon   SMZ-645Jedes andere Standard-Zielfernrohr für die Handhabung von Fliegen würde funktionieren
Kleine Pinsel zum Schieben von Fliegen
Jazz-mixFisher33545jedes andere Standard-Drosophila-Futter würde funktionieren
Mini-Wecker Timer/Stoppuhr
  Sharpie-Stifte
Klebeband
Mittelgroße HeftklammernKlammern, um die Kammern zusammenzuhalten: 1-1/4" (32 mm) mittlere Clips mit 5/8" Kapazität
707161, um die Kammern in einer vertikalen Ausrichtung zu halten
BürettenklemmenCarolina707362
DigitalkameraNikon  Coolpix S8000 So nehmen Sie die Standbilder auf
Kleines Linealum das Bild
Trifold-Brett und weiße Bankabdeckung, um einen weißen Hintergrund und ein homogenes Licht zu schaffen.
Pounding PadJedes Mauspad funktioniert.
Prism 6GraphPad Software Inc.Prism 6 für Mac OS XJede statistische Analysesoftware mit t-Test, Einweg und zwei ANOVA funktioniert
, kleine Stützständer, Carolina , skalieren zu können :

Referenzen

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