Method Article

Abstimmen eines Parallel Segmented Flow Säule und Aktivieren von Mehrfachanalysen

DOI:

10.3791/53448

December 15th, 2015

In This Article

Summary

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Hier präsentieren wir ein Protokoll für den Betrieb und die Abstimmung von parallelen segmentierten Durchflusschromatographiesäulen, um eine Multiplexdetektion zu ermöglichen.

Abstract

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Die aktive Durchflusstechnologie (AFT) ist eine neue Form der Säulentechnologie, die entwickelt wurde, um die Strömungsheterogenität zu überwinden, die Trennleistung in Bezug auf Effizienz und Empfindlichkeit zu erhöhen und eine Multiplexdetektion zu ermöglichen. Bei dieser Form der AFT wird eine PSF-Säule (Parallel Segmented Flow) verwendet. Eine PSF-Säulenausgangsverschraubung besteht aus 2 oder 4 Anschlüssen, die gemultiplext werden können, um bis zu 4 Melder anzuschließen. Die PSF-Säule ermöglicht nicht nur eine Plattform für die Multiplex-Detektion, sondern auch die Kombination von destruktiven und zerstörungsfreien Detektoren, ohne zusätzliche Totvolumenschläuche, gleichzeitig. Die Durchflussmenge durch jeden Anschluss kann auch durch Druckmanagement an die Anforderungen eines bestimmten Detektors angepasst werden. Um eine Multiplexdetektion mit einer PSF-Säule zu erreichen, gibt es eine Reihe von Parametern, die gesteuert werden können, um eine optimale Trennleistung und Ergebnisqualität zu gewährleisten. Das heißt, die Rohrabmessungen für jeden Anschluss, die Wahl des Anschlusses für jeden Detektortyp und die Durchflusseinstellung. Dieses Protokoll soll zeigen, wie eine PSF-Spalte, die in einem Multiplex-Erkennungsmodus arbeitet, verwendet und optimiert wird.

Introduction

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Aktive Flow Technology Columns

Aktive Flow-Technologie (AFT) Chromatographiesäulen wurden kürzlich entwickelt, um Ineffizienz bei Trennungen mit Flußheterogenität 1-6 zu überwinden und auch zu Mehrfachdetektion zu ermöglichen. In diesem speziellen Kommunikations wir ausführlich die Betriebsprozess der parallel segmentiert Strom (PSF) Säule mit Multiplex-Detektion. Die wichtigsten funktionalen Vorteile der PSF Spalte sind: (1) die Strömung von der radialen Mittelbereich des Säulenbett von dem Peripheriegerät oder Wandbereich der Strömung isoliert ist, (2) das Volumen der mobilen Phase, die durch ein Erfassungs v....

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Protocol

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Hinweis: Dieses Protokoll enthält eine Anleitung, wie man ein PSF-Säule auf einem HPLC-System in Verbindung mit mehreren Detektoren zur Mehrfachdetektion zu verwenden. Das Protokoll geschrieben wurde unter der Annahme der Leser grundlegende Kenntnisse und Erfahrung in der Chromatographie und HPLC verschiedenen Nachweismethoden.

Achtung: Bitte den Sicherheitsdatenblätter (MSDS) für alle Materialien und Reagenzien beziehen sich vor der Verwendung (dh MSDS für Methanol). Achten Sie darauf, den Einsatz aller geeigneten Sicherheitspraktiken beim Umgang mit Lösungsmitteln und High Performance Liquid Chromatography (HPLC) Laufmittel. St....

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Results

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Ein Multiplex-HPLC-Analyse wurde unter Verwendung eines AFT-Spalte in PSF-Modus (Abbildung 1) durchgeführt und wie in Abbildung 2 dargestellt eingestellt. Erlaubt Diese Art von Setup eine Kaffeeprobe gleichzeitig mit UV-Vis, DPPH und MS in Gesamt analysiert werden Ion Count (TIC) Modus. Die Verbindungen der Kaffeeprobe, die DPPH reagierte könnte dann leicht bis in den UV-Vis und MS angepaßt werden - TIC Antworten basierend auf der Ausrichtung der Haltezeit, wie.......

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Discussion

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Diese Studie umfasst die Charakterisierung und Profilierung von Kaffee unter Verwendung von HPLC mit Multiplex-Nachweis unter Verwendung eines parallelen segmentierten Flusses (PSF) Spalte. Multiplex HPLC mit PSF Säulen ermöglicht die Charakterisierung und Identifizierung der wichtigsten chemischen Einheiten durch eine Verringerung der Daten Komplexität der Probe unter Gewinnung einen höheren Grad der molekülspezifischen Information in einem Bruchteil der Zeit, die unter Verwendung von herkömmlichen Mehrfachnachweisverf.......

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Disclosures

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Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Acknowledgements

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Diese Arbeit wurde unterstützt von UWS und ThermoFisher Scientific. Einer der Autoren (DK) bedankt sich für den Erhalt eines Australian Postgraduate Award.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
HPLC-GerätMehrere Detektoren nach Wahl für die Multiplexdetektion. Detektoren der Wahl können zusätzliche Instrumente erfordern, z. B. z. B. , Pumpe.
HPLC-Säule mit parallelem segmentiertem DurchflussThermo Fisher ScientificNicht definiertDemnächst kommerzialisiertes
MethanolJede MarkeHPLC-Grade
PEEK-SchläucheJede MarkeVerschiedene Längen und i.d.
SäulenstopperJede MarkeZum Blockieren ungenutzter Peripherieanschlüsse.
PEEK-RöhrchenschneiderJede Marke
Analysenwaage WaageJede Marke
StoppuhrJede Marke
1-2 ml Probenfläschchen jeder Marke können als Eluentensammelgefäße verwendet werden
Eluentensammelgefäße Jede Marke

References

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  1. Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. The design of a new concept chromatography column. Analyst. 136 (24), 5127-5130 (2011).
  2. Camenzuli, M., Ritchie, H. J., Ladine, J. R., Shalliker, R. A. Enhanced separation performance using a new column technol....

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Parallel Segmented Flow ColumnMultiplexed DetectionActive Flow TechnologyHPLC ProcedureFlow Rate AdjustmentDetector ConfigurationPort TuningMobile Phase PreparationDPPH Radical AssayRetention Time Alignment

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