Die Messung der Überlebensdauer in<em&gt; Brachionus</em&gt; Rotifers: Synchronisation von Maternal Bedingungen

Gen Kaneko; Tatsuki Yoshinaga; Kristin E. Gribble; David M. Welch; Hideki Ushio

doi:10.3791/54126

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Methodenartikel

Die Messung der Überlebensdauer in

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DOI:

10.3791/54126

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22. Juli 2016

Gen Kaneko¹^,⁴ , Tatsuki Yoshinaga² , Kristin E. Gribble³ , David M. Welch³ , Hideki Ushio¹

¹Department of Aquatic Bioscience, Graduate School of Agricultural and Life Sciences, The University of Tokyo, ²School of Marine Biosciences, Department of Marine Biosciences, Kitasato University, ³Josephine Bay Paul Center for Comparative Molecular Biology and Evolution, Marine Biological Laboratory, ⁴School of Arts and Sciences, University of Houston-Victoria

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Rädertierchen sind mikroskopisch kleines Zooplankton, das als Modelle in ökotoxikologischen und Alterungsstudien verwendet wird. Hier stellen wir ein Protokoll zur leistungsfähigen und reproduzierbaren Messung der Überlebenszeit bei Brachionus-Rädertierchen zur Verfügung. Die Synchronisation der Kulturbedingungen über mehrere Generationen hinweg ist von besonderer Bedeutung, da der mütterliche Zustand die Lebensgeschichte der Nachkommen beeinflusst.

Zusammenfassung

Rädertierchen sind mikroskopisch kleine kosmopolitische Zooplankton, die aufgrund ihrer verschiedenen Vorteile wie kurze Lebensdauer, einfache Kultivierung und Parthenogenese, die klonale Kultur ermöglicht, als Modelle in ökotoxikologischen und Alterungsstudien verwendet werden. Bei der Messung ihrer Überlebenszeit ist jedoch Vorsicht geboten, da sie vom Alter der Mutter und den Ernährungsbedingungen der Mutter beeinflusst wird. In dieser Arbeit stellen wir ein Protokoll zur Verfügung, mit dem die Überlebenszeit von Brachionus-Rädertierchen nach sorgfältiger Synchronisation der Kulturbedingungen über mehrere Generationen hinweg leistungsfähig und reproduzierbar gemessen werden kann. Empirisch führt eine schlechte Synchronisation zu einer frühen Mortalität und einer allmählichen Abnahme der Überlebensrate, was zu einer schwachen statistischen Aussagekraft führt. Tatsächlich konnte die Kalorienrestriktion (CR) unter solchen Bedingungen die Lebensdauer von B. plicatilis nicht signifikant verlängern, obwohl die CR-induzierte Langlebigkeit mit gut synchronisierten Rädertierchenproben in früheren und aktuellen Studien nachgewiesen wurde. Dieses Protokoll ist wahrscheinlich auch für andere wirbellose Modelle nützlich, einschließlich der Fruchtfliege Drosophila melanogaster und des Fadenwurms Caenorhabditis elegans, da bei diesen Arten auch über Auswirkungen auf das Alter der Mutter berichtet wurde.

Einleitung

Rotifers sind mikroskopisch kleine kosmopolitische Zooplankton (<1 mm), die die phylum Rotatorier ¹ darstellen. Sie haben eine einfache Körperplan von ca. 1.000 somatischen Zellen besteht, sowie eine charakteristische radähnlichen ciliary Vorrichtung die corona genannt, die für die Fortbewegung und Fütterung verwendet wird. Die meisten rotifers gehören zu den Klassen Monogononta oder Bdelloida, die etwa 1600 und 500 Arten enthalten jeweils ^2. Monogononta rotifers haben in der Regel sowohl sexuelle und asexuelle Reproduktionsphasen (zyklische Parthenogenese), während Bdelloid Rotatorien durch obligatorische Parthenogenese ³ reproduzier....