Schnelle molekulare Erkennung und Differenzierung von Influenza-Viren A und B

Zusammenfassung

Wir beschreiben eine schnelle, molekülbasierten Influenza A und B-Assay. Die Influenza-Test weist jedes Ziel innerhalb von 15 Minuten durch den Einsatz von isothermen Amplifikation mit Influenza-spezifischen Primer durch Zielerfassung mit molekularen Signalsonden gefolgt. Das Influenza-A-und B-Test ist benutzerfreundlich und benötigt minimale Hands-on-Zeit auszuführen.

Zusammenfassung

Influenza ist eine ansteckende durch Influenzaviren A und B in Menschen verursacht respiratorische Erkrankung und verursacht eine erhebliche Menge an Morbidität und Mortalität jedes Jahr. Das Influenza-A-und B-Test war der erste CLIA-verzichtet Molekular schnelle Grippe-Test zur Verfügung. Die Influenza A- und B-Test funktioniert durch Verwendung isothermen Amplifikation mit Influenza-spezifischen Primern durch die Zielerfassung mit molecular beacon Sonden folgten. Hier wird die Leistung des Influenza-A-und B-Test auf gefrorenen archivierten Nasen-Rachen-Abstrich (NPS) Proben in Virustransportmedium (VTM) gespeichert wurden einem Atem Panel-Untersuchung verglichen.

Die Leistung des Influenza A- und B-Assay wurde durch Vergleich der Ergebnisse der Atemtafel Referenzmethode bewertet. Die Empfindlichkeit für die gesamte Influenza-Virus A betrug 67,5% (95% CI (CI), 56,6-78,5) und eine Spezifität von 86,9% (CI, 71,0 bis 100). Für B-Tests Influenza-Virus, die Sensitivität und Spezifität waren 90,2% (CI, 68,5 bis 100) Und 98,8% (CI, 68,5 bis 100), respectively.

Dieses System hat den Vorteil einer erheblich kürzeren Prüfzeit als alle anderen derzeit verfügbaren molekularen Assays und der einfachen, Pipettenfreien Verfahren läuft auf einer voll integrierten, geschlossenen, mit kleinem Platzbedarf System. Insgesamt hat das Influenza-A-und B-Test in dieser Studie untersuchte das Potenzial als Point-of-Care schnelle Influenza diagnostischen Test zu dienen.

Einleitung

Influenza - Virusinfektionen führen zu einer signifikanten Menge von Morbidität und Mortalität jedes Jahr ^{1, 2, 3.} Unkompliziert Influenza wird durch Verfassungs- und respiratorische Symptome wie Fieber, Muskelschmerzen, Kopfschmerzen, und nicht produktiven Husten ^{4, 5} aus. Ältere Menschen, Kleinkinder, immungeschwächten Patienten und Patienten mit zugrunde liegenden Komorbiditäten sind zu einem höheren Risiko für schwere Komplikationen wie Lungenentzündung, Myokarditis, Zentralnervensystem - Krankheit oder Tod

Protokoll

ETHIK STATEMENT: Die Verwendung von übrig gebliebenen klinischen Proben zugelassen ist und nach den Richtlinien des Memorial Sloan Kettering Cancer Center Institutional Review Board.

1. Vor dem Assay Lauf

HINWEIS: Das Influenza-A-und B-Test wird für Nasen-Rachen-Abstrichproben und für Nasen-Rachen-Abstrichen in viralen Transportmedien gespeichert zugelassen. Tupfer sind im Kit enthalten und sollte für eine optimale Leistung verwendet werden. Jedoch, Rayon, Schaum, beflockte Tupfer oder Polyester Nasenabstrichen können auch Nasentupferproben zu sammeln, verwendet werden.

1. Um eine Nasenabstrichprobe sammeln, legen Sie den Tupfer in das Nasenlo....

Ergebnisse

In dieser Studie wurden archivierten NPS Proben von Patienten stationär gesammelt 15, am Memorial Sloan-Kettering Cancer Center (MSKCC) während einer Influenza-Ausbruch zwischen Dezember mit grippeähnlichen Symptomen präsentiert 2012 und 1. März 2013. Die NPS Exemplare in 3 ml vorgelegt wurden von VTM und als Teil der klinischen Routine mit einem molekularen Test getestet, die eine Gruppe von Atemwegsviren (RP), einschließlich Influenza A, A-1, A-3 und B. Während der Studie, 3675 NPS Pro.......

Diskussion

Influenzaviren sind signifikant weltweit Ursachen von Morbidität und Mortalität. Eine schnelle und genaue Diagnose der Influenza ist eine der wichtigsten Schlüssel zur Grippe-Ausbrüche während Atem Saison zu verwalten. Andere Antigen-basierte Tests sind schnell und einfach durchzuführen; sie haben jedoch geringe Empfindlichkeiten ^13. Auf der anderen Seite haben die traditionellen molekularen Tests Empfindlichkeit verbessert, benötigen aber mehr erfahrenen Labortechniker durchführen und sind teure.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Alere i Instrument	Alere	NAT-000 (Global), NAT-024 (US)
Alere i Influenza A & B 24 Test Kit	Alere	425-000 (Global), 425-024 (US)
Alere i Barcode Scanner	Alere	EQ001001
Alere Universal Printer	Alere	55115 (Global), Alereiprinter ( US)
200 &Mikro; L Präzisionspipette
200 &Mikro; l Einweg-Pipettenspitzen
Virales Transportmedium	Remel	M4-RT