Method Article

Zuverlässige Methode zur Beurteilung der Samenkeimung Dormanz und Mortalität unter Feldbedingungen

DOI:

10.3791/54663

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November 6th, 2016

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1Department of Horticulture and Crop Science, Ohio State University, 2Department of Ecology and Evolutionary Biology, University of Kansas, 3Department of Biology, Washburn University

In This Article

Summary

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Hier präsentieren wir ein Protokoll für die Beurteilung der Samen überleben, Keimung und Dormanz unter Feldbedingungen mit begraben, markierten Samen Streifen und Tetrazoliumchlorid (TZ) Vitalitätstests.

Abstract

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Wir beschreiben Techniken zur Annäherung der Samenbankdynamik im Laufe der Zeit am Beispiel von Helianthus annuus. Streifen aus durchlässigem Polyestergewebe und Klebstoff können gefaltet und geklebt werden, um einen Streifen von Fächern zu bilden, die Saatgut und Identifikationsinformationen aufnehmen und gleichzeitig den Kontakt mit Bodensickerwasser, Wasser, Mikroorganismen und Umgebungstemperatur ermöglichen. Streifen können mit einer Vielzahl von Kompartimentnummern und -größen konstruiert werden und ermöglichen es dem Forscher, eine Vielzahl von Genotypen innerhalb einer einzigen Art, verschiedener Arten oder Samen, die unterschiedliche Behandlungen erfahren haben, unterzubringen. Im Gegensatz zu einzelnen Saatgutpackungen lassen sich die Streifen leichter als Einheit entnehmen. Während Replikatpakete in einen Strip aufgenommen werden können, können verschiedene Strips als Blöcke fungieren oder zu unterschiedlichen Zeiten abgerufen werden, um das Seed-Verhalten im Laufe der Zeit zu beobachten. Wir verwendeten eine Hochtemperatur-Klebepistole, um die Fächer abzugrenzen, und versiegelten die Streifen, sobald das Saatgut und die Etiketten mit den Block- und Entfernungszeiten eingesetzt wurden. Anschließend wurden die Saatstreifen in der gewünschten Tiefe auf dem Feld vergraben und die Stelle für die spätere Entnahme markiert. Grabende tierische Raubtiere wurden durch die Verwendung einer Abdeckung mit Metallgitter auf der Bodenoberfläche effektiv ausgeschlossen. Nach dem gewählten Zeitintervall für die Bestattung wurden Streifen ausgegraben und die Samen auf Keimung, Ruhephase und Mortalität untersucht. Während tote Samen oft eindeutig von nicht erminierten lebenden Samen mit dem Auge unterschieden werden können, wurden ruhende Samen mit einem kolorimetrischen Standardtest von Tetrazoliumchlorid für die Lebensfähigkeit der Samen eindeutig identifiziert.

Introduction

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Das übergeordnete Ziel dieses Verfahrens ist es, zuverlässig Samen Überleben im Laufe der Zeit unter Feldbedingungen zu beurteilen.

Bodensamenbanken sind eine Reserve von verteilt, durchführbare noch nicht gekeimten Samen verteilt entweder auf der Bodenoberfläche, innerhalb von Oberflächen Streu oder innerhalb des Bodenprofils, das 1,2 transient oder für viele Jahre andauern kann. Bei der Saatgut Bestattung Methoden ähnlich denen hier vorgestellten einer Studie von 17 Jahren angewendet wurden mehrere Dutzend Arten verwendet wurden keimfähige Samen getestet 3 in viele der Arten gefunden. Samenruhe ist ein Block Keimun....

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Protocol

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1. Sammeln Samen aus mehreren Arten oder kontrollierte Kreuze einer einzelnen Spezies

Hinweis: Dieses Beispiel verwendet Samen von 15 Kreuztypen innerhalb der Spezies Helianthus annuus (Sonnenblume) mit wilden, Hybrid- und Pflanzenarten wie die mütterliche (Saatgutvermehrungs) Eltern.

  1. Am Ende der Vegetationsperiode sammeln reifen Samenkapseln in etikettierte Tüten. Saubere Samen von Spreu und Ort Samen in Umschläge mit elterlicher Kreuztyp im Standardformat beschriftet (dh mütterliche x väterlicherseits).
  2. Bulk seed zusammen in großen Umschläge unter Verwendung gleicher Mengen von Saatgut aus einer gleichen Anzahl von ide....

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Results

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Kreuz - Typen mit unterschiedlichen mütterlichen Abstammungs und Ernte - Allels Prozentsatz (Tabelle 1) unterschied sich über die Entfernung Daten in Prozent gekeimt, gekeimten und toten Samen (Abb. 2 und 3). Mit TZ Prüfung von gekeimten Samen, fanden wir einige wirklich ruhenden Samen in der zweiten Entfernung (Frühjahr) (Tabelle 2), während alle durch die dritte Entfernung nicht gekeimten Samen (Feder) gefunden wurden .......

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Discussion

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Hier präsentieren wir Methoden für die Verwendung von Saatgut Grabstreifen Keimung der Samen, Dormanz und Sterblichkeit von verschiedenen Saatgutvorräte zu vorgewählten Zeitperioden auf dem Gebiet zu beobachten. Die Vorteile der Verwendung von Streifen eher als einzelne Pakete liegen in (1) die Geschwindigkeit des Bandes und Fach Konstruktion über die Schöpfung der einzelnen Pakete; und (2) die Leichtigkeit und Geschwindigkeit des Entfernens von mehreren Fächern in einer Bewegung ohne die Gefahr eines Pakets Weglassen o.......

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Disclosures

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Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Acknowledgements

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Diese Arbeit wurde unterstützt durch das Biotech Risk Assessment Grant Program mit der großen Nummer 2006-39454-17438 an A. Snow, K. Mercer und H. Alexander vom United States Department of Agriculture, National Institute of Food and Agriculture. Experimente mit dieser Methode wurden an der University of Kansas Field Station, einer Forschungseinheit des Kansas Biological Survey und der University of Kansas, durchgeführt und von ihr unterstützt. Die Autoren danken P. Jourdan und E. Regnier für hilfreiche Rezensionen früherer Versionen dieses Manuskripts. Darüber hinaus wurde diese Arbeit durch die Beiträge der Mitarbeiter der University of Kansas Field Station, der Wate....

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Kleine MünzumschlägeAlle Große
MünzumschlägeAlle
feinmaschigen Moskitonetze aus PolyesterAlle
Hochtemperatur-KlebepistolenAlle
Hochtemperatur-Klebestift-NachfüllungenAlle
Industrie-DauermarkiererAlle
Gartenetiketten aus KunststoffJede
SchereJede
Metallgeflecht Hartes
Landvermessungsflaggen, mehrere FarbenAlle
Nasse ZeitungAlle
KühlerAlle
LöschpapierAlle
PetrischalenAlle
Temperaturgesteuerten WachstumskammernAlle
RasierklingenAlle
PetrischalenAlle
WasserJegliche
Hitze InkubatorBeliebig
Schaufel Jedes Tuch Alle Tetrazoliumchlorid Jedes

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Walck, J. L., Baskin, J. M., Baskin, C. C., Hidayati, S. N. Defining transient and persistent seed banks in species with pronounced seasonal dormancy and germination patterns. Seed Sci Res. 15 (3), 189-196 (2005).
  2. Alexander, H. A., Schrag, A. M.

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Tags

Seed GerminationSeed DormancySeed MortalityField ConditionsTetrazolium ChlorideSeed ViabilitySeed Bank DynamicsHelianthus AnnuusSeed Strip MethodBurial Trials

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