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Methodenartikel

Murine linken vorderen absteigenden (LAD) Koronararterienligatur: ein verbessertes und vereinfachtes Modell für Myokardinfarkts

25.8K Aufrufe

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DOI:

10.3791/55353

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2. April 2017

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* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Wir bieten eine zuverlässige Methode für die Ligatur der linken vorderen absteigenden Arterie (LAD) in einem Mausmodell an. Diese Methode ist vergleichsweise weniger invasiv als andere Methoden, die eine endotracheale Intubation, einen linksseitigen Thorakotomieansatz und eine Thorakozentese umfassen. Diese Methode kann sowohl als Modell für akuten als auch für chronischen Myokardinfarkt (MI) verwendet werden.

Zusammenfassung

Ischämische Herzkrankheit (IHD) oder akuter Koronarsyndrom (ACS) ist eine der führenden Todesursachen in den Vereinigten Staaten. IHD wird durch reduzierte Blutzufuhr zum Herzen, was den Verlust von Sauerstoff und der anschließenden Nekrose des Herzmuskels gekennzeichnet. Das MI-Modell hat an Popularität gewinnt für seine Verwendung als kurzfristiges Ischämie-Reperfusion-Modell und ein langfristigen Dauer Ligatur-Modell. Im Folgenden beschreiben wir für die dauerhafte Unterbindung der LAD eine zuverlässige Methode. Mit der Maus genetische immer Engineering-Technologie weiter fortgeschritten ist, und mit einer zunehmenden Verfügbarkeit von qualitativ hochwertigen Maus-chirurgischen Instrumenten hat die Maus ein beliebtes Modell für MI Operationen worden. Unser OP-Modell beinhaltet die Verwendung eines leicht umkehrbar Anästhetikum für die schnelle Wiederherstellung der Maus; eine minimal-invasive Intubation ohne eine Tracheotomie beteiligt sind; und Thorakozentese durch die ursprüngliche Thorakotomie Seite ohne einen zusätzlichen Einschnitt in der Brust zu schaffen, wiein einigen anderen Verfahren durchgeführt, um effektiv überschüssiges Blut und Luft aus der Brusthöhle entfernt werden. Dieses Verfahren ist vergleichsweise weniger invasiv als andere Methoden, die dramatisch chirurgische und postoperativen Komplikationen und Mortalität und verbessert die Reproduzierbarkeit verringert.

Einleitung

Koronarer Herzkrankheit oder ACS, sind die häufigste kardiovaskulären Ereignisse und die Hauptursache für Morbidität und Mortalität weltweit im Jahr 2020 1 in Betracht gezogen werden. Die Ursache des ACS ist das Vorhandensein einer myokardialen Thrombose aufgrund des Bruches eines koronaren atherosklerotischen Plaques , die Blöcke oder den Blutfluss zum Herzgewebe 2 reduziert. Daher gibt es klinische Symptome mit dem Vorhandensein von akuter myokardialen Ischämie, wie Myokardinfarkt (MI) 3, 4. MI führt zu einem Verlust in der Masse der Kardiomyozyten und eine Pr....

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Protokoll

Dieses Tier-Protokoll wurde von der Institutional Animal Care und Use Committee (IACUC) in Rhode Island Hospital überprüft und genehmigt.

1. Anästhesie und Intubation

  1. Wiegen Sie die Maus, um die Dosierung von postoperativen Schmerzmitteln zu berechnen.
  2. Platzieren Sie die Maus in eine Ansaugkammer und liefern 4% Isofluran für 9 - 10 min, Überwachung des Tieres im gesamten. Schalt auf einem heißen bead Sterilisator so daß die Vorrichtung auf etwa 250 ° C vorwärmen kann. 20 min - Vorglühen wird 15 nehmen.
  3. Sobald die Maus eine tiefe Ebene der Anästhesie erreicht, mit einer Atemfrequenz von etwa 32 Atemzüge / min....

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Ergebnisse

Die Mäuse werden 28 Tage nach der Operation getötet, und die Herzen werden geerntet und untersucht. Die Mäuse werden betäubt mit 50-75 mg / kg Ketamin und von 5 bis 10 mg / kg Xylazin. Wenn das Tier unter adäquater Anästhesie ist, wird der Brustraum geöffnet wird, und unter Verwendung einer 23-Gauge-Nadel, kalte Kaliumchlorid (KCL, 30 mM) wird in den hinteren basalen Bereich des Herzens injiziert. Das Herz wird in der Diastole verhaftet. Für weitere Validierung der Ligation wird das Herz.......

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Diskussion

Mit zunehmender Nutzung des MI-Modells in Laboratorien, sucht das beschriebene Verfahren der Effizienz und die Überlebensrate der Mäuse zu erhöhen, während ihre postoperativen Schmerzen und Beschwerden zu minimieren. Dieses Protokoll ist bestrebt, indem sie zahlreiche Verbesserungen an verschiedenen Aspekten der LAD-Ligation Verfahren Mortalität zu minimieren. Es gibt ein paar Unterschiede. Einige Mäuse - Intubation Studien , die Ketamin und Xylazin zusammen mit Isofluran für Induktion nutzen, aufgrund .......

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Offenlegungen

Die Autoren erklären, dass sie keine konkurrierenden finanziellen Interessen haben.

Danksagungen

Dieses Modell wurde mit Unterstützung des National Institute of General Medical Sciences (NIGMS)/des National Institute of Health (NIH) Grant 1P20GM103652 (Project# 3) (an MRA) und des American Heart Association (AHA) Grant-in-Aid 14GRNT20460291 (an MRA), des brasilianischen Regierungsstipendiums CAPES (an KR und FR) und eines LINK-Stipendiums der Brown University (an IM) entwickelt. Wir danken auch für die hervorragende technische Unterstützung durch unsere Tierärzte und Mitarbeiter der Tiereinrichtung.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Hochintensive LichtquelleHarvard Apparatus72-0215
SurgiSuite BedienplattformKent Scientific CorporationSurgiSuiteVerwendet ein wiederaufladbares, batteriebetriebenes Ferninfrarot-Wärmekissen. Laden Sie es über Nacht vor der Operation auf.
SurgiSuite LED-BeleuchtungssetKent Scientific CorporationSURGI-5003
Heißperlen-SterilisatorFine Science Tools18000-45Das Vorheizen dauert 15 - 20 Minuten. Das Sterilisieren der Instrumente dauert 20 s.
Anästhesiesystem für kleine NagetiereVetEquip Inc.901810
IsofluoranPiramal Enterprises66794-017-10
BuprenorphinRhode Island KrankenhausapothekeNDC 12496-0757-1, 12496-0757-5
Chirurgische LupenRobozRS-6687
Beatmungsgerät für kleine NagetiereHarvard-Gerät73-0043
SchmiertropfenThermo Fisher Scientific19-898-350
ElektrorasiererKent Scientific CorporationCL 9990-1201
HaarentfernungscremeNair
TapeThermo Fisher Scientific18-999-380
BetadineThermo Fisher Scientific19-027136
70% Isopropanol TücherThermo Fisher Scientific22-363-750
OP-AbdecktücherBraintreeSP-TS
OP-HandschuheThermo Fisher Scientific18999102D
5-0 Polypropylen-Nähte Ethicon8630G
8-0 Nylon-NähteFine Science Tools12051-08
Platingehärtete SchläucheHarvard Apparat72-1042 0,3 mm Innendurchmesser x 0,6 mm Außendurchmesser
0,9 % KochsalzlösungThermo Fisher Scientific19-310-207
4-0 Polypropylen-NahtmaterialEthicon8631G
1 CC Spritze mit 25-Gauge-NadelThermo Fisher Scientific14-826-100
SchereKent Scientific CorporationINSS600225
PinzetteKent Scientific CorporationINS700100
WattestäbchenThermo Fisher Scientific23-400-118
IV Katheter, 20 GaugeThermo Fisher Scientific
RetraktorKent Scientific CorporationINS 750369
PinzetteFine Science Tools11003-12
Präparierzange, geradeKent Scientific CorporationINS 700101
Präparierzange, gebogenKent Scientific CorporationINS 700103
hämostatische Pinzette, geradeKent Scientific CorporationINS 750451
hämostatische Pinzette, gebogenKent Scientific CorporationINS 750452
GewebezangeKent Scientific CorporationINS 700131
NadelhalterKent Scientific CorporationINS 600109
Schere Kent Scientific CorporationINS 600225
Medical NC9892181

Referenzen

  1. Hausenloy, D. J., Yellon, D. M. New directions for protecting the heart against ischaemia-reperfusion injury: targeting the Reperfusion Injury Salvage Kinase (RISK)-pathway. Cardiovasc Res. 61 (3), 448-460 (2004).
  2. Roffi, M., et al.

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Nachdrucke und Genehmigungen

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