Methodenartikel

Auswertung der Prozedur für die Durchführung einer wachen Zystometrie in einem Mausmodell

DOI:

10.3791/55588

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20. Mai 2017

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1Department of Surgery, University of Vermont, 2Department of Urology and Biomedical Laboratory, University of Southern Denmark, 3Wake Forest Institute for Regenerative Medicine, Wake Forest University, 4Institute for Clinical Medicine, Aarhus University

* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

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Diese Studie beschreibt die chirurgischen Eingriffe und experimentellen Techniken zur Durchführung einer wachen Zystometrie in einer frei bewegenden Maus. Darüber hinaus bietet es experimentelle Beweise für seine Optimierung und Standardisierung zu unterstützen.

Zusammenfassung

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Awake Füllung Zystometrie wurde für eine lange Zeit verwendet, um Blase Funktion in frei bewegenden Mäusen zu bewerten, aber die spezifischen Methoden verwendet, variieren zwischen Laboratorien. Das Ziel dieser Studie war es, das mikrochirurgische Verfahren zu beschreiben, das verwendet wurde, um ein intravesikales Röhrchen zu implantieren, und die experimentelle Technik zum Aufzeichnen des Harnblasendrucks in einer wachen, frei beweglichen Maus. Darüber hinaus werden experimentelle Daten dargestellt, um zu zeigen, wie Chirurgie, sowie Schlauch-Typ und Größe, beeinflussen niedrigere Harnwege Funktion und Aufzeichnung Empfindlichkeit. Die Wirkung des Rohrdurchmessers auf die Druckaufzeichnung wurde sowohl in Polyethylen- als auch in Polyurethan-Schläuchen mit unterschiedlichen Innendurchmessern bewertet. Anschließend wurde das bestmögliche Rohr aus beiden Materialien chirurgisch in die Kuppel der Harnblase von männlichen C57BL / 6-Mäusen implantiert. Zwölfstündige, über Nacht Miktionsfrequenz wurde bei gesunden, intakten Tieren und Tieren 2, 3, 5 und 7 Tage nach der Operation aufgezeichnet. Bei der Ernte, Blasen wVeregen auf Anzeichen von Quellung mit grober Beobachtung und wurden anschließend für pathologische Analyse verarbeitet. Das grösste Ausmaß der Blasenschwellung wurde am Tag 2 und 3 beobachtet, was mit den Verhaltensstörungsdaten korrelierte, die eine signifikant beeinträchtigte Blasenfunktion zeigten. Am Tag 5 hatte sich die Blasenhistologie und die Hohlraumfrequenz normalisiert. Basierend auf der Literatur und den Beweisen, die von unseren Studien zur Verfügung gestellt werden, schlagen wir die folgenden Schritte für die in vivo Aufzeichnung von intravesikalen Druck und void Volumen in einer wachen Maus: 1) Durchführung der Operation mit einem Operationsmikroskop und mikrochirurgische Werkzeuge, 2) Verwenden Sie Polyethylen-10 Schlauch, um Bewegungsartefakte zu minimieren, und 3) Zystometrie am postoperativen Tag 5 durchführen, wenn die Blasenschwellung auflöst.

Einleitung

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Die Füllung der Zystometrie (FC) ist eine diagnostische Methode, bei der ein Katheter in die Harnblase gelegt wird, um den Druck während der langsamen Blasenfüllung aufzuzeichnen. Zuerst eingeführt 1927 als klinische Diagnostik Methode zur Bewertung der unteren Harnwege Funktion, ist es weit verbreitet geblieben. 1 In Forschungsanwendungen kann FC verwendet werden, um die Blasenfunktion bei gesunden und kranken Tiermodellen zu testen und die Wirkungen von pharmakologischen Wirkstoffen zu untersuchen. Nagetier-Tier-Modelle werden häufig verwendet, um niedrigere Harnwege-Funktion zu untersuchen. 2 In dieser Gruppe von Säu....

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Protokoll

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Tiere wurden in der Universität von Vermont Tierpflege-Einrichtung nach institutionellen Richtlinien untergebracht. Alle Tierversuche wurden in Übereinstimmung mit den National Institutes of Health Guide für die Pflege und Verwendung von Labortieren durchgeführt.

1. Intravesikale Röhrenimplantation

  1. Vorbereitung von Schläuchen und Instrumenten für den chirurgischen Eingriff
    1. Schneiden Sie ein 7-cm-Stück PE10-Schlauch, um den Katheter für die Implantation zu machen.
    2. Erstellen Sie eine Fackel an einem Ende des PE10-Rohres, indem Sie langsam das Ende zu einer offenen Flamme vorschieben.
      HIN....

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Ergebnisse

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Es gab keinen signifikanten Unterschied zwischen den Schlauchmaterialien und den Durchmessern in der Konsistenz des Druckanstiegs und fiel in das System während der Schlauchverschlußung. Blasenwand-Schwellpfosten Intravesikale Röhrenimplantation war sowohl für Polyethylen (PE) als auch Polyurethan (PU) Materialien von Bedeutung. Am 2. Tag entwickelte sich eine schwere submuköse Schwellung. Es besetzte die Hälfte des Querschnitts der Blase, was zu einer Behinderung des Lumens führte. Am T.......

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Diskussion

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Optimales Material und Größe der intravesikalen Schläuche

Um den Effekt zu bestimmen, der Schlauchdurchmesser auf Druckaufzeichnungen hat, haben wir verschiedene mikrofluidische Rohre getestet; PE50 (0,58 mm ID), Polyurethan PU027 (0,4 mm ID), PE25 (0,46 mm ID) und PE10 (0,28 mm ID). Für jede Röhre wurde der Druck mit der Infusionspumpe aufgezeichnet, die mit 1 mL / h betrieben wurde, während das Röhrchen rasch von 0 auf 30 cm bewegt wurde. Initiale In-vivo-Experimente versuchten, PE50-Röhrchen.......

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Offenlegungen

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Die Autoren haben nichts offenzulegen.

Danksagungen

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Diese Studie wurde von der Abteilung für Chirurgie der Universität von Vermont, dem Danish Council for Independent Research und vom Universitätskrankenhaus Odense finanziert.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Polyethylen (PE) 10 SchläucheInstechBTPE-10Passend für 30G Steckverbinder/Stecker
Polyethylen (PE) 50 SchläucheInstechBTPE-50Passend für 22G Steckverbinder/Stecker
22 G Einkanal Edelstahl DrehgelenkInstech375/22
Carbon Steel Utility Extension Spring (9/64" OD)Grainger1NAH1Schützt PE50 Schläuche - Auf Länge geschnitten
22 G SteckerInstechSP22/12
Yutaoz Professional Schmelzklebstoff-KlebepistoleYutaozVerwenden Sie eine niedrige Temperatureinstellung (100 &Grad; C) - Jede Heißklebepistole mit einstellbarem Temperaturbereich funktioniert
Surebonder DT-2010 Allzweck-KlebestiftSurebonderJeder Allzweck-Heißkleber funktioniert
Dumont #5 gebogene MikrozangeWorld Precision Instruments500232
Dumont #7 gebogene MikrozangeWorld Precision Instruments14188
Mini-Präparierschere - geradeWorld Precision Instruments503240
Mikro-Mückenzange (12,5 cm)World Precision Instruments500451
Präparierschere - geradeWorld Precision Instruments14393
Castroviejo NadelhalterWorld Precision Instruments503258
Isofluran, USPPhoenix2%, 1 l/min Durchflussrate
Buprenorphin0,05 mg/kg
0,9 % Natriumchlorid-Spülung, USPBaxter
6-0 Ethilon schwarz monofil, nicht resorbierbares NahtmaterialEthiconBlasenbinde
6-0 Vicryl violett geflochtenes, resorbierbares NahtmaterialEthiconMuskelnaht, laufend
6-0 Prolene blau monofil, nicht resorbierbares NahtmaterialEthiconHautnaht, vertikale Matratze, vergraben unterbrochen
KD Legato 210 Infusions-/EntnahmepumpeKD Scientific1,5 mL/h
Einweg-DruckmessumformerDigitimerNL108T2
DruckverstärkerDigitimerNL108A
Power1401-3 DatenerfassungsschnittstelleDigitimer
Spike2 Cambridge Electronic Design LimitedPC-Software zur Druckaufzeichnung
Leica MZ6 Operationsmikroskop für Chirurgie (3,2 - 20X)Leica MicrosystemsVergrößerung
High

Referenzen

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  1. Perez, L. M., Webster, G. D. The History of Urodynamics. Neurourol Urodyn. 11 (1), 1-21 (1992).
  2. Fry, C. H., et al. Animal models and their use in understanding lower urinary tract dysfunction. Neurourol Urodyn. 29 (4), 603-608 (2010).
  3. Maggi, C. A., Santicioli, P., Meli, A.

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Schlagwörter

Intravesikaler Kathetermikrochirurgisches VerfahrenAufzeichnung des BlasendrucksPolyethylen 10 Schlauchpostoperativer Tag 5Harnblaseunterer HarntraktF llzystometrie

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