Dissektion der Maus Bauchspeicheldrüse für histologische Analyse und Metabolic Profiling

Zusammenfassung

Dieser video Artikel enthält eine ausführliche Demonstration der Verfahren erforderlich, um erfolgreich die Bauchspeicheldrüse von einer Maus entfernen durch Präparation für histologische Analyse und metabolic profiling.

Zusammenfassung

Wir haben die Bauchspeicheldrüse spezifischen Transkriptionsfaktor, 1a Cre-Rekombinase untersucht; Lox-Stop-Lox-Kristen Ratte Sarkom, Glycin, Asparaginsäure an das 12-Codon (Ptf1a^{Cre / +}; LSL-Kras^{G12D / +}) Belastung als ein Modell des menschlichen pankreatischen Krebses Maus. Unsere aktuellen Studien soll neue metabolischen Biomarker der Bauchspeicheldrüsenkrebs Progression ermittelt. Wir haben durchgeführt, metabolic profiling von Urin, Kot, Blut, sowie Pankreas-Gewebe-Extrakte und histologische Analysen der Bauchspeicheldrüse, die Krebsentwicklung zu inszenieren. Die Maus-Bauchspeicheldrüse ist keine wohldefinierte solide Organ wie beim Menschen, sondern ist ein diffus verteilte weichen Gewebe, das nicht leicht zu erkennen ist von Einzelpersonen mit Maus Innere Anatomie nicht vertraut oder von Personen, die wenig oder gar keine Erfahrung durchführen Maus-Organ-Sektionen. Der Zweck dieses Artikels ist es, eine detaillierte schrittweise bieten visuelle Demonstration, Novizen bei der Entfernung der Maus Bauchspeicheldrüse durch Dissektion zu führen. Dieser Artikel sollte besonders wertvoll für Studenten und Forscher neue Forschung, die Ernte der Maus Bauchspeicheldrüse durch Präparation für metabolic profiling oder histologische Analysen benötigt.

Einleitung

Die Maus hat ein wichtiges Tier Modell des menschlichen pankreatischen Krebses^1,2entwickelt. In der Ptf1a^{Cre / +}; LSL-Kras^{G12D / +} Maus-Modell, die Kristen Ratte Sarkom (K-Ras) Onkogen ist ausschließlich in der Bauchspeicheldrüse, was Einleitung von präkanzerösen Läsionen in der Bauchspeicheldrüse, bekannt als Pankreas intraepitheliale Neoplasie (liegen), dass der Fortschritt aktiviert zu pankreatischen duktalen Adenokarzinome, gemeinhin als PDACs³. Dieses Maus-Modell-System bietet eines der verfügbaren Tiermodelle für menschlichen pankreatischen Krebs

Protokoll

durchgeführt, in dem Video und weiter unten beschriebenen Abläufe von der institutionellen Animal Care und Nutzung Committee (IACUC) an der Universität Miami genehmigt worden.

1. Vorbereitung und Impuls-Test

1. stellen zwei verschiedene Bereiche für den chirurgischen Eingriff, dem OP-Tisch und dem Post-OP-Tisch. Inszenieren Sie beide Bereiche mit allen Materialien und Utensilien notwendig.
   1. Bühne, die das Betriebssystem Tabelle unter eine belüftete Haube. Ordnen Sie die Tabelle mit der Ausrüstung in einer Weise, die die kontinuierliche und ungehinderte Leistung des Verfahrens erlaubt.
   2. Schaffen eine postoperative ....

Ergebnisse

Abbildung 1 zeigt eine Übersicht über den Arbeitsbereich Umwelt und Abbildung 2 zeigt das Post-OP-Feld. Während diese Einstellung die minimale Menge an Ausrüstung bietet und Inszenierung, Einzelpersonen dies am besten individuell verändern können. Das Protokoll sollte entsprechend den spezifischen Bedürfnissen des Experiments optimiert werden. Dieses Verfahren wird in einer Weise durchgeführt, die das Leben einer Maus, erfordern .......

Diskussion

Bedeutung im Hinblick auf bestehende Methoden
Während andere informelle Videos von Maus Sezierungen vorhanden sind, in diesem video Artikel finden die ersten Profi-Qualität, Peer review, visuelle Demonstration aller die detaillierten Schritte erforderlich für die Extraktion und die Ernte von der Maus Bauchspeicheldrüse durch Dissektion¹⁰ . Mit der Bauchspeicheldrüse wird eine Hauptorgel für metabolische Aktivität und Insulin ermöglicht Produktion, Dissektion und Ernte der Bauch.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Glas	Corning	3140-150	Das im Video verwendete Glas wird nicht mehr hergestellt. Dies ist sein Ersatz.
Deckel des Glases	Corning	9985-150	Der im Video verwendete Glasdeckel wurde nicht mehr hergestellt.  Dies ist sein Ersatz.
15 mL Falcon Tubes	Fisher Scientific	339650
Chirurgische Schere	Fisher Scientific	9201
Quetschflasche	Fisher Scientific	03-409-10DD
100% Ethanol	Fisher Scientific	22-032-103
Formalin	Fisher Scientific	245-684
Schaumstoffplatten	Therapak	562908
Pinzette	Fisher Scientific	200205SHN
1 mL 21G Spritzen	BD Biosciences	309624
50 mL Falcon Röhrchen	Fisher Scientific	339652
2,0 mL Mikrozentrifugenröhrchen	Fisher Scientific	02-681-258
OP-Pads	Fisher Scientific	S67011
T-Pins Länge:  2"	Advance Store Products	X32T-05
Sterilisationstücher	Professional Disposables International Inc.	Q85084
Behälter für scharfe Gegenstände	Fisher Scientific	14-827-122
Analysenwaage	Marshall Scientific	ME-AE200
4L Dewar	Taylor-Wharton	4LD
Flache Weithals-Dewar	Fisher Scientific	F3087-V
Schwimmendes Mikroröhrchengestell	VWR	60986-100
Kryo-Fläschchen 1,2 ml, steril	Fisher Scientific	10-500-25
Isothesie (Isofluran)	Henry Schein Tiergesundheit	050033
Flüssigstickstoff	Wright Brothers	NIT-60-XX
Maus Kras Stamm	The Jackson Laboratory	OO8179
Maus Cre Stamm	MMRRC	OOO435-UNC