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Methodenartikel

Sonographie in experimentellen reproduktiven Untersuchungen an Ratten

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DOI:

10.3791/56038

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2. Dezember 2017

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* These authors contributed equally

In diesem Artikel

Zusammenfassung

Dieses Manuskript beschreibt das Dienstprogramm des Ultraschalls an weiblichen Ratten experimentelle Modelle für reproduktive und gynäkologische Untersuchung durchgeführt. Eine Schritt für Schritt Erklärung wie Ultraschalluntersuchungen Bewertung durchzuführen wird angezeigt.

Zusammenfassung

Mit der Entwicklung der assistierten Fortpflanzung und die ethischen Grenzen der Forschung am Menschen haben Ratten Tiermodelle in der Reproduktionsmedizin verbreitet. In der Vergangenheit stützt sich die Untersuchung der Entwicklung der Geschlechtsorgane bei Nagetieren auf einmalige histologische Untersuchung der ausgeschnittenen Gewebe. Vor kurzem, kann mit der Entwicklung von hochauflösenden transabdominalen Ultraschall, qualitativ hochwertige Sonographie jetzt durchgeführt werden, um die reproduktiven Organe von Ratten, so dass eine neue Methode zur Untersuchung der Fortpflanzungsorgane zu bewerten. Bilder wurden mit einem hochauflösenden ultrasonographische System erhalten. Gynäkologische Sonographie wurde auf 28 acht-Woche-alten nicht trächtigen Ratten und 5 schwanger Sprague-Dawley Ratten durchgeführt. Wir beschreiben, wie Organe des reproduktiven Systems zu erkennen und damit verbundenen Strukturen in typischen Ansichten in verschiedenen Phasen des Östruszyklus radeln. Farbe fließen Doppler verwendet wurde, uterine Arterie Blutfluss messen und bewerten uterine Blut fließen Muster Änderungen in verschiedenen Phasen der Schwangerschaft. Wir haben gezeigt, dass Ultraschall-Untersuchung eine nützliche Methode ist für die Bewertung von Veränderungen der inneren Geschlechtsorgane. Seine Verwendung wirft die Möglichkeit, zusätzliche Experimente, einschließlich medizinische oder chirurgische Verfahren und bietet die Möglichkeit, sonographische Veränderungen an inneren Organen zu überwachen, ohne Tiere.

Einleitung

Ratte Tiermodellen haben in der Reproduktionsmedizin, unter anderem in Embryo und Eierstöcke Transplantation1,2verbreitet. Jedoch in der Vergangenheit die Untersuchung der Entwicklung der Geschlechtsorgane bei Nagetieren stützt sich auf einmalige histologische Untersuchung der ausgeschnittenen Gewebe und die Langzeitstudie des täglichen Fortpflanzungsorgane Änderungen wurde nicht in Ratten3möglich. Ultraschall ist weit verbreitet in assistierten Fortpflanzung beim Menschen seit über 30 Jahren, aber diese wertvolle Technologie wurde nur auf Ratten vor kurzem angewendet.

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Protokoll

Diese Studie wurde durchgeführt in strikter Übereinstimmung mit den Empfehlungen in der Anleitung für die Pflege und Verwendung von Labortieren der National Institutes of Health und in Übereinstimmung mit der Ankunft (Animal Research: Berichterstattung In Vivo Experimente) Richtlinien. Das Protokoll erhalten eine Lizenz für Tierversuche, die Einhaltung der Richtlinie 2010/63/EG mit der RMA-Nummer A13170404 (Anexo 1). Alle Versuche wurden in einem EU-zertifizierten Labor nach nationalen Richtlinien für die ethische Pflege der Tiere (RD 53/2013, EU-Richtlinie 63/2010) durchgeführt. Das Protokoll wurde vom Ausschuss für die Ethik von Tierversuchen der Universität Murcia ....

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Ergebnisse

Es gab keine signifikanten Unterschiede im Antero-posterioren uterine Horn Durchmesser oder in die Dicke des Endometriums zwischen den beiden Seiten der Gebärmutter Horn (Tabelle 1). Verglichen mit der Gruppe 2, die mittlere Endometrium Dicke in der Gruppe 1 war dicker, aber keine signifikanten Unterschiede (P > 0.05) fanden sich zwischen den beiden Gruppen (Abbildung 3). Dennoch fanden wir Flüssigkeit in der Gebärmutter (in 8 von 28 Ratten) in der Nähe des Östrus Zyklus ver.......

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Diskussion

Aufgrund der Verfahrensänderungen und Fehlerbehebung, die erforderlich war, in dieser Studie, obwohl unser Ziel alles, was die Phasen des Östruszyklus in Ratten mittels Ultraschall, Zyklus zu identifizieren konnten wir keine signifikanten Unterschiede finden. Wir vermuten, dass diese Schwierigkeiten sein können, weil die Brunst-Zyklus nur ein paar Tage bei Ratten, im Gegensatz zu den Zyklus bei Frauen dauert. Wir sind sicher, dass alle Messungen durchgeführt wurden, genau zum richtigen Zeitpunkt Unterschiede feststellen........

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Offenlegungen

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Danksagungen

Diese Forschung wurde von Tier Experimente Abschnitt der Universität Murcia und der Geburtshilfe und Gynäkologie-Abteilung von Murcia Universität unterstützt. Wir bedanken uns bei allen die Techniker arbeiten bei CEIB (experimentelle Centro de Investigaciones Biomédicas), des Abschnitts von Tierversuchen der Universität Murcia, die an diesem Projekt mitgearbeitet haben.

....

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
Vevo3100 hochauflösendes In-vivo-Mikrobildgebungssystem*Visual Sonics, inc.www.visualsonics.com/products
integriertes Schienensystem Vevo mit physiologischer Überwachungseinheit.Visual Sonics, Inc.www.visualsonics.com/products
MX400 TransducterVisual Sonics, inc.www.visualsonics.com/products
Vevo Lab SoftwareVisual Sonics, inc.www.visualsonics.com/products
HSD: Sprague Dawley SDEnvigo, inc.für Rattenstämme
Allgemeine Versorgung
CIBERTEC CA-EAC20 Anästhesiewagen-SystemCibertec S.A Anästhesiegerät
Ecogel 100 UltraschallgelEco-Med Pharmaceuticals Inc.
Haarentfernungslotion (Nair) Allgemeine Versorgung
IsofluranEsteve VeterinariaInhalatorische Anästhesie
* Erforderliche Software ist die Vevo-Software, einschließlich der B-Mode-Anwendung, der Pulswellen-Doppler-Anwendung und des Werkzeugpakets zur Analyse der vaskulären Dehnung
Schmiergel .

Referenzen

  1. Hunter, R. K. II, et al. Adipose-Derived Stromal Vascular Fraction Cell Effects on a Rodent Model of Thin Endometrium. PLoS ONE. 10 (12), e0144823(2015).
  2. Wang, H., Dey, S. K. Roadmap to embryo implantation: clues from mouse models. Nat Rev Genet.

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Nachdrucke und Genehmigungen

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