Eine standardisierte Methode zur Messung der inneren Lungenoberfläche über Maus Pneumonektomie und Prothesenimplantation

Zusammenfassung

Die interne Lungenoberfläche (ISA) ist ein kritisches Kriterium für die Beurteilung der Lungenmorphologie und der Physiologie bei Lungenkrankheiten und der verletzungsinduzierten alveolären Regeneration. Wir beschreiben hier eine standardisierte Methode, die die Messvorspannung für ISA sowohl in der Lungenpneumonektomie als auch in den Prothesenimplantationsmausmodellen minimieren kann.

Zusammenfassung

Lungenmorphologie, Physiologie und Atemfunktionen ändern sich sowohl unter physiologischen als auch unter pathologischen Bedingungen. Die innere Lungenoberfläche (ISA), die die Gasaustauschkapazität der Lunge darstellt, ist ein kritisches Kriterium für die Beurteilung der Atemfunktion. Die Verzerrung des Beobachters kann jedoch die Messwerte für lungenmorphologische Parameter erheblich beeinflussen. Das Protokoll, das wir hier beschreiben, minimiert die Schwankungen während der Messung von zwei morphologischen Parametern, die für die ISA-Berechnung verwendet werden: das interne Lungenvolumen (ILV) und der mittlere lineare Schnittpunkt (MLI). Unter Verwendung der ISA als morphometrischer und funktioneller Parameter zur Bestimmung des Ergebnisses der Alveolarregeneration sowohl in Mausmodellen für die Pneumonektomie (PNX) als auch für die Prothesenimplantation fanden wir heraus, dass die erhöhte ISA nach der PNX-Behandlung durch die Implantation einer Prothese in die Brusthöhle signifikant blockiert wurde¹. Die Fähigkeit, ISA genau zu quantifizieren, soll nicht nur die Zuverlässigkeit und Reproduzierbarkeit von Lungenfunktionsstudien in verletzungsinduzierten Alveolarregenerationsmodellen verbessern, sondern auch mechanistische Entdeckungen mehrerer Lungenerkrankungen fördern.

Einleitung

Die Grundfunktion der Lunge ist der Austausch von Sauerstoff und Kohlendioxid zwischen Blutgefäßen und der Atmosphäre. Lungenerkrankungen wie bronchopulmonale Dysplasie (BPD), chronisch obstruktive Lungenkrankheit (COPD) und akute Atemwegsinfektionen führen zu einer verminderten ISA ² . Forscher, die Lungenkrankheit studieren, haben mehrere quantitative Methoden entwickelt, um morphologische Veränderungen in den Lungen, einschließlich MLI, ILV, Anzahl der Gasaustauscheinheiten, ISA und Lungengewebe Compliance ^{2 , 3} zu bewerten. Pionierstudien von Weibel et al.

Protokoll

Alle in diesem Protokoll verwendeten Verfahren wurden gemäß den Empfehlungen in den Richtlinien für die Pflege und Verwendung von Labortieren des Nationalen Instituts für Biowissenschaften, Peking, durchgeführt. 8 Wochen alte CD-1 männliche Mäuse wurden in einer bestimmten pathogenfreien (SPF) -Funktion untergebracht, bis die Experimente durchgeführt wurden. Operationen wurden unter Verwendung von vollständig anästhesierten Mäusen durchgeführt ( dh ohne Zehen-Quetschantworten). Nach der Operation wurden die Mäuse in einem warmen, feuchten Raum mit ausreichend Nahrung und Süßwasser gehalten. Die Mäuse wurden unter Verwendung einer Überdosierung der Anästhesie....

Ergebnisse

Wir haben hier ein Experiment mit einer PNX-behandelten Gruppe und einer Prothesenimplantation (Prothesen-implantierte) Gruppe durchgeführt. Diese Gruppierungen sind die gleichen wie die Gruppierungen, die in einer zuvor veröffentlichten Studie aus unserer Arbeitsgruppe verwendet wurden ¹⁴ .

Die Maus-PNX- und Prothesenimplantationsverfahren sind in Abbildung 2 dargestellt ........

Diskussion

In diesem Protokoll liefern wir detaillierte Beschreibungen über die Messung der pulmonalen Parameter nach der Maus links Lunge PNX und Prothese Implantation. ISA gilt heute als Schlüsselmetrik für die Beurteilung der Atemfunktion bei vielen Lungenerkrankungen und bei der Verletzungsinduzierten alveolären Regeneration. Obwohl die Lungenforschungsgemeinschaft sich über die Nützlichkeit von ISA als nützliche Metrik einverstanden ist, gab es bislang nur wenig die Standardisierung der Messung von ILV und MLI, die beiden Par.......

Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien

Name	Unternehmen	Katalognummer	Kommentare
Kostengünstiges Kauter-Set	Fine Science Tools	18010-00
Noyes Schere	Fine Science Tools	15012-12
Standardmuster Pinzette	Fine Science Tools	11000-12
Castroviejo Micro Nadelhalter	Fine Science Tools	12060-01
Gefäßclips	Fine Science Tools	18374-44
I. V. Kanüle-20 Gauge	Jinhuan Medical Product Co., LTD.	29P0601
Chirurgisches Nahtmaterial	Jinhuan Medical Product Co., LTD.	F602
Maus-Intubationsplattform	Penn-Century, Inc	Modell MIP
Laryngoskop für Kleintiere	Penn-Century, Inc	Modell LS-2-M
TOPO Beatmungsgerät für Kleintiere	Kent Scientific	RSP1006-05L
Wärmeleitpad	Stuart-Ausrüstung	SBH130D
Pentobarbital-Natriumsalz	Sigma	P3761
Heparin-Natriumsalz	Sigma	H3393
Hämatoxylin-Lösung	Sigma	GHS132
Eosin Y-Lösung, alkoholisch	Sigma	HT110116
10 mL Pipette	Thermo Scientific	170356
Paraformaldehyd	Sigma	P6148
O.C.T. Compound	Tissue-Tek	4583
Kryosektionsmaschine	Leica	CM1950
Einweg-Basisformen	Fisher HealthCare	22-363-553
18-Gauge-Nadel	Becton Dickinson	305199
Povidon-Jod	Fisher Scientific	19-027132
70% Ethanol	Fisher Scientific	BP82011
Infusionssets für einzelne Verwenden Sie	Weigao	SFDA 2012 3661704
Phosphatgepufferte Kochsalzlösung	Gibco	10010023
Tapes 3M	Scotch	8915
Wattepad	Vinda	Dr.P
Silikonprothese	Maßgeschneidertes
Hellfeldmikroskop	Olympus	VS120
Linealwerkzeug	Adobe