Alle hier beschriebene Methoden wurden von der lokalen Ethikkommission genehmigt (Doshisha Universität Ethikkommission: 15033), und waren in strikter Übereinstimmung mit den Standards der Deklaration von Helsinki. Informierte Zustimmung wurde von allen Teilnehmern erhalten. Teilnehmer waren männliche Freizeitsportler (Alter, 20.1 ± 1,2 Jahre; Gewicht, 69,7 ± 6,2 kg; Höhe, 176.1 ± 5,8 cm; Körper Fett 13,6 ± 1,5 % und VO2max, 52.6 ± 6,6 mL/min1schnitzelfleisch1).
1. Aufbau des Protokolls Übung
Hinweis: Die vorliegende Studie bestand aus der Bewertung von Blut hormonelle und Metaboliten Dynamik durch Blutentnahme aus der Vene Antecubital während ein HIIE Protokoll.
- Fragen Sie das Thema, eine warme, mit 5 min des Radsports in der Ergometer bei niedriger Intensität durchzuführen. Lassen Sie nach dem Warm-up das Thema für 5 min ruhen.
- Bitte das Thema der folgenden HIIE in das Bein Fahrradergometer durchzuführen: drei Anfälle von 30 s hoch-intensives Training, getrennt durch 4 min. Rest (Abbildung 1).
Hinweis: Die 30 s-Kämpfe bei gleicher Intensität zu 90 % den macht-Durchschnitt von einer zuvor durchgeführten Wingate-Test festzulegen. Finden Sie an anderer Stelle8 für eine vollständige Beschreibung der Wingate-Test.
- Um die Arbeitsbelastung für die 30 s-Kämpfe zu berechnen, verwenden Sie die folgenden Gleichungen:
Arbeit = Kraft x Abstand (Gleichung 1)
Kraft = Masse x Beschleunigung (Gleichung 2)
Arbeit = (Masse x Beschleunigung) x Abstand (Gleichung 3)
Hinweis: In diesem Modell ist die Masse der Arbeitslast (kg), und die Beschleunigung beträgt 9,81 m/s2. Die Entfernung beträgt der Durchmesser der Räder (1,622 m). Da das Rad 3,7 zeitgesteuerte /peal Drehung dreht, ist der Abstand pro Pedal Umdrehung 3,7 x 1.662. Andererseits, weil die Trittfrequenz 90 u/min-1ist, haben wir ein Pedalabstand mit 90 zu multiplizieren.
Arbeit = Arbeitslast x 9,81 x 3,7 x 1.622 x 90 (Gleichung 4)
Belastung = Arbeit / (9,81 x 3,7 x 1.622 x 90) (Gleichung 5)
(2) Katheterisierung
Hinweis: Rohre und vacutainer sollten im Vorfeld zu vermeiden, dass Sie Zeit verlieren beschriftet werden.
- Wickeln Sie einen Druckverband am Arm für die Katheterisierung ausgewählt. Um dies zu tun, legen Sie eine elastisches Band auf der Rückseite der gewählten Arm. Dehnen die Band, machen Sie eine Schleife mit der Band um den Arm und binden Sie die elastischen.
- Wählen Sie die sichtbaren Antecubital Vene und Sterilisieren Sie die Haut mit Alkohol oder Ethanol.
- Führen Sie die Spitze der sterilisierte Kanüle in die Vene in einem ungefähren Winkel von 15° mit der Haut.
Hinweis: Die Kanüle sollte von der proximalen, distalen Richtung eingefügt werden. Wenn Kanülierung erfolgreich ist, sollte eine retrograde Entnahme von Blut beobachtet werden.
- Sichern Sie die Kanüle mit der Hand, und entfernen Sie die Nadel sanft.
Hinweis: Um den Winkel der Nadel während der Übung zu halten, können Baumwolle Gewebe zwischen Haut und Nadel verwendet werden. Befestigen Sie diese Struktur mit einem Band.
- Verbinden Sie ein Vacutainer mit Heparin und aspirat für die erste Blutprobe (ca. 2,5 mL). Unmittelbar nach kühlen Sie der Blutentnahme indem man es in eine Eisbox für nicht länger als 40 Minuten. Bitten Sie ein Assistent um Hilfe, wenn Blutgaswerte analysiert werden sollen.
- Schließen Sie einen Schlauch an den Katheter und Spritzen Sie Heparin auf die volle Länge des Rohres um eine Blutgerinnung zu vermeiden. Schließen Sie den Schmetterling.
- Mit Klebeband, stabilisieren Sie den Katheter. Stellen Sie sicher, dass an dieser Stelle die Arm-Beweglichkeit des Themas mit der Blutentnahme nicht stört. Um diese Bedingung zu bestätigen, werden Sie sicher, dass die Nadelposition jede Bewegung nicht betroffen ist.
3. Blut Samplings
- Entfernen Sie das Heparin mithilfe einer Vacutainer bis es nur Blut in den Katheter gibt. Wenn Blut Rückblende beobachtet wird, sammeln Sie die Probe wie in Schritt 2.5 beschrieben.
- Spritzen Sie nach der Probenentnahme Heparin wieder in den Katheter Schlauch Blutgerinnung zu vermeiden. Nach dieser Aktion kann Schritt 2.5 für mehrere Proben Sammlung wiederholt werden.
- Nach die letzte Probe erhoben werden, sorgfältig die Kanülierung Rohr zu entfernen und die Haut mit Alkohol reinigen. Um mögliche Blutungen zu vermeiden, bitten Sie, das Thema weiterhin sterilisiert Baumwolle an der Stelle wo die Katheterisierung gemacht wurde.
- Nachdem Blut in die Vacutainer-Röhrchen gesammelt, sorgfältig etwa 1,5 mL Blut zu einem 1,5 mL Schlauch und halten Sie die Rohre auf dem Eis.
- Maßnahme-Blut-Laktat aus dem restlichen Blut mit einem Laktat-Detektor. Am selben Tag erhalten Sie dem Plasma der Blutproben (rund 1,5 mL Blut).
- Für Plasma-Teilung Zentrifugieren der Blutproben für 5 min bei 5000 X g bei 4 oC, und Trennen des Überstands in ein neues 1,5 mL-Tube.
- Wiederholen Sie die Zentrifugation noch einmal um das Plasma zu reinigen.
- Nach der Trennung Plasma speichern Sie die Proben bei-80 oC bis die Hormon-Analyse.
- Das Plasma-Insulin mit einem ELISA-Kit wie pro des Herstellers Protokoll (siehe Tabelle der Materialien) zu messen.