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Methodenartikel

Gleichzeitige Aufnahmen der kortikalen lokales Feld Potentiale, Elektrokardiogramm, Elektromyogramm und Atemrhythmus aus einem frei beweglichen Ratte

11K Aufrufe

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DOI:

10.3791/56980

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2. April 2018

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In diesem Artikel

Zusammenfassung

Diese Studie stellt eine Methode für die gleichzeitige Aufzeichnung von lokales Feld Potenziale im Gehirn, EKG, Elektromyogrammen und Signale einer frei beweglichen Ratte zu atmen. Diese Technik, die experimentelle Kosten reduziert und vereinfacht die Analyse der Daten, wird zum Verständnis der Wechselwirkungen zwischen Gehirn und periphere Organe beitragen.

Zusammenfassung

Überwachung der physiologischen Dynamik des Gehirns und des peripheren Geweben ist notwendig für eine Reihe von Fragen, wie das Gehirn kontrolliert Körper Funktionen und inneren Organe Rhythmen, wenn Tiere emotionale Herausforderungen und Veränderungen in ausgesetzt sind ihrer Wohnwelten. Im Allgemeinen werden Experimente, Signale von verschiedenen Organe wie das Gehirn und das Herz von unabhängigen Recording-Systeme erfasst, die mehrere Aufnahmegeräte und verschiedene Verfahren für die Bearbeitung der Datendateien erfordern. Diese Studie beschreibt eine neue Methode, die gleichzeitig elektrischen Biosignalen überwachen können, darunter Zehntausende lokales Feld Potenziale in mehreren Hirnregionen, Elektrokardiogramme, die das Herzrhythmus darstellen, Elektromyogrammen, die wach darstellen / schlafbezogenen Muskelkontraktion und Signale in einer frei beweglichen Ratte zu atmen. Aufnahmekonfiguration dieser Methode basiert auf eine konventionelle Mikro-Laufwerk-Array für kortikale lokales Feld möglicher Aufnahmen, in denen zig Elektroden untergebracht und die Signale, die von diesen Elektroden erhalten sind integriert in einem einzigen Schalttafel montiert auf den Kopf des Tieres. Hier wurde diese Aufnahme-System verbessert, so dass Signale aus den peripheren Organen auch eine elektrische Schnittstelle-Board übertragen werden. In einer einzigen Operation werden Elektroden zuerst separat in die entsprechenden Körperteile und den Zielgebieten Gehirn implantiert. Die offenen Enden der all diese Elektroden werden dann auf einzelne Kanäle von der Schalttafel über dem Kopf des Tieres verlötet, so dass alle Signale in elektrische Einplatinen integriert werden können. Dieses Board zu einem Aufnahmegerät anschließen ermöglicht die Sammlung aller Signale in einem einzigen Gerät, das experimentelle Kosten reduziert und vereinfacht, Datenverarbeitung, da alle Daten in der gleichen Datendatei behandelt werden können. Diese Technik wird das Verständnis für die neurophysiologische Korrelate der Zusammenhänge zwischen zentralen und peripheren Organe unterstützen.

Einleitung

Das zentrale Nervensystem steuert Körper Staaten als Reaktion auf verschiedene Veränderungen der Umwelt, und dieses Steuerelement ist in der Regel als Veränderungen der Herzfrequenz, Atemfrequenz und Muskelkontraktionen vertreten. Jedoch haben einige Studien getestet wie periphere physiologische Faktoren kortikale Aktivität zugeordnet sind. Um dieses Problem zu beheben, ist eine groß angelegte Aufnahmemethode zur Überwachung von elektrischen Biosignalen von zentralen und peripheren Gewebe notwendig. In der Großhirnrinde sind lokale Feld möglicher (LFP) Signale extrazellulär von Elektroden aufgenommen, die in der kortikalen Gewebe1,

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Protokoll

Alle Verfahren mit tierische Themen wurden nach dem NIH-Leitlinien für die Pflege und Verwendung von Tieren durchgeführt.

1. Vorbereitung des integrativen Micro-Drive Arrays

  1. Erstellen eines Micro-Drive Arrays für kortikale LFP-Aufnahmen wie beschrieben an anderer Stelle1,2,3. Lassen Sie mindestens 6 Metall Löcher öffnen auf eine Elektrode Schnittstellenkarte (EIB) für den Einsatz als ECG/EMG/BR-Kanäle, die mit Bioflex Drähte verbunden sind, wie unter 1.2 beschrieben.
  2. Schneiden Sie einen Bioflex Draht in 6 Stücke mit einer Länge ....

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Ergebnisse

Diese Methode kann gleichzeitig bioelektrische Signale von mehreren Organen erfassen, die die neuronale Aktivität des Gehirns, Herzschlag, Atmung, Rhythmus und skelettartiger Muskel-Kontraktionen (Abbildung 1)darstellen. Abbildung 4 stellt repräsentative Erfassung von Daten aus einem frei beweglichen Ratte, die in einem rechteckigen Feld (25 × 40 cm2) frei auf Futtersuche war. Die Beispiel-Dataset enth.......

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Diskussion

Für das Verständnis, wie das Gehirn moduliert peripheren Bewegungsstufen und Vice Versa, großflächige Aufnahme Methoden zur elektrischen Biosignalen aus mehreren Körperregionen gleichzeitig zu erfassen sind notwendig. Diese Studie beschrieben ein chirurgischer Eingriff und eine Aufnahme-System für die Überwachung der zerebralen lokales Feld Potentiale, Herzfrequenzen, das Ausmaß der Muskelaufbau und Atemfrequenz, der auf eine Aufnahme-System verbessert worden, die für verwendet wird extrazelluläre Aufnahmen im Gehirngewe.......

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Offenlegungen

Die Autoren haben nichts preisgeben.

Danksagungen

Diese Arbeit wurde unterstützt von Kaken-Hallo (17 H 05939; 17 H 05551), die Nakatomi-Stiftung und der Suzuken Memorial Foundation.

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Materialien

Liste der in diesem Artikel verwendeten Materialien
NameUnternehmenKatalognummerKommentare
FEP Anschlussdraht Litze Edelstahl Cooner Wire Company, Chatsworth, CAAS 633Bioflex-Draht
EIB-36-PTBNeuralynx, Inc., Bozeman, MTEIB-36-PTBEIB
Cereplex  MBlackrock  Microsystems, Salt Lake City, UTDigitaler Headstage
Cereplex Direct Blackrock  Mikrosysteme, Salt Lake City, UTDatenerfassungssystem
UEW Polyurethan-LackdrahtOyaide.com, Tokio, JapanUEW 0,14 mm 20 m Lackdraht
SD-102Narishige, Tokio, JapanSD-102Hochgeschwindigkeitsbohrmaschine
Minimo ONE SERIES ver.2Minitor Co.,Ltd, Tokio, JapanC2012Hochgeschwindigkeitsbohrmaschine Netzteil 
Provinice 250 mLShofu Inc., Kyoto, Japan213620136Dentalzement
Anästhesiemittel für Kleintiere Biomachinery, Chiba, JapanTK-7Anästhesiemittel 
BuprenorphinhydrochloridSigma-Aldrich, St. Louis, MOB7536-1MLAnalgetikum
IsofluranDS Pharma Animal Health, Osaka, Japan Isoflu 250mL
Vaseline, weiß  Wako Pure Chemical Industries, Ltd., Osaka, Japan224-00165 Tierarzt-Salbe 
  NatriumalginatNacalai tesque, Kyoto, Japan31131-85
Calciumchlorid-DihydratWako Pure Chemical Industries, Ltd., Osaka, Japan031-00435 
Edelstahlschraube M1.0 & mal; 4.0 MonotaRO, Hyogo, Japan42617504Edelstahlschraube für BR-Elektroden
Edelstahlschraube M1,4 x 3.0MonotaRO, Hyogo, Japan42617687Edelstahlschraube für g/r-Elektroden und Anker

Referenzen

  1. Kloosterman, F., et al. Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Drive Fabrication. JoVE. (26), e1094(2009).
  2. Nguyen, D. P., et al. Micro-drive Array for Chronic in vivo Recording: Tetrode Assembly. Journal of Visualized Experiments : JoVE

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Nachdrucke und Genehmigungen

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